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弥可保预防长春新碱诱导的病理性疼痛的机制
被引量：
3
1
作者
黄睿臻
徐劲
魏绪红
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期212-220,共9页
【目的】观察弥可保对长春新碱诱导的病理性疼痛大鼠脊髓背角突触传递功能的影响并探讨其机制。【方法】SD大鼠随机进行如下分组:生理盐水组、生理盐水+弥可保组、长春新碱组、长春新碱+弥可保组,Up-down方法测定50%机械撤足阈值,在体...
【目的】观察弥可保对长春新碱诱导的病理性疼痛大鼠脊髓背角突触传递功能的影响并探讨其机制。【方法】SD大鼠随机进行如下分组:生理盐水组、生理盐水+弥可保组、长春新碱组、长春新碱+弥可保组,Up-down方法测定50%机械撤足阈值,在体电生理方法记录脊髓背角C纤维诱发电位的幅度,免疫组化检测脊髓背角CGRP阳性纤维末梢的数量,免疫组化或Western blot检测NF-κB信号p65及IL-10蛋白表达的情况。【结果】长春新碱可引起机械痛敏(P<0.05),同时引起脊髓背角C纤维诱发电位幅度明显增大(P<0.05)。长春新碱导致脊髓背角CGRP阳性纤维的芽生(P<0.01)、NF-κB信号通路激活(P<0.001),并可降低IL-10的表达(P<0.01)。给予弥可保可阻断长春新碱所引起的上述变化(P<0.05)。【结论】弥可保可预防长春新碱诱导的病理性疼痛,其作用可能是通过降低CGRP阳性纤维芽生、平衡炎性因子表达,进而减弱中枢敏感化而进行的。
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关键词
痛觉过敏
长春新碱
弥可保
C纤维
长时程增强
突触可塑性
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职称材料
改良的Trizol法提取小鼠皮肤RNA技术
被引量：
3
2
作者
林震嘉
张辉
+5 位作者
揭英桃
熊媖
唐源
谈智
刘先国
周利君
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期224-232,共9页
[目的]由于皮肤组织韧性强且存在大量RNA酶,采用经典Trizol法提取的RNA存在易降解质量低等不足.因此,本研究旨在通过改良的Trizol法实现高质量的皮肤RNA提取.[方法]采用不同处理方式(Tri:Trizol包埋;Pro:RNA样本保护液包埋;Cry:先冷冻...
[目的]由于皮肤组织韧性强且存在大量RNA酶,采用经典Trizol法提取的RNA存在易降解质量低等不足.因此,本研究旨在通过改良的Trizol法实现高质量的皮肤RNA提取.[方法]采用不同处理方式(Tri:Trizol包埋;Pro:RNA样本保护液包埋;Cry:先冷冻液氮再冷冻-80℃冰箱;LNG:液氮研磨;Cut:采用剪刀剪碎组织)提取的小鼠正常皮肤RNA为实验组;脊髓组织作为参照组,并以咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病模型皮肤组织作为保真性验证组.我们采用紫外分光光度法、琼脂凝胶电泳法、定量逆转录PCR法(qRT-PCR)等方法来检测经典Trizol法(1-Tri,Nor)和改良Trizol法(2-Tri,LNG-Tri,Tri-Cut,Pro)提取的RNA浓度、纯度和完整性以及IL-1βmRNA表达的差异性情况.[结果]①与脊髓组织相比,经典Trizol法(1-Tri)获得的正常皮肤组织总RNA量要低,DNA污染和5S RNA条带明显,IL-1βmRNA相对表达偏高,说明经典Trizol法在皮肤组织中提取RNA存在局限性,需要进行改良.②在不同小鼠皮肤样本处理组中,改良的2-Tri法和LNG-Tri法获得的RNA浓度更高,同时RNA降解、DNA污染更低,IL-1βmRNA表达更接近正常水平.更重要的是,在小鼠银屑病模型中,2-Tri法提取的RNA样本能真实反映出正常皮肤与银屑病变皮肤之间IL-1βmRNA的变化趋势.[结论]改良的2-Tri或LNG-Tri法分离的总RNA质量好,能可靠地反映生理或病理条件下的mRNA表达模式.
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关键词
RNA提取
小鼠皮肤
TRIZOL
银屑病
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职称材料
题名
弥可保预防长春新碱诱导的病理性疼痛的机制
被引量：
3
1
作者
黄睿臻
徐劲
魏绪红
机构
中山大学中山医学院生理教研室//疼痛研究中心
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期212-220,共9页
基金
国家自然科学基金(81870969,81471250)
广东省自然科学基金(2019A1515011855)。
文摘
【目的】观察弥可保对长春新碱诱导的病理性疼痛大鼠脊髓背角突触传递功能的影响并探讨其机制。【方法】SD大鼠随机进行如下分组:生理盐水组、生理盐水+弥可保组、长春新碱组、长春新碱+弥可保组,Up-down方法测定50%机械撤足阈值,在体电生理方法记录脊髓背角C纤维诱发电位的幅度,免疫组化检测脊髓背角CGRP阳性纤维末梢的数量,免疫组化或Western blot检测NF-κB信号p65及IL-10蛋白表达的情况。【结果】长春新碱可引起机械痛敏(P<0.05),同时引起脊髓背角C纤维诱发电位幅度明显增大(P<0.05)。长春新碱导致脊髓背角CGRP阳性纤维的芽生(P<0.01)、NF-κB信号通路激活(P<0.001),并可降低IL-10的表达(P<0.01)。给予弥可保可阻断长春新碱所引起的上述变化(P<0.05)。【结论】弥可保可预防长春新碱诱导的病理性疼痛,其作用可能是通过降低CGRP阳性纤维芽生、平衡炎性因子表达,进而减弱中枢敏感化而进行的。
关键词
痛觉过敏
长春新碱
弥可保
C纤维
长时程增强
突触可塑性
Keywords
allodynia
vincristine
methylcobalamin
c fiber
long-term potentiation
synaptic plasticity
分类号
R54 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
改良的Trizol法提取小鼠皮肤RNA技术
被引量：
3
2
作者
林震嘉
张辉
揭英桃
熊媖
唐源
谈智
刘先国
周利君
机构
中山大学中山医学院生理教研室//疼痛研究中心
广东省第二人民医院麻醉科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期224-232,共9页
基金
国家自然科学基金(81771204,81270377)
广东省自然科学基金(2019A1515011838)。
文摘
[目的]由于皮肤组织韧性强且存在大量RNA酶,采用经典Trizol法提取的RNA存在易降解质量低等不足.因此,本研究旨在通过改良的Trizol法实现高质量的皮肤RNA提取.[方法]采用不同处理方式(Tri:Trizol包埋;Pro:RNA样本保护液包埋;Cry:先冷冻液氮再冷冻-80℃冰箱;LNG:液氮研磨;Cut:采用剪刀剪碎组织)提取的小鼠正常皮肤RNA为实验组;脊髓组织作为参照组,并以咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病模型皮肤组织作为保真性验证组.我们采用紫外分光光度法、琼脂凝胶电泳法、定量逆转录PCR法(qRT-PCR)等方法来检测经典Trizol法(1-Tri,Nor)和改良Trizol法(2-Tri,LNG-Tri,Tri-Cut,Pro)提取的RNA浓度、纯度和完整性以及IL-1βmRNA表达的差异性情况.[结果]①与脊髓组织相比,经典Trizol法(1-Tri)获得的正常皮肤组织总RNA量要低,DNA污染和5S RNA条带明显,IL-1βmRNA相对表达偏高,说明经典Trizol法在皮肤组织中提取RNA存在局限性,需要进行改良.②在不同小鼠皮肤样本处理组中,改良的2-Tri法和LNG-Tri法获得的RNA浓度更高,同时RNA降解、DNA污染更低,IL-1βmRNA表达更接近正常水平.更重要的是,在小鼠银屑病模型中,2-Tri法提取的RNA样本能真实反映出正常皮肤与银屑病变皮肤之间IL-1βmRNA的变化趋势.[结论]改良的2-Tri或LNG-Tri法分离的总RNA质量好,能可靠地反映生理或病理条件下的mRNA表达模式.
关键词
RNA提取
小鼠皮肤
TRIZOL
银屑病
Keywords
RNA extraction
mouse skin
Trizol
psoriasis
分类号
Q5-3 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弥可保预防长春新碱诱导的病理性疼痛的机制
黄睿臻
徐劲
魏绪红
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
改良的Trizol法提取小鼠皮肤RNA技术
林震嘉
张辉
揭英桃
熊媖
唐源
谈智
刘先国
周利君
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020
3
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职称材料
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