【目的】探讨α7烟碱乙酰胆碱受体（α7 n Ach R）激动剂对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其分子机制。【方法】培养出生2~3d大鼠心肌成纤维细胞（CF）,取传代2~4代细胞,分为1空白对照组（control）;...【目的】探讨α7烟碱乙酰胆碱受体（α7 n Ach R）激动剂对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其分子机制。【方法】培养出生2~3d大鼠心肌成纤维细胞（CF）,取传代2~4代细胞,分为1空白对照组（control）;2模型组（AngⅡ10-7 mol/L）;3ACh预处理组：ACh＋AngⅡ组（ACh 10-4 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L）;4α7n ACh R激动剂组：α7n ACh R激动剂＋AngⅡ组（PNU-282987 5×10-6 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L）;5α7n ACh R拮抗剂组：ACh＋甲基牛扁碱柠檬酸盐（MLA）＋AngⅡ组（ACh 10-4 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L＋MLA 1×10-6 mol/L）。干预24 h后,应用CCK-8试剂盒检测CF的增殖能力,western blot检测胶原蛋白Ι、α-SMA、α7烟碱乙酰胆碱受体（α7n ACh R）、核中p65蛋白表达;Real-time PCR检测α7n ACh R的m RNA表达。【结果】AngⅡ干预24h,CF增殖显著提高,胶原蛋白Ι、α-SMA、核中p65蛋白的表达明显升高,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达降低;Ach、α7n ACh R激动剂预处理后抑制CF增殖,胶原蛋白Ι、α-SMA和核中p65蛋白的表达降低,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达升高;Ach＋MLA预处理,CF增殖再次提高,胶原蛋白Ι、纤维化因子α-SMA、核中p65蛋白的表达再次明显升高,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达降低。【结论】α7n ACh R激动剂抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成,其机制可能与NF-κB信号通路有关。展开更多
目的:心肌纤维化是心脏疾病核心病理生理机制,近年来内皮细胞发生间质转化(Endothelial to mesenchymal transition,EndMT)被认为是心肌纤维化的来源之一。已有研究证实长链非编码RNA MALAT1参与肝脏纤维化和心脏内皮功能调节。本研究...目的:心肌纤维化是心脏疾病核心病理生理机制,近年来内皮细胞发生间质转化(Endothelial to mesenchymal transition,EndMT)被认为是心肌纤维化的来源之一。已有研究证实长链非编码RNA MALAT1参与肝脏纤维化和心脏内皮功能调节。本研究旨在探索长链非编码RNA MALAT1是否参与心脏内皮细胞发生EndMT。展开更多
文摘【目的】探讨α7烟碱乙酰胆碱受体（α7 n Ach R）激动剂对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其分子机制。【方法】培养出生2~3d大鼠心肌成纤维细胞（CF）,取传代2~4代细胞,分为1空白对照组（control）;2模型组（AngⅡ10-7 mol/L）;3ACh预处理组：ACh＋AngⅡ组（ACh 10-4 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L）;4α7n ACh R激动剂组：α7n ACh R激动剂＋AngⅡ组（PNU-282987 5×10-6 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L）;5α7n ACh R拮抗剂组：ACh＋甲基牛扁碱柠檬酸盐（MLA）＋AngⅡ组（ACh 10-4 mol/L＋AngⅡ10-7 mol/L＋MLA 1×10-6 mol/L）。干预24 h后,应用CCK-8试剂盒检测CF的增殖能力,western blot检测胶原蛋白Ι、α-SMA、α7烟碱乙酰胆碱受体（α7n ACh R）、核中p65蛋白表达;Real-time PCR检测α7n ACh R的m RNA表达。【结果】AngⅡ干预24h,CF增殖显著提高,胶原蛋白Ι、α-SMA、核中p65蛋白的表达明显升高,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达降低;Ach、α7n ACh R激动剂预处理后抑制CF增殖,胶原蛋白Ι、α-SMA和核中p65蛋白的表达降低,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达升高;Ach＋MLA预处理,CF增殖再次提高,胶原蛋白Ι、纤维化因子α-SMA、核中p65蛋白的表达再次明显升高,α7n ACh R的m RNA和蛋白水平均表达降低。【结论】α7n ACh R激动剂抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成,其机制可能与NF-κB信号通路有关。
