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羊胎素对体外成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响被引量：5: 1; 作者艾春媚崔燎 +2 位作者魏泉德刘钰瑜吴怡《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期495-497,506,共4页; 目的观察羊胎素在体外对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。方法将提取之羊胎素稀释加入体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞体系中,终浓度分别为0.625％、1.25％、2.5％、5％和10％;加药后24、48和96 h用MTT法检测细胞... 展开更多; 关键词羊胎素成骨细胞增殖体外新生大鼠结节空白对照颅骨矿化分化; 在线阅读下载PDF 职称材料

华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定被引量：5: 2; 作者徐劲郑南才 +4 位作者吴忠道陈守义胡旭初应康余新炳《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期863-866,共4页; 目的克隆肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因并在大肠杆菌内表达,同时对表达的重组蛋白进行初步的功能分析,为进一步的研究和药物筛选打下基础。方法通过大规模测序从肝吸虫cDNA文库中确定肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因,采用PCR方法扩增出目... 展开更多; 关键词华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶异源表达酶动力学参数抑制; 在线阅读下载PDF 职称材料

华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶活性位点氨基酸点突变对酶活性和热稳定性影响被引量：4: 3; 作者郑南才黄宝明 +4 位作者徐劲黄善盛胡旭初陈金中余新炳《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期575-579,共5页; 目的为了研究华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶H195及其周围氨基酸的点突变对酶活性和热稳定性的影响,进一步了解蛋白分子结构与功能的关系。方法利用PCR技术,对胞浆苹果酸脱氢酶H195及其周围氨基酸基因进行点突变,与pQE30质粒连接构建重组质... 展开更多; 关键词华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶点突变圆二色性; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同分离株弓形虫hsp70基因体外扩增及其酶切分析被引量：1: 4; 作者李华文陈观今郑焕钦《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期199-202,共4页; 目的　不同分离株弓形虫hsp70基因的比较 ;运用限制性内切酶分析 (PRA)建立一种简单的虫株鉴定方法。方法　采用PCR技术扩增hsp70基因 ;采用 3种限制性内切酶Bsp12 86Ⅰ、BstXⅠ、MboⅠ分别对该基因进行酶切比较。结果　从 5种不同分... 展开更多; 关键词弓形虫 HSP70基因体外扩增酶切分析毒力; 在线阅读下载PDF 职称材料

广州东部HPV基因型分布及其优势基因型E6／E7核酸序列分析被引量：15: 5; 作者余南辜为为 +3 位作者刘红娥孙洪青詹希美陈小坚《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期220-224,228,共6页; 目的研究广州东部人乳头瘤病毒基因型分布特征,并获取优势基因型早基因E6/E7的核酸序列,进行变异分析,为本课题组下一步新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的人乳头瘤病毒基因分型... 展开更多; 关键词人乳头瘤病毒优势基因型年龄分布变异; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羊胎素对体外成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响被引量：5: 1; 作者艾春媚崔燎魏泉德刘钰瑜吴怡; 机构广东医学院广东天然药物研究与开发实验室中山大学基础医学院病原生物学教研室广东医学院医药科技开发中心; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期495-497,506,共4页; 基金广东自然科学基金资助项目(020554); 文摘目的观察羊胎素在体外对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。方法将提取之羊胎素稀释加入体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞体系中,终浓度分别为0.625％、1.25％、2.5％、5％和10％;加药后24、48和96 h用MTT法检测细胞的增殖并绘制生长曲线:培养5 d时用PNPP法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;培养31 d时用茜素红染色2.5％羊胎素组形成之矿化骨结节,用图像分析仪计算骨结节的面积。结果所有含羊胎素浓度组,其MTT法测得的A值都显著高于空白对照组(P<0.01),生长曲线表现为含羊胎素组的细胞增殖加快,以2.5％浓度组最为显著;ALP结果显示,羊胎素各浓度组的碱性磷酸酶活性都显著高于空白对照组(P<0.01);茜素红染色后显示,2.5％羊胎素组所形成的骨结节面积显著高于空白对照组(P<0.01)。结论羊胎素对体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞有显著的促进增殖、分化和矿化的作用。; 关键词羊胎素成骨细胞增殖体外新生大鼠结节空白对照颅骨矿化分化; Keywords Placentin Lamb placenta Osteoblasts Proliferation Differentiation Mineralization; 分类号 R977.9 [医药卫生—药品] R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定被引量：5: 2; 作者徐劲郑南才吴忠道陈守义胡旭初应康余新炳; 机构中山大学基础医学院病原生物学教研室复旦大学生命科学院遗传研究所基因工程国家重点实验室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期863-866,共4页; 基金广东省自然科学基金重点项目(NO.036627) 广东省科技计划项目重大专项(NO.2004A300801004); 文摘目的克隆肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因并在大肠杆菌内表达,同时对表达的重组蛋白进行初步的功能分析,为进一步的研究和药物筛选打下基础。方法通过大规模测序从肝吸虫cDNA文库中确定肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因,采用PCR方法扩增出目的片段,与表达质粒pGEX-4T-1连接构建重组质粒,IPTG诱导表达;研究重组蛋白的理化性质及酶动力学特征,并寻找可能的抑制剂。结果成功表达出约64 kDa的重组蛋白,凝血酶切后为36 kDa蛋白,其酶活性为63.6U/mg。1.14 mM 4,4′-二甲氨基联苯甲醇处理30 min酶活性下降了60%;吡喹酮、灭滴灵和阿苯哒唑对酶活性无抑制作用;而5’-单磷酸腺苷对重组酶有竞争性抑制作用,其Ki为0.49。结论成功地表达了目的蛋白,为药物筛选提供了一个易于获得的候选蛋白分子。; 关键词华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶异源表达酶动力学参数抑制; Keywords Clonorchis sinensis mitochondrial malate dehydrogenase heterologous expression kinetic parameters inhibition; 分类号 R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶活性位点氨基酸点突变对酶活性和热稳定性影响被引量：4: 3; 作者郑南才黄宝明徐劲黄善盛胡旭初陈金中余新炳; 机构江门市疾病预防控制中心中山大学基础医学院病原生物学教研室复旦大学生命科学院遗传研究所基因工程国家重点实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期575-579,共5页; 基金广东省自然科学基金重点项目(NO.036627) 广东省科技计划项目重大专项(NO.2004A300801004); 文摘目的为了研究华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶H195及其周围氨基酸的点突变对酶活性和热稳定性的影响,进一步了解蛋白分子结构与功能的关系。方法利用PCR技术,对胞浆苹果酸脱氢酶H195及其周围氨基酸基因进行点突变,与pQE30质粒连接构建重组质粒,转染大肠杆菌后表达蛋白,测定酶活性和圆二色性,测定不同温度时222nm圆二色性改变,确定不同点突变蛋白的热稳定性。结果H195被异亮氨酸、半胱氨酸和酪氨酸置换后,酶活性下降了100倍以上,但随着H195被不同氨基酸置换和H195周围氨基酸被置换情况的不同,不同突变株表达的蛋白酶活性差别很大,H195/I195和H195/Y195突变株表达的蛋白酶活性明显高于H195N197/I195Y197和H195T198/C195M198突变株表达的蛋白酶活性;H195/Y195突变株表达的蛋白与未突变蛋白的二级结构差异明显;H195/Y195和H195T198/C195M198突变株表达的蛋白热稳定性明显降低,tm值分别为63.5℃和64℃,比Cs cMDH的tm值分别下降了4℃和3.5℃。结论活性中心H195的点突变可导致华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶活性的明显下降,而且H195被不同的氨基酸置换后可导致酶活性下降程度的不同,H195周围氨基酸被替换成具有形成氢键或二硫键的氨基酸后,导致酶活性下降更为明显;H195及其周围氨基酸的突变可导致蛋白质二级结构的改变和热稳定性的不同程度下降。; 关键词华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶点突变圆二色性; Keywords Clonorchis sinensis cytosolie malate dehydrogenase site-- mutagenesis cicular dichroism; 分类号 R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同分离株弓形虫hsp70基因体外扩增及其酶切分析被引量：1: 4; 作者李华文陈观今郑焕钦; 机构中山大学基础医学院病原生物学教研室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期199-202,共4页; 基金国家自然科学基金 (NO :3 0 0 70 682 ); 文摘目的　不同分离株弓形虫hsp70基因的比较 ;运用限制性内切酶分析 (PRA)建立一种简单的虫株鉴定方法。方法　采用PCR技术扩增hsp70基因 ;采用 3种限制性内切酶Bsp12 86Ⅰ、BstXⅠ、MboⅠ分别对该基因进行酶切比较。结果　从 5种不同分离株的弓形虫基因组DNA中扩增出相似的约 2 0 2 2bp的完整HSP70基因阅读框序列 ;Bsp12 86Ⅰ酶切 5株弓形虫有 2组不同酶谱 ,而BstXⅠ、MboⅠ酶切的片段各株间没有差异。结论　 5种不同分离株弓形虫的hsp70基因片段大小基本相同 ;但酶切图谱有差异 ,这可以为虫株鉴定和毒力研究提供参考。; 关键词弓形虫 HSP70基因体外扩增酶切分析毒力; Keywords Toxoplasma gondii hsp70 gene restriction fragment analysis.; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名广州东部HPV基因型分布及其优势基因型E6／E7核酸序列分析被引量：15: 5; 作者余南辜为为刘红娥孙洪青詹希美陈小坚; 机构广州经济技术开发区医院中山大学基础医学院病原生物学教研室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期220-224,228,共6页; 基金广州市医药卫生科技基金资助项目(2007-YB-253); 文摘目的研究广州东部人乳头瘤病毒基因型分布特征,并获取优势基因型早基因E6/E7的核酸序列,进行变异分析,为本课题组下一步新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的人乳头瘤病毒基因分型检测,分析本地区基因型分布特征,确定优势基因型;根据GenBank序列设计特异性引物,用于扩增优势基因型的早基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析。结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的分型检测,检测了536份宫颈脱落细胞标本,HPV阳性占27.2%(146/536),其中多基因型感染占29.5%(43/146),高危型感染中52型为优势基因型,频数达23.3%(37/159)。HPV感染与52型HPV感染的年龄分布显示低年龄组(即A组,≤25岁)妇女最高。3份52型HPV感染阳性标本的核酸模板,通过特异性引物均成功扩增出大小接近750bp的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒52型早表达基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析;3条序列经BLAST分析,与GenBank数据库HPV52型序列(Accession:X74481)的E6/E7编码区序列一致性均为99%,三条序列(EU924143、EU924144、EU924145)存在6种碱基置换,其中2种可引起所编码的相应氨基酸残基改变。结论本研究可确认广州东部地区妇女宫颈感染HPV中A组(17-25岁)具有最高的感染率;宫颈感染HPV的优势基因型为52型;我们通过克隆策略得到了与HPV高危型52型X74481高度相似的E6/E7编码序列,为课题组后续进行的HPV致病机制和新型分子检测方法研究提供了重要基础。; 关键词人乳头瘤病毒优势基因型年龄分布变异; Keywords human papillomavirus dominant genotype age prevalence variance; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	羊胎素对体外成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响	艾春媚崔燎魏泉德刘钰瑜吴怡	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD	2004	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定	徐劲郑南才吴忠道陈守义胡旭初应康余新炳	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	华支睾吸虫胞浆苹果酸脱氢酶活性位点氨基酸点突变对酶活性和热稳定性影响	郑南才黄宝明徐劲黄善盛胡旭初陈金中余新炳	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	不同分离株弓形虫hsp70基因体外扩增及其酶切分析	李华文陈观今郑焕钦	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	广州东部HPV基因型分布及其优势基因型E6／E7核酸序列分析	余南辜为为刘红娥孙洪青詹希美陈小坚	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	15	在线阅读下载PDF 职称材料