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人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)抑制小鼠肝癌的血管生成和肿瘤生长被引量：4: 1; 作者刘倩平杨霞 +6 位作者李朝阳杨中汉蔡卫斌宋志宏葛啸虎周世豪高国全《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期380-383,共4页; 【目的】体内、体外实验观察人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)对肝癌血管生成和肿瘤生长的影响。【方法】大肠杆菌中表达,组氨酸结合柱亲和层析、纯化获得K5蛋白,SDS-PAGE和Westernblot方法鉴定K5蛋白的表达;MTT法分析K5对牛视网膜毛细血... 展开更多; 关键词纤维蛋白溶酶原血管生成肿瘤生长小鼠肝癌视网膜毛细血管内皮细胞 Bel-7402 微血管密度(MVD) Western SDS-PAGE HEPG2增殖肝癌细胞株 blot 肝癌组织 mol/L 实验观察大肠杆菌亲和层析 MTT法瘤内注射纯化蛋白抑制作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

人纤溶酶原K5突变体Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：3: 2; 作者蔡卫斌李朝阳 +5 位作者杨中汉骆晓枫周世豪李民友刘祖国高国全《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期241-244,共4页; 【目的】构建人纤溶酶原Kringle 5(K5)的突变体Cys461-Cys540(K5 mut1),在大肠杆菌中表达,亲和层析纯化,为探讨K5抗血管增生活性与Kringle结构域的关系提供基础?【方法】以K5全长cDNA为模板用PCR的方法扩增人纤溶酶原K5 mut1基因,将... 展开更多; 关键词纤溶酶原突变型K5 血管增生抑制因子基因突变层析法大肠杆菌血管增生; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙型肝炎病毒C基因在毕赤酵母中的表达被引量：3: 3; 作者李朝霞梁敏坚 +2 位作者李林胡波朱振宇《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2320-2324,共5页; 目的研究乙肝病毒核心(C)基因在毕赤(Pichiapastoris)酵母中的表达,以期获得高效表达的具有良好免疫反应性和特异性的重组乙肝病毒核心蛋白(HBcAg)。方法采用PCR法从含HBV全基因序列的质粒pHBV1中扩增C基因,亚克隆到pGEM-T载体中,经DNA... 展开更多; 关键词肝炎核心抗原乙型免疫反应性基因表达毕赤酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

端粒酶活性及其hTERT基因在增生性组织中的表达被引量：3: 4; 作者谢金卫周俊梅 +4 位作者杜贻鹏陈展辉卢长娣陶莎周俊宜《实用医学杂志》 CAS 2006年第7期745-747,共3页; 目的:探讨端粒酶在增生性组织中的表达状况。方法:采用Kim的TRAP法和RT-PCR技术检测增生性肉芽组织、子宫内膜组织以及部分生长旺盛的癌旁组织的端粒酶活性及其催化亚基hTERT基因的表达。结果:以Hela细胞对照作为阳性对照,3类组织可部... 展开更多; 关键词细胞增殖端粒末端转移酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

Survivin在非小细胞肺癌中表达的初步研究被引量：1: 5; 作者葛啸虎陶莎李丽《实用医学杂志》 CAS 2004年第12期1348-1350,共3页; 目的 :探讨survivin基因在非小细胞肺癌 (non smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达情况 ,为survivin基因用于NSCLC诊断以及治疗提供理论依据。方法 :用RT PCR法检测正常细胞株、肺癌细胞株、非小细胞肺癌活体标本以及癌旁组织 ,比较surv... 展开更多; 关键词非小细胞肺癌治疗 SURVIVIN基因表达肺癌细胞株 NSCLC 癌旁组织结论初步研究理论依据; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)抑制小鼠肝癌的血管生成和肿瘤生长被引量：4: 1; 作者刘倩平杨霞李朝阳杨中汉蔡卫斌宋志宏葛啸虎周世豪高国全; 机构中山大学基础医学院生化教研室中山大学中山眼科中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期380-383,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(NO.30370313) 广东省自然科学基金资助项目(A04009426) +3 种基金广州市科技攻关重点基金资助项目(2003Z2-E4091); 文摘【目的】体内、体外实验观察人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)对肝癌血管生成和肿瘤生长的影响。【方法】大肠杆菌中表达,组氨酸结合柱亲和层析、纯化获得K5蛋白,SDS-PAGE和Westernblot方法鉴定K5蛋白的表达;MTT法分析K5对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRCEC)和肝癌细胞株Bel-7402、HepG2增殖的影响;建立皮下种植肝癌鼠模型,瘤内注射K5,检测抑瘤率及肝癌组织微血管密度(MVD)。【结果】SDS-PAGE及Westernblot鉴定获得K5纯化蛋白;K5特异性地抑制BRCEC的增殖,IC50=160nmol/L,而对肝癌细胞株Bel-7402、HepG2的增殖无抑制作用;K5显著抑制小鼠肝癌生长,治疗组肝癌组织MVD明显低于对照组。【结论】K5抑制移植性小鼠肝癌血管生成和肿瘤生长,特异性抑制血管内皮细胞的增殖可能是K5抑制肝癌血管生成的主要机制。K5具有治疗肝癌的潜在临床价值。; 关键词纤维蛋白溶酶原血管生成肿瘤生长小鼠肝癌视网膜毛细血管内皮细胞 Bel-7402 微血管密度(MVD) Western SDS-PAGE HEPG2增殖肝癌细胞株 blot 肝癌组织 mol/L 实验观察大肠杆菌亲和层析 MTT法瘤内注射纯化蛋白抑制作用; Keywords plasminogen kringle 5 hepatocarcinoma neovascularization endothelial cell; 分类号 R446 [医药卫生—诊断学] R735.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人纤溶酶原K5突变体Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：3: 2; 作者蔡卫斌李朝阳杨中汉骆晓枫周世豪李民友刘祖国高国全; 机构中山大学基础医学院生化教研室中山大学中山眼科中心中山大学广州市启源生物科技有限公司; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期241-244,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30370313) 中华医学基金会资助项目(CMB-SUMS学者项目#98-677) +2 种基金广州市科技攻关重点基金资助项目(2003Z2-E4091); 文摘【目的】构建人纤溶酶原Kringle 5(K5)的突变体Cys461-Cys540(K5 mut1),在大肠杆菌中表达,亲和层析纯化,为探讨K5抗血管增生活性与Kringle结构域的关系提供基础?【方法】以K5全长cDNA为模板用PCR的方法扩增人纤溶酶原K5 mut1基因,将其克隆进表达载体pET-22b(+)中,并用限制性核酸内切酶酶切和DNA测序鉴定其连接正确;pET-22b(+)/K5 mut1 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,表达产物用固化Ni2+-His Bind Resin亲和层析方法纯化,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot方法分析鉴定?【结果】 PCR扩增获得258 bp的人纤溶酶原K5 mut1基因片段,正确插入pET-22 b(+)载体,在大肠杆菌中该基因编码蛋白的表达量占菌体总蛋白13%左右;SDS-PAGE显示其相对分子质量Mr≈14.1×103,Western blot证实该表达蛋白为K5 mut1重组蛋白,经亲和层析后K5 mut1重组蛋白纯度大于90%,获得率约为10 mg/L?【结论】成功构建人纤溶酶原K5 mut1,实现在大肠杆菌中高效表达,亲和层析纯化获得较高纯度K5 mut1重组蛋白?; 关键词纤溶酶原突变型K5 血管增生抑制因子基因突变层析法大肠杆菌血管增生; Keywords plasminogen kringle 5 angiogenic inhibitor mutation gene expression; 分类号 R364.1 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙型肝炎病毒C基因在毕赤酵母中的表达被引量：3: 3; 作者李朝霞梁敏坚李林胡波朱振宇; 机构中山大学附属第三医院检验科中山大学基础医学院生化教研室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2320-2324,共5页; 基金 2002年广东省自然科学基金资助项目(No.021858); 文摘目的研究乙肝病毒核心(C)基因在毕赤(Pichiapastoris)酵母中的表达,以期获得高效表达的具有良好免疫反应性和特异性的重组乙肝病毒核心蛋白(HBcAg)。方法采用PCR法从含HBV全基因序列的质粒pHBV1中扩增C基因,亚克隆到pGEM-T载体中,经DNA序列分析后将目的基因定向克隆到酵母表达载体pPIC9中,构建重组质粒pPIC9-cAg。然后用电转法将重组质粒转化入酵母菌GS115,05%甲醇诱导表达。采用SDS-PAGE、Westernblot和ELISA法对表达产物进行分析。结果限制性内切酶酶切和DNA序列分析证实HBVC基因已正确克隆到酵母表达载体pPIC9中;SDS-PAGE结果显示重组HBcAg在毕赤酵母细胞中表达;ELISA及Westernblot分析表明,表达产物具有良好的免疫反应性和特异性,重组HBcAg的滴度可达1∶12800。结论成功构建了pPIC9-cAg重组质粒,并在毕赤酵母中高效表达了具有良好免疫反应性和特异性的重组HBcAg,为进一步研制抗-HBc诊断试剂盒奠定了基础。; 关键词肝炎核心抗原乙型免疫反应性基因表达毕赤酵母; Keywords Hepatitis B core antigens Immunoreactivity Gene expression Pichia; 分类号 R373.2 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名端粒酶活性及其hTERT基因在增生性组织中的表达被引量：3: 4; 作者谢金卫周俊梅杜贻鹏陈展辉卢长娣陶莎周俊宜; 机构中山大学基础医学院生化教研室中山大学基础医学院微生物教研室; 出处《实用医学杂志》 CAS 2006年第7期745-747,共3页; 基金广东省自然科学基金项目(021799 04105351) 教育部基金资助项目(4105001); 文摘目的:探讨端粒酶在增生性组织中的表达状况。方法:采用Kim的TRAP法和RT-PCR技术检测增生性肉芽组织、子宫内膜组织以及部分生长旺盛的癌旁组织的端粒酶活性及其催化亚基hTERT基因的表达。结果:以Hela细胞对照作为阳性对照,3类组织可部分检测到低水平的端粒酶活性及hTERT基因的表达。结论:端粒酶在生长旺盛的增生性组织中呈低水平表达,与细胞的生长状态有关。; 关键词细胞增殖端粒末端转移酶; Keywords Cell proliferation Telomerase; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Survivin在非小细胞肺癌中表达的初步研究被引量：1: 5; 作者葛啸虎陶莎李丽; 机构中山大学基础医学院生化教研室; 出处《实用医学杂志》 CAS 2004年第12期1348-1350,共3页; 文摘目的 :探讨survivin基因在非小细胞肺癌 (non smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达情况 ,为survivin基因用于NSCLC诊断以及治疗提供理论依据。方法 :用RT PCR法检测正常细胞株、肺癌细胞株、非小细胞肺癌活体标本以及癌旁组织 ,比较survivin基因的表达情况。结果 :正常细胞株以及癌旁组织中未检测出survivin表达 ,肺癌细胞株以及肺癌活体标本有高表达。结论 :survivin可能作为非小细胞肺癌的检测以及治疗新靶点。; 关键词非小细胞肺癌治疗 SURVIVIN基因表达肺癌细胞株 NSCLC 癌旁组织结论初步研究理论依据; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)抑制小鼠肝癌的血管生成和肿瘤生长	刘倩平杨霞李朝阳杨中汉蔡卫斌宋志宏葛啸虎周世豪高国全	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人纤溶酶原K5突变体Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化	蔡卫斌李朝阳杨中汉骆晓枫周世豪李民友刘祖国高国全	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	乙型肝炎病毒C基因在毕赤酵母中的表达	李朝霞梁敏坚李林胡波朱振宇	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	端粒酶活性及其hTERT基因在增生性组织中的表达	谢金卫周俊梅杜贻鹏陈展辉卢长娣陶莎周俊宜	《实用医学杂志》 CAS	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Survivin在非小细胞肺癌中表达的初步研究	葛啸虎陶莎李丽	《实用医学杂志》 CAS	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料