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引物原位标记技术的建立 被引量:3
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作者 谢民强 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期69-72,共4页
为了快速检测特异性染色体,采用引物原位标记和细胞化学技术,以7号,17号,X和Y染色体特异性寡核苷酸作引物,对外周血淋巴细胞分裂中期染色体和间期核进行定位研究。结果显示,上述4种染色体均得到特异性标记,且信号强,清晰,无背景着色。... 为了快速检测特异性染色体,采用引物原位标记和细胞化学技术,以7号,17号,X和Y染色体特异性寡核苷酸作引物,对外周血淋巴细胞分裂中期染色体和间期核进行定位研究。结果显示,上述4种染色体均得到特异性标记,且信号强,清晰,无背景着色。结论表明,在与染色体有关的许多研究中该法可替代原位杂交,结合其最近在组织病理学中的应用研究,提示该技术有可能成为分子病理学研究和细胞基因快速诊断的有价值的工具。 展开更多
关键词 染色体 引物原位标记 寡核苷酸
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Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建
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作者 谢民强 杨解军 +1 位作者 杨林 张革化 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第6期445-447,共3页
【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出E... 【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出EBVDNA多聚酶基因 (3 0 44bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆至表达载体 pMAL p2 ,采用蓝白斑试验筛选阳性菌落。EcoRⅠ和HindⅢ酶切分析、鉴定重组体 pEBP。【结果】通过电泳鉴定 ,PCR产物为 3 0 44bp ,与EBVDNA多聚酶基因大小一致。经蓝白斑试验及限制性DNA内切酶分析 ,成功地筛选到EBVDNA多聚酶基因重组表达质粒 pEBP。【结论】本实验成功地扩增出完整EBVDNA多聚酶基因 ,并构建了高效表达重组体 ,为进一步在体外表达、制备EBVDNA多聚酶蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 爱泼期坦-巴尔病毒 RCR DNA 载体 鼻咽癌 诊断
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原位逆转录多聚酶链反应技术的改进
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作者 谢民强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期348-350,共3页
关键词 聚合酶链反应 逆转录 RT-PCR 改进
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