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花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
1
作者
毛黎敏
张勇
+5 位作者
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期86-90,96,共6页
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA...
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA-LHβα。再利用电转化法将其转入到酵母野生型菌株X-33中,在含不同浓度的zeocinYPDS平板上筛选高拷贝转化子,阳性克隆经φ=0.7%甲醇诱导表达,表达产物采用SDS-PAGE和western blot进行分析,得到所表达的产物相对分子质量约为45 000。
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关键词
花鳗鲡
促黄体生成激素
LINKER
共表达载体pPICZαA-LHβα
毕赤酵母
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题名
花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
1
作者
毛黎敏
张勇
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
机构
海南
大学
海洋学院
暨
热带
生物
资源
教育部
重点
实验室
中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室//中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期86-90,96,共6页
基金
国家自然基金面上资助项目(30770283)
广东省教育部产学研结合资助项目(2010B090400551)
+1 种基金
江苏省科技成果转化专项资金资助项目(BA2009083)
海南省教育厅高等学校科学研究资助项目(Hjkj20082 22)
文摘
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA-LHβα。再利用电转化法将其转入到酵母野生型菌株X-33中,在含不同浓度的zeocinYPDS平板上筛选高拷贝转化子,阳性克隆经φ=0.7%甲醇诱导表达,表达产物采用SDS-PAGE和western blot进行分析,得到所表达的产物相对分子质量约为45 000。
关键词
花鳗鲡
促黄体生成激素
LINKER
共表达载体pPICZαA-LHβα
毕赤酵母
Keywords
Anguilla marmorata
luteinizing hormone
linker
co-expression plasmid pPICZaA-LHβa
Pichia pastoris
分类号
Q575.12 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
毛黎敏
张勇
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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