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利用微波炉和煮沸法快速制备大肠杆菌基因组DNA PCR模板 被引量:12
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作者 赫然 张颖 +5 位作者 王强 李刚 王智学 崔亮 刘秋云 李宝健 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第S1期80-81,共2页
利用微波炉和煮沸法可以简单、快速、有效地制备大肠杆菌基因组DNAPCR模板。用该模板做PCR具有很高的效率和良好的特异性。
关键词 微波炉 煮沸法 基因组DNA PCR模板
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酵母基因组DNA的两个简易制备方法 被引量:5
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作者 罗樨 刘秋云 +2 位作者 何康泽 赫然 李宝健 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期59-59,共1页
关键词 基因组DNA 简易制备 酵母
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水稻小GTP蛋白OsRab5A的表达、纯化和GTP结合分析(英文)
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作者 刘筱斌 林慧贤 +1 位作者 梁承邺 刘良式 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期60-63,共4页
小GTP结合蛋白是一类在细胞内的运输过程中重要作用的蛋白。它们通过结合子GTP而激活 ,当GTP被水解为GDP后处于非活性状态。哺乳动物中的研究表明 ,Rab5A蛋白是细胞内的形成早期内吞体 (earlyendosome)的限速因子。证实了所克隆的水稻ra... 小GTP结合蛋白是一类在细胞内的运输过程中重要作用的蛋白。它们通过结合子GTP而激活 ,当GTP被水解为GDP后处于非活性状态。哺乳动物中的研究表明 ,Rab5A蛋白是细胞内的形成早期内吞体 (earlyendosome)的限速因子。证实了所克隆的水稻rab5A基因编码的蛋白具有GTP结合功能。将Osrab5A基因的编码序列按正确读码框重组到pGEX4T1载体中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,电泳判定插入片段大小无误后 ,进一步测序鉴定其读码也无误。将该克隆命名为pG_5AE。以IPTG诱导 pG_5AE所编码的融合蛋白GST_OsRab5A的表达。SDS_PAGE电泳与无外源质粒和表达谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的对照相比 ,得到了预计大小的融合蛋白。以GSTrapTM亲和柱纯化融合蛋白。在不同的泳道分离纯化的融合蛋白和作为对照的含GST以及无外源蛋白的细菌总蛋白 ,电转移到硝酸纤维膜上。将该膜与α_3 2 PGTP温育 ,洗膜 ,放射自显影后 ,获得了融合蛋白结合GTP的结果 ,这表明在原核中表达出的水稻Rab5A蛋白能在体外结合GTP。 展开更多
关键词 水稻 小GTP蛋白 OsRab5A基因 基因表达 纯化 结合分析 融合蛋白 结合子 限速因子
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利用微波炉高通量制备大肠杆菌质粒
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作者 张颖 赫然 +4 位作者 罗樨 唐浩 唐超群 刘秋云 李宝健 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期50-50,共1页
利用微波炉可以简单、快速地高通量制备大肠杆菌质粒。
关键词 微波炉 制备 大肠杆菌 质粒 DNA 基因工程
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