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前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达
1
作者
戴淑琴
王军业
+2 位作者
曹开源
徐霖
袁广卿
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第B03期38-40,共3页
【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定...
【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定 PSMA 蛋白的表达。【结果】序列测定结果表明,两条引物之间的片段长度为2279bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与 GenBank 的 PSMA 序列进行 Blast 对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100ku。【结论】成功扩增了 PSMA 编码区序列,构建了 PSMA 真核表达载体,建立了 PSMA 稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的 PSMA 为分子质量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的 PSMA 真核表达系统为进一步研究 PSMA 基因修饰的 DCs 疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。
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关键词
前列腺特异膜抗原
克隆
分子
真核表达
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题名
前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达
1
作者
戴淑琴
王军业
曹开源
徐霖
袁广卿
机构
中山大学
肿瘤防治中心
检验
科
中山大学
肿瘤防治中心胸科
中山大学中山医学院检验系
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第B03期38-40,共3页
基金
广东省自然科学基金(021907)
文摘
【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定 PSMA 蛋白的表达。【结果】序列测定结果表明,两条引物之间的片段长度为2279bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与 GenBank 的 PSMA 序列进行 Blast 对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100ku。【结论】成功扩增了 PSMA 编码区序列,构建了 PSMA 真核表达载体,建立了 PSMA 稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的 PSMA 为分子质量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的 PSMA 真核表达系统为进一步研究 PSMA 基因修饰的 DCs 疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。
关键词
前列腺特异膜抗原
克隆
分子
真核表达
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达
戴淑琴
王军业
曹开源
徐霖
袁广卿
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
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