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题名人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定
被引量：5
- 1
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作者
杨芳
何援利
姜孝玉
刘芸
彭冬先
宗利丽
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机构
南方医科大学珠江医院妇产科
中山大学生命科学院医药分子生物学实验室
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出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第4期416-418,共3页
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基金
广东省科技厅科技计划项目(2003B30502)~~
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文摘
目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白。方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素编码区基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆入pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α进行表达、纯化及活性测定。结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性。结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础。
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关键词
人内皮抑素
基因克隆
表达
纯化
抗血管生成作用
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Keywords
human endostatin
gene cloning
expression
purification
antiangiogenesis
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分类号
R737.3
[医药卫生—肿瘤]
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题名人分泌型内皮抑素质粒的构建及序列测定
被引量：4
- 2
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作者
杨芳
何援利
姜孝玉
刘芸
彭冬先
宗利丽
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机构
第一军医大学珠江医院妇产科
中山大学生命科学院医药分子生物学实验室
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出处
《医学研究生学报》
CAS
2005年第1期11-12,16,共3页
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基金
广东省科技厅科技计划项目 (批准号 :2 0 0 3B3 0 5 0 2 )
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文摘
目的 :旨在获得人内皮抑素 (endostatin)分泌型基因片段。 方法 :合成含信号肽的上游引物 ,用聚合酶链反应技术克隆人分泌型内皮抑素基因 ,10g/L琼脂糖凝胶电泳后回收 ,将其重组入PGEM T载体 ,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。 结果 :经Genbank分析证实 ,所获得的 6 4 5bp基因片段序列属于信号肽及人内皮抑素功能区段基因 ,翻译为蛋白质序列正确。 结论 :本研究为应用内皮抑素基因进行肿瘤的抗血管生成治疗奠定了基础。
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关键词
内皮抑素
基因
聚合酶链反应
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Keywords
Endostatin
Gene
Polymerase chain reaction
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分类号
Q781
[生物学—分子生物学]
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