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shRNA干扰Jurkat细胞株MDM2表达对细胞生物特性的影响
被引量:
3
1
作者
朱有凯
林汉良
+3 位作者
顾霞
张萌
吴红阳
许湘
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期347-350,共4页
目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平...
目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平、基础生长曲线、细胞周期变化以及UV照射后细胞生长变化。结果发现转染pMDM2shRNA的细胞MDM2mRNA及蛋白质的表达均下降>50%,细胞的生长减慢,出现一定程度的G1~S期阻滞,DNA损伤后细胞恢复较慢。结论MDM2基因表达下降后,可导致细胞增殖减慢以及降低损伤修复的能力;细胞内表达shRNA可长期敲低靶基因的表达,可作为较理想的基因功能研究细胞模型。
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关键词
JURKAT细胞株
RNA干扰
生物特性
MDM2mRNA
细胞生物学特性
Western
MDM2基因
RT-PCR
基因功能研究
DNA损伤
shRNA
细胞内表达
方法应用
表达载体
稳定表达
技术检测
blot
生长曲线
生长变化
uV照射
周期变化
基因表达
损伤修复
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题名
shRNA干扰Jurkat细胞株MDM2表达对细胞生物特性的影响
被引量:
3
1
作者
朱有凯
林汉良
顾霞
张萌
吴红阳
许湘
机构
中山大学中山医学院基础医学院病理学教研室
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期347-350,共4页
文摘
目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平、基础生长曲线、细胞周期变化以及UV照射后细胞生长变化。结果发现转染pMDM2shRNA的细胞MDM2mRNA及蛋白质的表达均下降>50%,细胞的生长减慢,出现一定程度的G1~S期阻滞,DNA损伤后细胞恢复较慢。结论MDM2基因表达下降后,可导致细胞增殖减慢以及降低损伤修复的能力;细胞内表达shRNA可长期敲低靶基因的表达,可作为较理想的基因功能研究细胞模型。
关键词
JURKAT细胞株
RNA干扰
生物特性
MDM2mRNA
细胞生物学特性
Western
MDM2基因
RT-PCR
基因功能研究
DNA损伤
shRNA
细胞内表达
方法应用
表达载体
稳定表达
技术检测
blot
生长曲线
生长变化
uV照射
周期变化
基因表达
损伤修复
Keywords
leukemia
MDM2
pSilencer 4.1-CMV neo
shRNA
分类号
R973.2 [医药卫生—药品]
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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作者
出处
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被引量
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1
shRNA干扰Jurkat细胞株MDM2表达对细胞生物特性的影响
朱有凯
林汉良
顾霞
张萌
吴红阳
许湘
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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