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肾气丸对衰老大鼠学习记忆能力和脑组织过氧化的影响 被引量:7
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作者 郑敏 张黎 +3 位作者 张洁 刘靖 汪华侨 黄清松 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第6期32-35,共4页
为观察肾气丸对D-gal致衰老大鼠学习记忆和脑组织过氧化的影响,采用清洁级健康Wistar雄性大鼠,随机分为4组,即正常组、模型组、肾气丸低剂量组和高剂量组,每组10只。制备D-gal亚急性衰老大鼠模型,检测各组大鼠空间学习记忆能力及脑组织... 为观察肾气丸对D-gal致衰老大鼠学习记忆和脑组织过氧化的影响,采用清洁级健康Wistar雄性大鼠,随机分为4组,即正常组、模型组、肾气丸低剂量组和高剂量组,每组10只。制备D-gal亚急性衰老大鼠模型,检测各组大鼠空间学习记忆能力及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及丙二醛(MDA)水平。结果肾气丸可缩短大鼠水迷宫测试中的探索路径长度和搜台潜伏期、减少穿梭回避测试中平均潜伏期、进入错误区时间和遭受电击次数,并可提高衰老模型大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性,降低脑组织MDA含量。肾气丸可延缓脑组织的脂质过氧化,改善小鼠的记忆能力,进而延缓脑衰老进程。 展开更多
关键词 肾气丸 衰老型大鼠 学习记忆 过氧化物酶
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重组四价Aβ_(1-15)蛋白的表达及免疫原性鉴定 被引量:5
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作者 邹俊涛 姚志彬 +4 位作者 张革 汪华侨 徐杰 谢瑶 袁群芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期79-83,共5页
目的:制备重组人四价串联Aβ1-15老年性痴呆二代蛋白疫苗,探讨其免疫原性。方法:以本室前期制备的含四价Aβ1-15基因(4×Aβ15)的重组质粒pcDNA-4×Aβ15为模板,PCR扩增4×Aβ15基因并克隆至pGEX-4T-2质粒中,转化大肠杆菌,... 目的:制备重组人四价串联Aβ1-15老年性痴呆二代蛋白疫苗,探讨其免疫原性。方法:以本室前期制备的含四价Aβ1-15基因(4×Aβ15)的重组质粒pcDNA-4×Aβ15为模板,PCR扩增4×Aβ15基因并克隆至pGEX-4T-2质粒中,转化大肠杆菌,诱导表达GST-4×Aβ15。经thrombin酶切去除GST后得到纯化的4×Aβ15蛋白。将4×Aβ15免疫BALB/c小鼠,观察其诱导体液免疫反应的能力。结果:经鉴定、测序,获取重组质粒pGEX-4×Aβ15,诱导表达后Western blotting显示在相对分子质量约35×103处有GST-4×Aβ15表达带,thrombin酶切去除GST后得到相对分子质量约9×103的4×Aβ15蛋白。4×Aβ15蛋白免疫小鼠诱导出(964.6±401.3)mg/L抗Aβ抗体。结论:成功构建了pGEX-4×Aβ15原核表达质粒并表达人重组4×Aβ15蛋白,免疫动物证实该蛋白疫苗有较强的免疫原性。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 疫苗 β淀粉样蛋白 原核表达 免疫力
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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建 被引量:3
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作者 张志 黄宗青 +6 位作者 沈琪 刘洪涛 邓英太 李爱东 周国强 汪华侨 何蕴韶 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期288-291,共4页
【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质... 【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。【结果】人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。【结论】成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。 展开更多
关键词 苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 克隆 原核表达质粒
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钳夹损伤后轴突再生对脊髓前角神经元脂褐素含量的影响 被引量:4
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作者 李欣 袁群芳 +1 位作者 汪华侨 姚志彬 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期16-18,34,I002,共5页
[目的]研究神经元轴突损伤后再生过程中对神经元胞体内脂褐素生成和累积的变化,了解神经再生对衰老进程的影响。[方法]钳夹法损伤Wistar大鼠右侧C_5~T_1神经根,按钳夹次数和存活时间分为6组,观察损伤侧脊髓前角神经元内脂褐素变化,用... [目的]研究神经元轴突损伤后再生过程中对神经元胞体内脂褐素生成和累积的变化,了解神经再生对衰老进程的影响。[方法]钳夹法损伤Wistar大鼠右侧C_5~T_1神经根,按钳夹次数和存活时间分为6组,观察损伤侧脊髓前角神经元内脂褐素变化,用图像分析系统进行定量分析。[结果]12月龄大鼠脊髓前角神经元胞浆内已有脂褐素分布,自发出黄或黄绿色荧光,呈散在细小颗粒,含量呈随增龄而增加,且呈团块状堆积在核周围。钳夹侧的脂褐素含量较正常侧的脂褐素含量均有明显减少(P<0.05);二次钳夹后脂褐素含量较一次钳夹更为减少,但二者之间无明显差异(P>0.05)。直线相关回归分析显示正常侧、一次钳夹侧和二次钳夹侧脂褐素累积均随存活时间而增加,呈正相关关系(γ分别为0.967、0.994和0.995,P< 0.05),回归系数分别为0.0783、0.0548和0.0377。钳夹侧小于正常侧,表明损伤后再生使胞体内脂褐素累积速度减慢。[结论]轴突损伤后再生可以使神经元内脂褐素的累积较正常情况下减少,提示轴突再生可减缓神经元衰老进程。 展开更多
关键词 脂褐素 轴突再生 钳夹 脊髓 神经元 动物实验
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不同表位Aβ亚单位疫苗引起免疫反应类型及疫苗安全性评价 被引量:1
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作者 李国营 胡金家 +2 位作者 汪华侨 徐杰 姚志彬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期232-238,共7页
为了研究不同表位Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠引起的免疫反应类型和疫苗的安全性,本研究选用32只5月龄Tg2576小鼠,并随机分成对照组、Aβ42组、Aβ1-15组和Aβ36-42组,5月龄时开始分别接种相应疫苗,接种7个月,间接ELISA法测定血液及脑匀... 为了研究不同表位Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠引起的免疫反应类型和疫苗的安全性,本研究选用32只5月龄Tg2576小鼠,并随机分成对照组、Aβ42组、Aβ1-15组和Aβ36-42组,5月龄时开始分别接种相应疫苗,接种7个月,间接ELISA法测定血液及脑匀浆上清液中抗Aβ42的抗体滴度。分别取4组小鼠的脾细胞进行培养,用刀豆蛋白(ConA)和各自抗原刺激,ELISA法检测培养液中IFN-γ,IL-2,IL-4和IL-10的含量,免疫组化法检测脑内小胶质细胞的增生情况,组织化学法检测脑、肝、脾、肺、肾组织有无病理性改变。结果显示:(1)与对照组相比,疫苗免疫组血清和脑组织匀浆上清液中抗Aβ42抗体的滴度明显有所增高(P<0.01);(2)脾细胞培养,经ConA或各自抗原刺激后,3组疫苗免疫组细胞增殖显著高于对照组(P<0.01)。培养液中免疫因子检测显示Aβ42组IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均较高,Aβ1-15组中IL-4和IL-10较高,Aβ36-42组IFN-γ和IL-2较高。免疫组织化学法显示4组小鼠大脑皮质与海马部位均有大量OX-42阳性小胶质细胞,疫苗免疫组OX-42细胞数量更多,但4组之间无显著性差异(P>0.05);(3)HE及组织特异性染色显示在疫苗接种组鼠的重要器官未见病理性改变。上述结果表明,Aβ42疫苗可引起Th2和Th1免疫反应,Aβ1-15亚单位主要引起Th2免疫反应,Aβ36-42疫苗主要引起Th1免疫反应。3种疫苗均可进一步激活脑内小胶质细胞,增强其Aβ清除能力,未发现疫苗接种引起的毒副作用。因此,本实验结果提示Aβ1-15亚单位疫苗更符合AD免疫治疗的要求。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 疫苗 安全性 免疫类型 Tg2576鼠
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