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不同刺激剂和培养环境对CD4^+、CD8^+ T细胞内细胞因子表达的影响
被引量：
12
1
作者
周茂华
吴长有
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期168-171,共4页
目的探讨不同的刺激剂和不同的培养条件对CD4+和CD8+T细胞内细胞因子表达的影响。方法分离正常人的外周血单个核细胞(PBMC),分别加入3种不同的刺激剂(PHA,抗CD3和抗CD28mAb,PMA和离子霉素),置于4种不同的培养环境下(室温,37℃水浴,37℃...
目的探讨不同的刺激剂和不同的培养条件对CD4+和CD8+T细胞内细胞因子表达的影响。方法分离正常人的外周血单个核细胞(PBMC),分别加入3种不同的刺激剂(PHA,抗CD3和抗CD28mAb,PMA和离子霉素),置于4种不同的培养环境下(室温,37℃水浴,37℃培养箱,37℃50mL/LCO2培养箱)培养4·5~5h。收集细胞,以荧光素-mAb标记后,用流式细胞术分析CD4+、CD8+T细胞内IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达。结果CD4+和CD8+T细胞内细胞因子的表达,随着刺激剂的不同而有所差别,且在上述4种培养环境中,PMA的刺激效果最强,抗CD3mAb次之,PHA的刺激效应最弱。以上述3种刺激剂刺激后,不同培养条件对T细胞内细胞因子的表达有一定的影响。室温培养时几乎检测不到细胞因子的表达,而在37℃水浴、37℃培养箱和37℃50mL/LCO2培养箱中培养时,表达细胞因子的CD4+和CD8+T细胞的百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同刺激剂体外刺激T细胞表达细胞因子的效应不同,依次为PMA和离子霉素>抗CD3和抗CD28mAb>PHA。体外刺激培养的T细胞活化过程中,温度是重要的条件,CO2无明显影响。
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关键词
流式细胞术
T细胞亚群
细胞因子
刺激剂
培养条件
在线阅读
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职称材料
正常人周围血初始和记忆T细胞亚群及细胞因子表达的探讨
被引量：
6
2
作者
刘杰
吴长有
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期2-5,共4页
目的:利用多色流式检测技术探讨初始和记忆T细胞亚群与细胞因子表达之间的关系。方法:自正常人静脉血中分离PBMC,经超抗原(SEB)刺激5h后,加入多种抗细胞表面标记和抗细胞因子抗体进行染色,利用流式细胞术检测,并利用FlowJo软件分析结果...
目的:利用多色流式检测技术探讨初始和记忆T细胞亚群与细胞因子表达之间的关系。方法:自正常人静脉血中分离PBMC,经超抗原(SEB)刺激5h后,加入多种抗细胞表面标记和抗细胞因子抗体进行染色,利用流式细胞术检测,并利用FlowJo软件分析结果。结果:根据CD45RO表达与否,将CD4+和CD8+T细胞分为初始和记忆T细胞,再根据归巢受体(CD62L)和趋化因子受体(CCR7)的表达与否,将初始和记忆T细胞进一步分为不同的亚群。当T细胞受到SEB激活后,CD45RO+和CD45RO-的CD4+或CD8+T细胞均表达IL-2、IFN-γ和TNF-α。进一步分析结果表明,CD62Lhi和CD62LhiCCR7+细胞不表达细胞因子,而CD62LloCCR7lo和CCR7+T细胞均表达细胞因子,其中CD62LloCCR7lo细胞表达细胞因子的阳性率明显高于CCR7+细胞亚群。结论:只利用CD45RO表达与否区分初始和记忆T细胞是不够准确的,同时检测CD62L的表达,可明显地提高其准确性。
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关键词
初始和记忆T细胞
T细胞亚群
细胞表面标志
细胞因子
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职称材料
题名
不同刺激剂和培养环境对CD4^+、CD8^+ T细胞内细胞因子表达的影响
被引量：
12
1
作者
周茂华
吴长有
机构
中山大学基础医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期168-171,共4页
基金
国家重点基础研究发展规划(973)资助项目(2001CB510007)
广州市科技局创新药物专项(2004Z32E4031)
广东省自然科学基金重点项目(04105349)
文摘
目的探讨不同的刺激剂和不同的培养条件对CD4+和CD8+T细胞内细胞因子表达的影响。方法分离正常人的外周血单个核细胞(PBMC),分别加入3种不同的刺激剂(PHA,抗CD3和抗CD28mAb,PMA和离子霉素),置于4种不同的培养环境下(室温,37℃水浴,37℃培养箱,37℃50mL/LCO2培养箱)培养4·5~5h。收集细胞,以荧光素-mAb标记后,用流式细胞术分析CD4+、CD8+T细胞内IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达。结果CD4+和CD8+T细胞内细胞因子的表达,随着刺激剂的不同而有所差别,且在上述4种培养环境中,PMA的刺激效果最强,抗CD3mAb次之,PHA的刺激效应最弱。以上述3种刺激剂刺激后,不同培养条件对T细胞内细胞因子的表达有一定的影响。室温培养时几乎检测不到细胞因子的表达,而在37℃水浴、37℃培养箱和37℃50mL/LCO2培养箱中培养时,表达细胞因子的CD4+和CD8+T细胞的百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同刺激剂体外刺激T细胞表达细胞因子的效应不同,依次为PMA和离子霉素>抗CD3和抗CD28mAb>PHA。体外刺激培养的T细胞活化过程中,温度是重要的条件,CO2无明显影响。
关键词
流式细胞术
T细胞亚群
细胞因子
刺激剂
培养条件
Keywords
flow cytometry
T cell subset
cytokine
stimulus
culture condition
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
正常人周围血初始和记忆T细胞亚群及细胞因子表达的探讨
被引量：
6
2
作者
刘杰
吴长有
机构
中山大学基础医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期2-5,共4页
基金
国家重点基础研究发展规划(973)资助项目(2001CB510007)
国家自然科学基金(创新群体)资助项目(30321004)
+1 种基金
广州市科技计划科技攻关引导项目(2005Z3-C7461)科技交流合作专项国家
省市联动项目
文摘
目的:利用多色流式检测技术探讨初始和记忆T细胞亚群与细胞因子表达之间的关系。方法:自正常人静脉血中分离PBMC,经超抗原(SEB)刺激5h后,加入多种抗细胞表面标记和抗细胞因子抗体进行染色,利用流式细胞术检测,并利用FlowJo软件分析结果。结果:根据CD45RO表达与否,将CD4+和CD8+T细胞分为初始和记忆T细胞,再根据归巢受体(CD62L)和趋化因子受体(CCR7)的表达与否,将初始和记忆T细胞进一步分为不同的亚群。当T细胞受到SEB激活后,CD45RO+和CD45RO-的CD4+或CD8+T细胞均表达IL-2、IFN-γ和TNF-α。进一步分析结果表明,CD62Lhi和CD62LhiCCR7+细胞不表达细胞因子,而CD62LloCCR7lo和CCR7+T细胞均表达细胞因子,其中CD62LloCCR7lo细胞表达细胞因子的阳性率明显高于CCR7+细胞亚群。结论:只利用CD45RO表达与否区分初始和记忆T细胞是不够准确的,同时检测CD62L的表达,可明显地提高其准确性。
关键词
初始和记忆T细胞
T细胞亚群
细胞表面标志
细胞因子
Keywords
naive ＆ memory T cells
T cell subset
cell surface marker
cytokine
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不同刺激剂和培养环境对CD4^+、CD8^+ T细胞内细胞因子表达的影响
周茂华
吴长有
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
12
在线阅读
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职称材料
2
正常人周围血初始和记忆T细胞亚群及细胞因子表达的探讨
刘杰
吴长有
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
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