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灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响 被引量：52
1
作者 马丽 朱邦豪 +3 位作者 陈健文 丘钦英 周家国 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1030-1033,共4页
目的　在链脲菌素诱导的糖尿病大鼠模型上 ,灯盏花素与化学合成药氨基胍相比较来探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及与氧化应激的关系。方法　用链脲菌素诱导糖尿病大鼠模型后 ,将糖尿病大鼠分为 :糖尿病组、灯盏花素组 (0 1g&#... 目的　在链脲菌素诱导的糖尿病大鼠模型上 ,灯盏花素与化学合成药氨基胍相比较来探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及与氧化应激的关系。方法　用链脲菌素诱导糖尿病大鼠模型后 ,将糖尿病大鼠分为 :糖尿病组、灯盏花素组 (0 1g·kg-1)和氨基胍组 (饮水含 1g·L-1的氨基胍 )。在给药 15～ 17wk后进行与氧化应激相关的各项实验观察。结果　① 15～ 17wk的糖尿病大鼠与正常对照组相比 :肾指数显著增加 ,肾脏的抗氧化能力显著降低且氧化应激增强。②灯盏花素组与糖尿病组相比 :肾指数显著降低 ,总抗氧化能力和肾脏超氧化物歧化酶活性显著提高 ,脂质过氧化产物丙二醛显著降低。③氨基胍组与糖尿病组相比 :肾脏超氧化物歧化酶活性显著提高 ,肾脏的脂质过氧化产物丙二醛显著性降低 ,总抗氧化能力差异无显著性。结论　糖尿病大鼠与正常大鼠相比肾脏抗氧化能力降低且氧化应激增强 。 展开更多
关键词 糖尿病 氧化应激 灯盏花素 氨基胍 超氧化物歧化酶 丙二醛 糖尿病肾病
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IGF-1经PI3K/Akt依赖性途径保护苯妥英诱导的小脑颗粒神经元凋亡 被引量：15
2
作者 赵灵芝 银巍 +4 位作者 苏兴文 肖茹 曹林 邱鹏新 颜光美 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期53-57,共5页
目的　观察胰岛素样生长因子 1 (insulin likegrowfactor 1, IGF 1)对苯妥英(100μmol·L-1 )处理的大鼠小脑颗粒神经元 (cerebellargranularneurons, CGNs)存活率的影响,并探讨其与PI3K/Akt通路的关系。方法　体外培养 8的小脑颗... 目的　观察胰岛素样生长因子 1 (insulin likegrowfactor 1, IGF 1)对苯妥英(100μmol·L-1 )处理的大鼠小脑颗粒神经元 (cerebellargranularneurons, CGNs)存活率的影响,并探讨其与PI3K/Akt通路的关系。方法　体外培养 8的小脑颗粒神经元,同时给予 100μmol·L-1苯妥英和μmol·L-1 IGF 1, 48h后行凋亡分析,观察IGF 1对苯妥英诱导的小脑颗粒神经元的保护作用;采用PI3K/Akt通路特异性抑制剂LY294002(50μmol·L-1 )预先与小脑颗粒神经元孵育 30min,再加 1μmol·L-1 IGF 1和 100μmol·L-1苯妥英共孵育 48h,测定神经元存活率,观察IGF 1与PI3KAkt通路的关系;Westernblot法检测苯妥因处理不同时间小脑颗粒神经元内磷酸化Akt水平及总Akt的表达量,并观察IGF 1对磷酸化Akt水平的影响,进一步探讨IGF 1的作用是否经PI3K/Akt通路。结果　①1μmol·L-1 IGF 1可明显抑制 100μmol·L-1苯妥英引起的小脑颗粒神经元的凋亡明显提高小脑颗粒神经元的存活率,使其凋亡特征消失。②PI3K/Akt通路特异性抑制剂LY294002可取消IGF 1的保护作用。③苯妥英使小脑颗粒神经元内磷酸化Akt水平明显降低,但不影响总Akt表达量。④IGF 1可明显恢复被苯妥英抑制的磷酸化Akt的水平。结论　IGF 1保护苯妥英诱导的小脑颗粒神经元凋亡。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1 苯妥因 PI3K/AKT通路 小脑颗粒神经元 凋亡
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灯盏花素对人脐静脉内皮细胞胞内Ca^(2+)水平的调控作用 被引量：11
3
作者 潘雪刁 朱邦豪 +1 位作者 马丽 刘捷 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期672-677,共6页
目的探讨灯盏花素对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)胞内Ca2+水平([Ca2+]i)的调控作用。方法采用新一代Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记培养的HUVECs,激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察灯盏花素对培养的HUVECs胞内Ca2+水平的调控... 目的探讨灯盏花素对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)胞内Ca2+水平([Ca2+]i)的调控作用。方法采用新一代Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记培养的HUVECs,激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察灯盏花素对培养的HUVECs胞内Ca2+水平的调控作用。结果在胞外有Ca2+或无Ca2+的情况下,灯盏花素均可引起[Ca2+]i的短暂性升高;灯盏花素的Ca2+释放作用与钙泵抑制剂CPA存在着交迭;灯盏花素能够抑制由KCl所引起的[Ca2+]i的升高;灯盏花素对胞内Ca2+池耗竭后胞外复Ca2+所引起的钙内流无明显阻断作用。结论灯盏花素可引起胞内Ca2+池的Ca2+释放,其释放的Ca2+来自CPA敏感的Ca2+池。灯盏花素也可抑制经电压依赖性Ca2+通道的Ca2+内流,对Ca2+池耗竭后引起的Ca2+内流通道无明显阻断作用。 展开更多
关键词 灯盏花素 内皮细胞 钙离子
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YZ-2蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备 被引量：10
4
作者 臧林泉 邱鹏新 +1 位作者 肖茹 颜光美 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期205-207,共3页
目的:生物信息学分析与脑缺氧密切相关的新蛋白质YZ-2,以及制备其多克隆抗体。方法:根据生物信息学分析预测出YZ-2蛋白质的二级结构、亲水性、抗原性等理化特性,以这些分析预测为依据,经过同源性检索后设计出一段由22个氨基酸组成的多肽... 目的:生物信息学分析与脑缺氧密切相关的新蛋白质YZ-2,以及制备其多克隆抗体。方法:根据生物信息学分析预测出YZ-2蛋白质的二级结构、亲水性、抗原性等理化特性,以这些分析预测为依据,经过同源性检索后设计出一段由22个氨基酸组成的多肽,免疫家兔得到多克隆抗体,并用ELISA、Westernblot等方法鉴定其特异性和滴度。结果:①成功分析预测其抗原性和亲水性;②制备了抗YZ-2蛋白多克隆抗体;③以此多克隆抗体经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹,检测YZ-2蛋白的表达,证实此抗体效价较高、特异性强。结论:利用生物信息学较好地预测出YZ-2的亲水性和抗原性,并成功制备了其较高特异性的多克隆抗体。 展开更多
关键词 YZ-2 多克隆抗体 生物信息学
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人参皂苷R_d及其C_(12)手性异构体对缺氧/再复氧后蛋白酪氨酸磷酸化的抑制作用 被引量：2
5
作者 曾飒 关永源 +5 位作者 刘德育 贺华 王炜 丘钦英 王雪融 周家国 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期274-278,共5页
目的　探讨人参皂苷Rd C12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法　建立牛主动脉内皮细胞 (BAEC)缺氧 /再复氧 (H/R)损伤模型 ;MTT法研究Rd 及Rd C12 手性异构体 (12 epi Rd)对H/R损伤BAEC的保护作用 ;Western印迹法检测蛋白酪氨酸... 目的　探讨人参皂苷Rd C12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法　建立牛主动脉内皮细胞 (BAEC)缺氧 /再复氧 (H/R)损伤模型 ;MTT法研究Rd 及Rd C12 手性异构体 (12 epi Rd)对H/R损伤BAEC的保护作用 ;Western印迹法检测蛋白酪氨酸磷酸化 (TPP)水平 ,研究二者对H/R损伤BAEC的TPP水平的影响。结果　 0 .5～ 6 4μmol·L- 1的Rd 及12 epi Rd 能浓度依赖性的保护H/R损伤的BAEC ,二者所能达到的最大存活率分别为 (72 .7± 1.5 ) %和 (70 .0± 1.5 ) % ,EC50 分别为 (1.0 6± 0 .19)和 (1.88±0 .5 5 ) μmol·L- 1(P <0 .0 5 )。Rd 及 12 epi Rd 均可抑制H/R引起的TPP水平的提高 ,浓度为 1,4 ,16μmol·L- 1时 ,Rd 的抑制率分别可达 (2 4 .3± 6 .8) % ,(5 2 .6± 8.7) %及 (73.4± 11.4 ) % ;而 12 epi Rd 的抑制率分别可达 (12 .8± 4 .4 ) % ,(2 4 .1± 10 .3) %及(4 2 .5± 13.0 ) % ,二者在三个浓度点的抑制率均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　人参皂苷Rd C12 手性碳构型的改变对其保护H/R损伤BAEC的作用及抑制H/R诱导的TPP水平增强的作用有一定的影响。RdC12 手性碳构型改变明显降低其抑制TPP增强的作用可能是其保护作用下降的重要原因之一。 展开更多
关键词 人参皂苷 人参 手性异构体 内皮 血管 缺氧 磷酸化
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反义ClC-3寡核苷酸促进thapsigargin诱导的PC12细胞凋亡 被引量：1
6
作者 张海宁 关永源 +1 位作者 丘钦英 贺华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期614-619,共6页
目的　研究反义ClC 3寡核苷酸对thapsigargin诱导的细胞凋亡的影响。方法　蛋白免疫印迹法检测ClC 3蛋白的表达 ;MTT法检测反义ClC 3寡核苷酸对TG诱导的细胞生长的影响 ;形态学方法、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析PC12细胞... 目的　研究反义ClC 3寡核苷酸对thapsigargin诱导的细胞凋亡的影响。方法　蛋白免疫印迹法检测ClC 3蛋白的表达 ;MTT法检测反义ClC 3寡核苷酸对TG诱导的细胞生长的影响 ;形态学方法、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析PC12细胞在转染ClC 3反义寡核苷酸后 ,TG诱导的细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况。结果　与对照组相比 ,反义ClC 3寡核苷酸呈浓度和时间依赖性地抑制ClC 3蛋白的表达 ;使TG诱导的PC12细胞存活率降低 ,凋亡程度加强 ,差异有显著性 ,而正义及随义ClC 3寡核苷酸对此没有影响。结论　反义ClC 3寡核苷酸对TG诱导的PC12细胞凋亡有促进作用。 展开更多
关键词 CIC-3 氯通道 THAPSIGARGIN 凋亡
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C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响 被引量：1
7
作者 马涛 邱鹏新 颜光美 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期404-408,共5页
【目的】研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响。【方法】通过SOEingPCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达。表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westerenblot进行鉴定。之后... 【目的】研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响。【方法】通过SOEingPCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达。表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westerenblot进行鉴定。之后分析其生化特性。【结果】rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westerenblot得到证实。生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较rFⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加。【结论】删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列。 展开更多
关键词 血重组 蛇毒纤溶酶 序列 删除 C端 PASTORIS SDS-PAGE 热敏感性 突变体 blot PCR方法 胰岛素B链 诱导表达 生化特性 生化分析 裂解位点 圆二色谱 特异性 rF 活性 热处理
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渗透压、肾上腺素、激活PKC对血管平滑肌细胞Cl^-运动的影响
8
作者 任京力 丘钦英 +3 位作者 贺华 周园 熊大志 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期263-268,共6页
目的　探讨血管平滑肌细胞容积性调节Cl- 运动的机制。方法　用Cl- 特异的荧光探针 MEQ及生物荧光双波长影像分析系统 ,观察渗透压、肾上腺素、PKC的激活以及细胞外Cl- 浓度 ([Cl- ] o)的改变对容积性调节Cl- 运动的影响。结果　A10细... 目的　探讨血管平滑肌细胞容积性调节Cl- 运动的机制。方法　用Cl- 特异的荧光探针 MEQ及生物荧光双波长影像分析系统 ,观察渗透压、肾上腺素、PKC的激活以及细胞外Cl- 浓度 ([Cl- ] o)的改变对容积性调节Cl- 运动的影响。结果　A10细胞静息时胞质氯离子浓度 ([Cl- ] i)为(3 0 3 9± 3 0 1)mmol·L- 1(n =3 0 ) ;低渗条件使Cl- 外流 ,[Cl- ] i 由静息时 (3 0 87± 3 11)mmol·L- 1降低到 (2 4 3 9±2 56)mmol·L- 1(n =3 0 ,P <0 0 5) ;高渗时则从 (2 4 3 9±2 56)mmol·L- 1增加到 (3 4 64± 3 46)mmol·L- 1(n =3 0 ,P <0 0 5) ;肾上腺素 (10 μmol·L- 1)能降低 [Cl- ] i,BAPTA AM (2 0 μmol·L- 1)能完全抑制 10 μmol·L- 1肾上腺素引起的[Cl- ] i 变化 ,但是两者对渗透性改变引起的 [Cl- ] i 变化均无影响 ;10 0nmol·L- 1PDBu可以完全抑制容积性调节的Cl-运动 ;降低 [Cl- ] o 可以显著增加低渗时Cl- 的外流。结论　在A10细胞上 ,存在着容积性调节的Cl- 运动及Ca2 + 依赖性的Cl- 运动。容积性调节的Cl- 运动在低渗时激活 ,高渗时失活 ;不受胞内外Ca2 + 的影响 ;PKC的激活参与了容积性调节的Cl- 展开更多
关键词 渗透压 肾上腺素 容积性调节的Cl^-运动 血管平 滑肌细胞
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普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的抑制作用(英文)
9
作者 孙林光 黄奕俊 +3 位作者 苏兴文 孔天翰 邱鹏新 颜光美 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期361-366,共6页
目的 观察普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的保护作用。方法 建立大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡模型，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记，Hoeehst 33258核染色，琼脂糖凝胶电泳以及醋酸荧光素染色等方法，根据... 目的 观察普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的保护作用。方法 建立大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡模型，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记，Hoeehst 33258核染色，琼脂糖凝胶电泳以及醋酸荧光素染色等方法，根据细胞凋亡的形态学及生物化学等特征，分析普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的影响。结果大鼠小脑颗粒神经元与普卡霉素预孵育1h及持续作用下，普卡霉素浓度依赖性地抑制低钾诱导24h所致的大鼠小脑颗粒神经元凋亡，其有效浓度在50～200nmol·L^-1之间，普卡霉素浓度为200nmol·L^-1时达到的最大凋亡抑制率约为80％。结论 普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡具有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 小脑 神经元 钾 细胞凋亡 普卡霉素
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大鼠海马β-肾上腺素受体和烟碱受体亚型在烟碱激活p44/42MAPK中的作用
10
作者 王勇 朱小南 +2 位作者 余剑平 黄晓卉 陈汝筑 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期93-97,共5页
目的　为探讨烟碱对海马脑片p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的影响 ,以及 β 肾上腺素受体 (β AR)、烟碱受体亚型在其中的作用。方法　将 4 0 0 μm厚的海马脑片置于预先经 95 %O2 和 5 %CO2 饱和的 2 8℃人工脑脊液中预孵 90min后分别加入普萘... 目的　为探讨烟碱对海马脑片p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的影响 ,以及 β 肾上腺素受体 (β AR)、烟碱受体亚型在其中的作用。方法　将 4 0 0 μm厚的海马脑片置于预先经 95 %O2 和 5 %CO2 饱和的 2 8℃人工脑脊液中预孵 90min后分别加入普萘洛尔、α 银环蛇毒素和美卡拉明 ,30min后再加入烟碱 ,使其终浓度分别为 1和 10 0 μmol·L- 1。于烟碱作用 90min时 ,运用免疫印迹法检测这 3个受体阻断剂对烟碱引起的p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的抑制效果。结果　烟碱对p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的作用与烟碱浓度有关 ,10 0 μmol·L- 1烟碱比 1μmol·L- 1烟碱作用强。美卡拉明单独作用可阻断 1μmol·L- 1烟碱和部分阻断10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2MAPK磷酸化 ;α 银环蛇毒素只能阻断 10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2 /4 4MAPK磷酸化 ;但同时使用这两种烟碱受体阻断剂时 ,两种浓度烟碱引起的p4 4/ 4 2MAPK磷酸化均可被完全阻断 ;普萘洛尔对 1μmol·L- 1烟碱引起的p4 4MAPK磷酸化和 10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2MAPK磷酸化仅有部分阻止作用。结论　在烟碱激活的p4 4/ 4 2MAPK中 ,不同烟碱受体亚型在不同烟碱浓度中起作用 ;β AR仅参与烟碱引起的p4 4/4 2MAPK部分磷酸化。 展开更多
关键词 海马 受体 烟碱 受体 肾上腺素 烟碱 有丝分裂素激活蛋白激酶类
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