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弓形体重组质粒pcDNA_3-SAG1免疫小鼠诱导的细胞免疫应答研究被引量：2: 1; 作者周永安陈观今 +1 位作者郭虹吕芳丽《山西临床医药》 2001年第5期335-338,共4页; 目的 :用 pc DNA3- SAG1真核表达质粒直接免疫小鼠 ,观察 DNA免疫所诱导的小鼠细胞免疫应答 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :大量制备重组质粒 pc DAN3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内 ,每隔 2 1d接种一次 ,一共免疫三次。用 ... 展开更多; 关键词弓形体重组质粒 pcDNA3-SAG1 DNA疫苗细胞免疫免疫应答; 在线阅读下载PDF 职称材料

影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究被引量：1: 2; 作者周永安乔巨 +2 位作者罗树红余新炳陈观今《山西临床医药》 2001年第11期830-832,共3页; 目的 :建立适合本实验室的标准化转染方法。方法 :采用磷酸钙 - DNA共沉淀转化法将多组重组质粒导入He L a细胞 ,观察其转化效率的相关影响因素。结果 :待转化的细胞应为单层略稀疏的对数生长期细胞 ;重组质粒 DNA的浓度为 8μg/ 10 0 ... 展开更多; 关键词重组粒 DNA 基因转染哺乳动物细胞表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定被引量：1: 3; 作者周永安陈观今 +1 位作者刘彦文罗树红《山西临床医药》 2001年第4期249-252,共4页; 目的 :体外扩增弓形体主要表面抗原 SAG1基因 ,构建 pc DNA3- SAG1真核表达质粒 ,为研制弓形体疫苗奠定基础。方法 :采用 PCR技术 ,自行设计一对寡核酸引物 (P1,P2 ) ,从弓形体 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码SAG1抗原的基因片段。扩... 展开更多; 关键词弓形体表面抗原SAG1 鉴定基因扩增基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形体SAG1基因DNA诱导小鼠体液免疫应答及保护性研究: 4; 作者周永安高宝英 +2 位作者陈观今郭虹吕芳丽《山西临床医药》 2001年第6期413-415,共3页; 目的 :用重组真核表达质粒 pc DNA3- SAG1直接免疫 BAL B/ c小鼠 ,观察其 DNA免疫所诱导的小鼠体液免疫反应和保护性作用。方法 :大量制备重组质粒 pc DNA3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内。抗体滴度用 EL ISA法进行测定 :采用 PC... 展开更多; 关键词弓形体重组质粒pcDNA3-SAG1 DNA免疫抗体体液免疫应答小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形体重组质粒pcDNA_3-SAG1免疫小鼠诱导的细胞免疫应答研究被引量：2: 1; 作者周永安陈观今郭虹吕芳丽; 机构山西医科大学第二医院中山医科大学病原分子生物学; 出处《山西临床医药》 2001年第5期335-338,共4页; 文摘目的 :用 pc DNA3- SAG1真核表达质粒直接免疫小鼠 ,观察 DNA免疫所诱导的小鼠细胞免疫应答 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :大量制备重组质粒 pc DAN3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内 ,每隔 2 1d接种一次 ,一共免疫三次。用 MTT方法对脾脏的 NK细胞和其淋巴细胞的转化率进行测定 ;采用免疫荧光法对 CD4+、CD8+ 细胞进行测定。结果 :实验组 NK细胞杀伤率为 :70 .0± 3.6 4,而 pc DNA3及空白对照分别为 :48.5± 6 .0 8和 47.0± 5 .93。实验组 NK细胞活性比对照组明显增高 (P<0 .0 5 ) ,而 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;对 T淋巴细胞亚群 CD4+、CD8+进行动态分析 ,可见随着感染时间的延长 ,CD8+的数量逐渐上升 ,CD4+ / CD8+的比率逐渐下降 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照有明显差异 (P<0 .0 5 ) ;Con A刺激小鼠淋巴细胞转化实验 ,能刺激免疫鼠及对照鼠淋巴细胞增生 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :重组质粒pc DNA3- SAG1免疫 BAL B/ c小鼠可诱导一定的细胞免疫。; 关键词弓形体重组质粒 pcDNA3-SAG1 DNA疫苗细胞免疫免疫应答; Keywords toxoplasma gondil recombinant DNA vaccine cellular immune; 分类号 R531.8 [医药卫生—内科学] R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究被引量：1: 2; 作者周永安乔巨罗树红余新炳陈观今; 机构山西医科大学第二医院中山医科大学病原分子生物学; 出处《山西临床医药》 2001年第11期830-832,共3页; 文摘目的 :建立适合本实验室的标准化转染方法。方法 :采用磷酸钙 - DNA共沉淀转化法将多组重组质粒导入He L a细胞 ,观察其转化效率的相关影响因素。结果 :待转化的细胞应为单层略稀疏的对数生长期细胞 ;重组质粒 DNA的浓度为 8μg/ 10 0 m L～ 10μg/ 10 0 m L培养瓶 ;转化时间为 10 h;G4 18是在转化后 2 4 h加入 ,浓度为 2 0 0μg/ m L。结论 :重组质粒; 关键词重组粒 DNA 基因转染哺乳动物细胞表达; Keywords recombinant plasmid DNA transfection expression; 分类号 R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定被引量：1: 3; 作者周永安陈观今刘彦文罗树红; 机构山西医科大学第二医院中山医科大学病原分子生物学; 出处《山西临床医药》 2001年第4期249-252,共4页; 文摘目的 :体外扩增弓形体主要表面抗原 SAG1基因 ,构建 pc DNA3- SAG1真核表达质粒 ,为研制弓形体疫苗奠定基础。方法 :采用 PCR技术 ,自行设计一对寡核酸引物 (P1,P2 ) ,从弓形体 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码SAG1抗原的基因片段。扩增的目的片段经纯化后用 Eco R1和 Hind 双酶切后 ,克隆到真核表达质粒 pc DNA3中 ,转化入大肠杆菌 TG1,用氨苄青霉素和 PCR初筛 ,将 PCR扩增阳性的重组子分别用 Sac1单酶切、Eco R1和 Hind 双酶切鉴定。结果成功地构建真核型表达质粒 pc DNA 3- SAG1,从而为进一步 SAG1重组抗原的体外表达创造有利条件。结果 :从 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码 SAG1的全基因序列 ,扩增目的基因片段大小与预期长度(10 2 5 bp) ,相符 ;将分离、纯化的目的基因片段 SAG1插入 pc DNA3质粒 Hind 和 Eco R1位点 ,构建重组质粒pc DNA3- SAG1。结论 :成功构建重组质粒 pc DNA3-; 关键词弓形体表面抗原SAG1 鉴定基因扩增基因克隆; Keywords toxoplasma gondii surface antigen SAG1 amplication; 分类号 R531.8 [医药卫生—内科学] R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形体SAG1基因DNA诱导小鼠体液免疫应答及保护性研究: 4; 作者周永安高宝英陈观今郭虹吕芳丽; 机构山西医科大学第二医院山西省地方税务局医务所中山医科大学病原分子生物学; 出处《山西临床医药》 2001年第6期413-415,共3页; 文摘目的 :用重组真核表达质粒 pc DNA3- SAG1直接免疫 BAL B/ c小鼠 ,观察其 DNA免疫所诱导的小鼠体液免疫反应和保护性作用。方法 :大量制备重组质粒 pc DNA3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内。抗体滴度用 EL ISA法进行测定 :采用 PCR方法对小鼠的血液组织外源基因进行检测 ;对试验组及对照组进行 RH株攻击感染 ,并对其进行分析。结果 :用 EL ISA法检测的抗体 Ig G滴度为 1∶ 2 5 6 0 ;免疫后三周、六个月从免疫鼠的血液组织中用 PCR仍可检测到特异的SAG1基因的存在 :体外弓形虫攻击感染实验组和对照组 ,可见实验组的存活时间较对照组时间延长 (P<0 .0 5 )。结论 :重组质粒 pc DNA3- SAG1免疫 BAL B/; 关键词弓形体重组质粒pcDNA3-SAG1 DNA免疫抗体体液免疫应答小鼠; Keywords Toxoplasma gondii recombinant plasmid pcDNA 3-SAG1 DNA immune antibody; 分类号 R531.8 [医药卫生—内科学] R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	弓形体重组质粒pcDNA_3-SAG1免疫小鼠诱导的细胞免疫应答研究	周永安陈观今郭虹吕芳丽	《山西临床医药》	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究	周永安乔巨罗树红余新炳陈观今	《山西临床医药》	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定	周永安陈观今刘彦文罗树红	《山西临床医药》	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	弓形体SAG1基因DNA诱导小鼠体液免疫应答及保护性研究	周永安高宝英陈观今郭虹吕芳丽	《山西临床医药》	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料