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利用微波炉和煮沸法快速制备大肠杆菌基因组DNA PCR模板
被引量:
12
1
作者
赫然
张颖
+5 位作者
王强
李刚
王智学
崔亮
刘秋云
李宝健
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第S1期80-81,共2页
利用微波炉和煮沸法可以简单、快速、有效地制备大肠杆菌基因组DNAPCR模板。用该模板做PCR具有很高的效率和良好的特异性。
关键词
微波炉
煮沸法
基因组DNA
PCR模板
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职称材料
酵母基因组DNA的两个简易制备方法
被引量:
5
2
作者
罗樨
刘秋云
+2 位作者
何康泽
赫然
李宝健
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期59-59,共1页
关键词
基因组DNA
简易制备
酵母
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职称材料
水稻小GTP蛋白OsRab5A的表达、纯化和GTP结合分析(英文)
3
作者
刘筱斌
林慧贤
+1 位作者
梁承邺
刘良式
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期60-63,共4页
小GTP结合蛋白是一类在细胞内的运输过程中重要作用的蛋白。它们通过结合子GTP而激活 ,当GTP被水解为GDP后处于非活性状态。哺乳动物中的研究表明 ,Rab5A蛋白是细胞内的形成早期内吞体 (earlyendosome)的限速因子。证实了所克隆的水稻ra...
小GTP结合蛋白是一类在细胞内的运输过程中重要作用的蛋白。它们通过结合子GTP而激活 ,当GTP被水解为GDP后处于非活性状态。哺乳动物中的研究表明 ,Rab5A蛋白是细胞内的形成早期内吞体 (earlyendosome)的限速因子。证实了所克隆的水稻rab5A基因编码的蛋白具有GTP结合功能。将Osrab5A基因的编码序列按正确读码框重组到pGEX4T1载体中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,电泳判定插入片段大小无误后 ,进一步测序鉴定其读码也无误。将该克隆命名为pG_5AE。以IPTG诱导 pG_5AE所编码的融合蛋白GST_OsRab5A的表达。SDS_PAGE电泳与无外源质粒和表达谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的对照相比 ,得到了预计大小的融合蛋白。以GSTrapTM亲和柱纯化融合蛋白。在不同的泳道分离纯化的融合蛋白和作为对照的含GST以及无外源蛋白的细菌总蛋白 ,电转移到硝酸纤维膜上。将该膜与α_3 2 PGTP温育 ,洗膜 ,放射自显影后 ,获得了融合蛋白结合GTP的结果 ,这表明在原核中表达出的水稻Rab5A蛋白能在体外结合GTP。
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关键词
水稻
小GTP蛋白
OsRab5A基因
基因表达
纯化
结合分析
融合蛋白
结合子
限速因子
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职称材料
利用微波炉高通量制备大肠杆菌质粒
4
作者
张颖
赫然
+4 位作者
罗樨
唐浩
唐超群
刘秋云
李宝健
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2004年第2期50-50,共1页
利用微波炉可以简单、快速地高通量制备大肠杆菌质粒。
关键词
微波炉
制备
大肠杆菌
质粒
DNA
基因工程
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职称材料
题名
利用微波炉和煮沸法快速制备大肠杆菌基因组DNA PCR模板
被引量:
12
1
作者
赫然
张颖
王强
李刚
王智学
崔亮
刘秋云
李宝健
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心
出处
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第S1期80-81,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目(30070420
30370799)
+1 种基金
国家植物基因中心课题资助项目(J00-A-009)
广东省自然科学基金资助项目(980303)
文摘
利用微波炉和煮沸法可以简单、快速、有效地制备大肠杆菌基因组DNAPCR模板。用该模板做PCR具有很高的效率和良好的特异性。
关键词
微波炉
煮沸法
基因组DNA
PCR模板
Keywords
microwave
boiling
genomic DNA
PCR template
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
酵母基因组DNA的两个简易制备方法
被引量:
5
2
作者
罗樨
刘秋云
何康泽
赫然
李宝健
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期59-59,共1页
基金
国家自然科学基金 ( 30 0 70 42 0 )
广东省自然科学基金 ( 980 30 3)
教育部高等学校骨干教师计划资助项目 ( 2 0 0 0 -0 6 1-314 30 1)
关键词
基因组DNA
简易制备
酵母
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
水稻小GTP蛋白OsRab5A的表达、纯化和GTP结合分析(英文)
3
作者
刘筱斌
林慧贤
梁承邺
刘良式
机构
中国科学院华南植物
研究
所
中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心
出处
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期60-63,共4页
基金
国家转基因植物研究与产业化专项资助项目 (J0 0 -A - 0 0 9)
中科院华南植物所所长基金项目 (10 - 0 0- 312 )
文摘
小GTP结合蛋白是一类在细胞内的运输过程中重要作用的蛋白。它们通过结合子GTP而激活 ,当GTP被水解为GDP后处于非活性状态。哺乳动物中的研究表明 ,Rab5A蛋白是细胞内的形成早期内吞体 (earlyendosome)的限速因子。证实了所克隆的水稻rab5A基因编码的蛋白具有GTP结合功能。将Osrab5A基因的编码序列按正确读码框重组到pGEX4T1载体中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,电泳判定插入片段大小无误后 ,进一步测序鉴定其读码也无误。将该克隆命名为pG_5AE。以IPTG诱导 pG_5AE所编码的融合蛋白GST_OsRab5A的表达。SDS_PAGE电泳与无外源质粒和表达谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的对照相比 ,得到了预计大小的融合蛋白。以GSTrapTM亲和柱纯化融合蛋白。在不同的泳道分离纯化的融合蛋白和作为对照的含GST以及无外源蛋白的细菌总蛋白 ,电转移到硝酸纤维膜上。将该膜与α_3 2 PGTP温育 ,洗膜 ,放射自显影后 ,获得了融合蛋白结合GTP的结果 ,这表明在原核中表达出的水稻Rab5A蛋白能在体外结合GTP。
关键词
水稻
小GTP蛋白
OsRab5A基因
基因表达
纯化
结合分析
融合蛋白
结合子
限速因子
Keywords
rice ( Oryza sativa L. )
Rab protein
GTP-binding assay
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
利用微波炉高通量制备大肠杆菌质粒
4
作者
张颖
赫然
罗樨
唐浩
唐超群
刘秋云
李宝健
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2004年第2期50-50,共1页
基金
国家自然科学基 ( 3 0 0 70 42 0 )
国家植物基因中心课题 (J0 0 -A -0 0 9)
广东省自然科学基金 ( 980 3 0 3 )资金项目
文摘
利用微波炉可以简单、快速地高通量制备大肠杆菌质粒。
关键词
微波炉
制备
大肠杆菌
质粒
DNA
基因工程
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用微波炉和煮沸法快速制备大肠杆菌基因组DNA PCR模板
赫然
张颖
王强
李刚
王智学
崔亮
刘秋云
李宝健
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
酵母基因组DNA的两个简易制备方法
罗樨
刘秋云
何康泽
赫然
李宝健
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2002
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
水稻小GTP蛋白OsRab5A的表达、纯化和GTP结合分析(英文)
刘筱斌
林慧贤
梁承邺
刘良式
《中山大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
利用微波炉高通量制备大肠杆菌质粒
张颖
赫然
罗樨
唐浩
唐超群
刘秋云
李宝健
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2004
0
在线阅读
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职称材料
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