人体寄生虫学开放式实验教学初探 被引量：8

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作者 张瑞琳 胡旭初 +4 位作者 王玲 罗海华 李美玉 何霭 吴忠道 《中山大学学报论丛》 2007年第10期35-37,共3页

[目的]探索开放式实验教学在人体寄生虫学实验中的应用效果。[方法]选择医学检验专业(五年制)2004年级学生为试点班级,设旋毛形线虫为开放式实验内容,BALA/c小鼠为实验动物,由学生自行设计实验内容、自己动手操作、分析讨论、提交综合... [目的]探索开放式实验教学在人体寄生虫学实验中的应用效果。[方法]选择医学检验专业(五年制)2004年级学生为试点班级,设旋毛形线虫为开放式实验内容,BALA/c小鼠为实验动物,由学生自行设计实验内容、自己动手操作、分析讨论、提交综合性实验报告,最后由指导教师进行讲评。[结果]通过对旋毛形线虫的实验设计、感染期幼虫的收集、分离纯化和抗原制备、小鼠血清抗体滴度的测定,掌握了实验原理、方法、步骤等相关知识。[结论]该学习方式对学生的未来发展有重要帮助,是培养本科生动手能力、分析解决问题能力,提高综合素质的有效途径。 展开更多

关键词 人体寄生虫学 开放性实验教学 旋毛形线虫

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“一带一路”背景下MBBS留学生人体寄生虫学教学改革的思考 被引量：10

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作者 孙希 《医学教育研究与实践》 2020年第5期855-857,886,共4页

教育在“一带一路”建设中具有基础性和先导性作用,加强“一带一路”沿线国家教育合作既是共建“一带一路”的重要组成部分,又为共建“一带一路”提供人才支撑。寄生虫病作为“一带一路”沿线很多国家面临的重要公共卫生问题,也是未来很... 教育在“一带一路”建设中具有基础性和先导性作用,加强“一带一路”沿线国家教育合作既是共建“一带一路”的重要组成部分,又为共建“一带一路”提供人才支撑。寄生虫病作为“一带一路”沿线很多国家面临的重要公共卫生问题,也是未来很多MBBS留学生归国行医后要面对的重要医疗问题,对其学习具有重要意义。因此,本文针对“一带一路”背景下如何进行MBBS留学生“人体寄生虫学”教学改革进行了一些思考,以探讨如何培养提高来华留学生的教学水平。 展开更多

关键词 人体寄生虫学 一带一路 MBBS留学生

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亚洲牛带绦虫成虫延伸因子-1基因的表达、纯化及免疫学分析 被引量：3

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作者 申萍香 吴璇 +4 位作者 黄江 胡旭初 余新炳 包怀恩 廖兴江 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期379-382,共4页

目的对亚洲牛带绦虫成虫延伸因子-1(elongation factor1,EF-1)基因进行克隆、表达和免疫学初步研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫EF-1克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷诱导表达,表达产物通过... 目的对亚洲牛带绦虫成虫延伸因子-1(elongation factor1,EF-1)基因进行克隆、表达和免疫学初步研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫EF-1克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用蛋白印迹法(Western blotting)进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-EF-1构建成功。重组蛋白可被感染了亚洲牛带绦虫患者血清和猪血清识别,表明其具有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫成虫EF-1基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 亚洲牛带绦虫 延伸因子-1 基因克隆 原核表达

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病原生物学实验室的高效与人性化管理 被引量：3

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作者 周燕蓉 吴忠道 《中国医药导报》 CAS 2012年第11期172-173,共2页

本研究学习、总结中山大学中山医学院热带病研究所管理的规章制度和科学管理方法,对病原生物学实验室进行高效、规范化、人性化管理,充分发挥实验室的整体功能,为科研和实验教学提供有力保障。

关键词 病原生物学 实验室管理 生物安全

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虎纹蛙自然感染裂头蚴的调查及其在实验教学中的应用 被引量：4

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作者 王玲 张瑞琳 +4 位作者 罗海华 曹爱莲 何蔼 郑小英 胡旭初 《中山大学学报论丛》 2007年第3期37-38,48,共3页

〔目的〕调查广州市自由市场野生虎纹蛙感染裂头蚴的情况及其在实验教学中的应用。〔方法〕选择广州市定点专卖场购买野生虎纹蛙,在实验教学中由学生自然处死剥皮后按部位检查分离肌肉中的裂头蚴;并将实验结果与本地居民近期感染该虫的... 〔目的〕调查广州市自由市场野生虎纹蛙感染裂头蚴的情况及其在实验教学中的应用。〔方法〕选择广州市定点专卖场购买野生虎纹蛙,在实验教学中由学生自然处死剥皮后按部位检查分离肌肉中的裂头蚴;并将实验结果与本地居民近期感染该虫的病例进行分析讨论。〔结果〕4年来共检查野生虎纹蛙978只,阳性蛙402只,感染率约为41.1%;患者的感染与蛙体内的裂头蚴密切相关。〔结论〕在广州市出售的野生虎纹蛙裂头蚴的感染率仍然较高;近年来仍然有感染裂头蚴的新病例出现;有效的实验操作是保证教学质量的关键。 展开更多

关键词 虎纹蛙 裂头蚴 调查 病例分析 实验教学

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家猫自然感染华支睾吸虫的调查及其在实验教学中的应用 被引量：4

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作者 张瑞琳 曹爱莲 +5 位作者 刘小星 王玲 罗海华 何蔼 郑小英 潘实清 《中山大学学报论丛》 2007年第3期39-41,共3页

[目的]分析近15年来家猫自然感染华支睾吸虫的资料及其在实验教学中的应用效果。[方法]将本室1991年～2005年期间，在广东省珠江三角州地区随机购买的家猫或家猫肝脏自然感染华支睾吸虫的检查结果；皖鱼苗和小杂鱼自然感染华支睾吸虫囊... [目的]分析近15年来家猫自然感染华支睾吸虫的资料及其在实验教学中的应用效果。[方法]将本室1991年～2005年期间，在广东省珠江三角州地区随机购买的家猫或家猫肝脏自然感染华支睾吸虫的检查结果；皖鱼苗和小杂鱼自然感染华支睾吸虫囊蚴的检查结果；以及这些实验材料在实验教学中的应用进行回顾分析。[结果]其间共检查家猫256只，查出阳性150只；检查家猫肝脏638个，查出阳性446个；检查流行区购买的皖鱼苗（长9—12cm）1336条，阳性916条；麦穗鱼等小杂鱼（长3—5cm）517条，阳性114条。[结论]在广东省华支睾吸虫流行区采购的家猫或家猫肝脏，其华支睾吸虫的感染率近几年仍然很高，应对该病采取积极的综合性防治措施；在实验教学中让学生自己动手解剖检查感染华支睾吸虫的终宿主或中间宿主等实验动物，对保证教学质量的圆满完成起到了积极的作用。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 调查 人体寄生虫学实验

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亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2的克隆表达及免疫鉴定 被引量：1

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作者 廖兴江 戴佳琳 +5 位作者 黄江 胡旭初 余新炳 申萍香 周灵贵 郎书源 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期395-398,共4页

目的克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBCE2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBCE2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴... 目的克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBCE2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBCE2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠杆菌BL-21/DE3中用IPTG诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,并使用Western blotting分析其免疫反应性。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-UBCE2构建成功,该基因在大肠杆菌中以包涵体形式得到表达,十二烷基肌氨酸钠纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠杆菌BL-21/DE3得到高效表达,亲和层析得到高纯度的蛋白且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明其有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫UBCE2可在原核表达系统中表达,并具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能奠定基础。 展开更多

关键词 亚洲牛带绦虫 泛素缀合酶E2 基因克隆 原核表达 免疫反应性

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弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区在大肠杆菌中的表达 被引量：1

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作者 马长玲 胡旭初 +4 位作者 张雪雁 沈浩贤 李小敏 陈新宇 陈代雄 《广州医学院学报》 2004年第4期14-16,共3页

目的:克隆并表达弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段,为下一步表达蛋白纯化奠定基础。 方法:将弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段克隆入高效融合表达载体pET32α,转化大肠杆菌BL21(DE3), 37℃、IPTG诱导表达,SDS PAGE分析表达产物。结果... 目的:克隆并表达弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段,为下一步表达蛋白纯化奠定基础。 方法:将弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段克隆入高效融合表达载体pET32α,转化大肠杆菌BL21(DE3), 37℃、IPTG诱导表达,SDS PAGE分析表达产物。结果:成功构建重组质粒pET32α SAG1,经诱导后表达出含 外源基因的融合蛋白,SDS PAGE分析表达产物分子质量约44kDa。结论:弓形虫SAG1成熟蛋白编码区在原 核表达系统pET32α/BL21(DE3)中获得成功表达,为下一步表达蛋白纯化提供试验依据。 展开更多

关键词 弓形虫 SAG1基因 大肠杆菌 表达

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鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建、筛选和鉴定

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作者 陈代雄 陈新宇 詹希美 《动物医学进展》 CSCD 2004年第3期85-87,共3页

构建鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,以探索制备抗日本血吸虫单克隆抗体的新方法。用文库构建试剂盒 ,以感染小鼠脾脏为材料 ,建立了抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,并对该抗体库进行了富集、筛选和鉴定。构建的噬菌体抗体库库容为 1 ... 构建鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,以探索制备抗日本血吸虫单克隆抗体的新方法。用文库构建试剂盒 ,以感染小鼠脾脏为材料 ,建立了抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,并对该抗体库进行了富集、筛选和鉴定。构建的噬菌体抗体库库容为 1 .0 7× 1 0 6 ;从抗体库随机挑取的 72个克隆中最终筛选到特异性抗日本血吸虫阳性克隆 2个。 SDS-PAGE和 Western blot-ting分析结果显示 :两个克隆表达的单链抗体大小均为 3 .1万 ,且具有良好的特异性。 展开更多

关键词 日本血吸虫 鼠源性单克隆抗体 噬菌体抗体库 构建 筛选 鉴定 血吸虫病

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抗日本血吸虫噬菌体抗体库的筛选和阳性克隆的测序

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作者 陈代雄 詹希美 +1 位作者 何蔼 张瑞琳 《广州医学院学报》 2003年第3期7-10,共4页

目的 :探索制备抗日本血吸虫循环抗原的单链抗体的新方法。方法 :用日本血吸虫成虫代谢抗原对已构建的抗日本血吸虫噬菌体抗体库进行富集 ,然后用ELISA法从富集的抗体库中筛选阳性克隆 ,然后借助ELISA、SDS PAGE和Westernblot等方法对... 目的 :探索制备抗日本血吸虫循环抗原的单链抗体的新方法。方法 :用日本血吸虫成虫代谢抗原对已构建的抗日本血吸虫噬菌体抗体库进行富集 ,然后用ELISA法从富集的抗体库中筛选阳性克隆 ,然后借助ELISA、SDS PAGE和Westernblot等方法对阳性克隆表达产物进行了特异性鉴定 ,最后对阳性克隆插入片段进行了测序和序列分析。结果 :从随机挑取的 72个克隆中筛选到阳性克隆 6个 ,经交叉筛选和鉴定最终获得特异性抗日本血吸虫阳性克隆 2个。测序和序列分析结果也证实 :阳性克隆插入片段推导的氨基酸序列具有典型的抗体可变区特征。结论 展开更多

关键词 日本血吸虫 噬菌体抗体库 筛选 鉴定 测序

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构建以eGFP为报告基因的毕赤酵母表达载体

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作者 陈志文 冯姣 +6 位作者 蒋敏敏 陈春梅 肖星 何娅 易修文 陈庭金 席丽艳 《皮肤性病诊疗学杂志》 2016年第3期152-155,共4页

目的:构建以绿色荧光蛋白eGFP为报告基因的毕赤酵母表达载体,为后续致病真菌功能基因的eGFP融合基因过表达作铺垫。方法:利用In-Fusion系统构建eGFP的表达载体PPICZαB-eGFP,氯化锂转化毕赤酵母X33,通过含Zeocin(100μg/mL)抗性的YPD培... 目的:构建以绿色荧光蛋白eGFP为报告基因的毕赤酵母表达载体,为后续致病真菌功能基因的eGFP融合基因过表达作铺垫。方法:利用In-Fusion系统构建eGFP的表达载体PPICZαB-eGFP,氯化锂转化毕赤酵母X33,通过含Zeocin(100μg/mL)抗性的YPD培养基筛选,将得到的菌落X33-eGFP以引物3'-AOX/5'-AOX及eGFP-F/eGFP-R进行PCR,产物行琼脂糖凝胶电泳、测序验证eGFP片段是否成功插入,最后甲醛诱导表达。结果:以X33-eGFP为模板的PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示片段eGFP成功插入至载体中,测序验证无突变。经甲醛诱导后的毕赤酵母X33-eGFP在蓝色荧光激发下,可观察到发出绿色荧光。结论:成功建立了毕赤酵母X33-eGFP,且证明了eGFP片段可以在毕赤酵母AOX启动子中得到表达。 展开更多

关键词 绿色荧光蛋白 毕赤酵母 克隆

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