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腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达
被引量：
2
1
作者
钟建辉
银巍
+3 位作者
藏林泉
江伟健
邱鹏新
颜光美
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期622-625,共4页
【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒p...
【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带，Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。
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关键词
DNA多聚酶β
腺病毒载体
PC12细胞
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职称材料
题名
腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达
被引量：
2
1
作者
钟建辉
银巍
藏林泉
江伟健
邱鹏新
颜光美
机构
中山大学 基础医学院药理教研室附属第一医院肾内科
中山大学
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期622-625,共4页
基金
国家自然科学基金(30472010) 广东省自然科学基金(039191)
文摘
【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带，Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。
关键词
DNA多聚酶β
腺病毒载体
PC12细胞
Keywords
DNA polymerase β
adenovirus vector
PC12 cells
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达
钟建辉
银巍
藏林泉
江伟健
邱鹏新
颜光美
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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