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人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
杜柳涛
庄志雄
+4 位作者
高昆
杨杏芬
何云
徐雷
魏青
《中山医科大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第3期187-189,共3页
【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表...
【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP C1,转染大肠杆菌DH5α ,筛选阳性克隆 ,双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT PCR获得 1 0 3kb的产物 ,经DNA测序 ,确定所扩增片段为人类 pol β基因全长cDNA ,进而成功筛选出真核表达载体 pEGFP C1 β。【结论】成功构建人 pol β基因全长cDNA真核表达载体 。
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关键词
DNA聚合酶Β
聚合酶链反应
DNA
重组
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职称材料
题名
人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
杜柳涛
庄志雄
高昆
杨杏芬
何云
徐雷
魏青
机构
中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室
深圳市防疫站
中山大学
生命科学
学院
广东省疾病控制中心
出处
《中山医科大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第3期187-189,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 0 10 0 15 2 )
文摘
【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP C1,转染大肠杆菌DH5α ,筛选阳性克隆 ,双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT PCR获得 1 0 3kb的产物 ,经DNA测序 ,确定所扩增片段为人类 pol β基因全长cDNA ,进而成功筛选出真核表达载体 pEGFP C1 β。【结论】成功构建人 pol β基因全长cDNA真核表达载体 。
关键词
DNA聚合酶Β
聚合酶链反应
DNA
重组
Keywords
DNA polymerase beta
polymerase chain reaction
DNA, recombiant
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
杜柳涛
庄志雄
高昆
杨杏芬
何云
徐雷
魏青
《中山医科大学学报》
CSCD
北大核心
2002
2
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