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嵌套式PCR法分型检测登革病毒基因 被引量:13
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作者 方美玉 陈火胜 +1 位作者 陈翠华 郭辉玉 《中山医科大学学报》 CSCD 1995年第2期39-43,共5页
应用一对通用引物同时扩增4个型登革病毒(DEN)的NS1基因部分片段,然后采用嵌套式聚合酶链反应(PCR)方法对DEN进行分型鉴定。通用引物扩增基因序列长度为413bp;DEN各型内引物扩增序列长度分别是:DEN1型... 应用一对通用引物同时扩增4个型登革病毒(DEN)的NS1基因部分片段,然后采用嵌套式聚合酶链反应(PCR)方法对DEN进行分型鉴定。通用引物扩增基因序列长度为413bp;DEN各型内引物扩增序列长度分别是:DEN1型为262bp;DEN2型为189bp;DEN3型为392bp;DEN4型为97bp。应用嵌套式PCR法直接分型检测登革热患者血清标本21份,发现DEN1型阳性18份,DEN2型阳性2份。该法能在2d内完成对DEN的分型鉴定,为登革热的早期快速诊断提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 登革热病毒 核糖核酸 病毒基因
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抗人食管癌单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的定位 被引量:2
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作者 刘长征 何军芳 +4 位作者 梁昌盛 林鹏 高锦辉 刘乐和 沈忠英 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期19-21,I001,共4页
【目的】研究抗人食管癌单克隆抗体G9(McAbG9)在荷瘤裸鼠体内对食管癌组织的定位作用。【方法】采用氯胺 T法制备标记物12 5I G9,纯化后腹腔注射 ,分别于 2 4、48、72h取多种器官 /组织测放射性 ,计算每克组织摄取放射性的百分比(%ID/ g... 【目的】研究抗人食管癌单克隆抗体G9(McAbG9)在荷瘤裸鼠体内对食管癌组织的定位作用。【方法】采用氯胺 T法制备标记物12 5I G9,纯化后腹腔注射 ,分别于 2 4、48、72h取多种器官 /组织测放射性 ,计算每克组织摄取放射性的百分比(%ID/ g)及肿瘤与非瘤组织的比T/NT ,并取 72h的肿瘤组织进行放射自显影分析。【结果】12 5 I G9肿瘤组织的放射性均较其它器官 /组织高 (血液除外 ) ,48h组最高 ,T/NT值在 2~ 7之间 ;放射自显影显示肿瘤组织有大量放射性浓集 ,肿瘤边缘较中心部位明显。【结论】12 5 I G9能在荷瘤裸鼠体内定位于食管癌部位 ,单抗G9具有很好的导向作用。 展开更多
关键词 食管癌 诊断 抗人食管癌单克隆抗体 定位 碘125
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IL-6与登革病毒感染相互关系的实验研究 被引量:2
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作者 曹艳英 郭辉玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期164-166,共3页
目的:研究IL-6对登革Ⅱ型病毒(D2V)复制的影响以及细胞感染D2V后IL-6产生能力的变化。方法:以人单核细胞为感染模型,用微量蚀斑法测定病毒滴度,用ELISA法测定IL-6含量。结果:重组IL-6能增强D2V的... 目的:研究IL-6对登革Ⅱ型病毒(D2V)复制的影响以及细胞感染D2V后IL-6产生能力的变化。方法:以人单核细胞为感染模型,用微量蚀斑法测定病毒滴度,用ELISA法测定IL-6含量。结果:重组IL-6能增强D2V的复制,D2V感染能引起人单核细胞产生IL-6,它们的水平与D2V感染量正相关。 展开更多
关键词 登革热病毒 单核细胞 白细胞介素6 病毒复制
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TNFα在登革病毒感染发病机制中作用的实验研究 被引量:2
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作者 曹艳英 郭辉玉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1997年第5期112-115,共4页
以正常人和脐带血人单核细胞作为登革Ⅱ型病毒(D2V)感染的靶细胞,研究了肿瘤坏死因子α(TNFα)对D2V复制的影响以及人单核细胞感染D2V后TNFα产生能力的变化,动态观察了66例登革感染病人不同发病天数血清中TN... 以正常人和脐带血人单核细胞作为登革Ⅱ型病毒(D2V)感染的靶细胞,研究了肿瘤坏死因子α(TNFα)对D2V复制的影响以及人单核细胞感染D2V后TNFα产生能力的变化,动态观察了66例登革感染病人不同发病天数血清中TNFα水平.结果表明TNFα能增加D2V的复制(P<0.05),高剂量D2V(100pfu/cel)感染能引起人单核细胞产生TNFα,病人血清中TNFα水平明显升高(P<0.05).结果提示TNFα促进登革病毒感染. 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 登革Ⅱ型病毒 人单核细胞
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鼻咽癌体外传代细胞株SUNE中EBV-LMP_1全基因的扩增
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作者 陈宜芳 郭辉玉 +1 位作者 汪慧民 李满枝 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1997年第S1期38-41,共4页
用长片段高保真度PCR扩增系统(expandTMhighfidelityPCRsystem)从鼻咽癌(NPC)体外传代细胞株SUNE中扩增出EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白(LMP1)全基因,经凝胶电泳分析和DNA斑点杂... 用长片段高保真度PCR扩增系统(expandTMhighfidelityPCRsystem)从鼻咽癌(NPC)体外传代细胞株SUNE中扩增出EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白(LMP1)全基因,经凝胶电泳分析和DNA斑点杂交进行鉴定。扩增片段长度为3.43kb,相当于B95-8细胞EBV基因序列位置为170033~166608nt,包括LMP1基因的上游启动子/增强子序列、LMP1编码序列的3个外显子、两个内含子及下游polyA信号序列。LMP1全基因的扩增对于深入研究LMP1基因的结构与功能以及LMP1在NPC发生发展中的作用机制具有十分重要的价值。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤/遗传学 疱疹病毒4型.人/遗传学 基因.病毒/遗传学 病毒基质蛋白质类/生物合成
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抗胰腺癌单克隆抗体的研究
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作者 袁世珍 刘乐和 林汉良 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1989年第2期29-32,73,共5页
用人新鲜胰腺癌组织免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Agl4融合,获得了分泌抗人胰腺癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文重点报道以ABC免疫组织化学法检查YPC1单克隆抗体与人正常组织和肿瘤组织的反应性。结果表明YPC1单克... 用人新鲜胰腺癌组织免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Agl4融合,获得了分泌抗人胰腺癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文重点报道以ABC免疫组织化学法检查YPC1单克隆抗体与人正常组织和肿瘤组织的反应性。结果表明YPC1单克隆抗体与16例被检测的胰腺癌组织发生反应。其中9例(56.3%)呈强阳性反应,与23种正常组织中的10种(43.5%)以及19种非胰腺肿瘤中的8种(42.1%)有不同程度的交叉反应,但多数反应较弱。本研究提示以新鲜人体肿瘤组织作为免疫原制备单克隆抗体是简便可行的,YPC1单克隆抗体可能有助于胰腺癌的诊断和治疗。 展开更多
关键词 杂交瘤 抗体 单克隆 胰腺肿瘤
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家蚕微孢子虫孢子DNA的提取、克隆及部分DNA序列分析 被引量:11
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作者 章新愉 卢铿明 +4 位作者 庄楚雄 胡维民 徐兴耀 黄自然 陈火胜 《蚕业科学》 CAS CSCD 1995年第2期91-95,共5页
报道家蚕微孢子虫(Nosemabombycis简称N.b)孢子DNA的提取、克隆及部分DNA序列测定的结果。采用SDS-蛋白酶K将孢子破碎,用苯酚一氯仿法提取孢子的DNA。将N.b孢子DNA与pTZ18R质粒重组,转... 报道家蚕微孢子虫(Nosemabombycis简称N.b)孢子DNA的提取、克隆及部分DNA序列测定的结果。采用SDS-蛋白酶K将孢子破碎,用苯酚一氯仿法提取孢子的DNA。将N.b孢子DNA与pTZ18R质粒重组,转化于大肠杆菌DH5,获得4个阳性克隆株:pTZ18RN.b1,插入片段为1kb;pTZ18RN.b2,为1.2kb;pTZ18RN.b3为1.8kb及pTZ18RN.b4为1.9kb,经Southern印迹杂交,证实插入的DNA片段为家蚕N.b孢子所特有。与MG1(Nosemasp.),蓖麻蚕微孢子虫、蓝萤叶甲微孢子虫及蚕卵的DNA均无同源性。用双脱氧链终止法测定4个克隆株插入片段的部分DNA的序列,经检索尚未发现同源性的基因序列。讨论了PCR技术诊断家蚕微孢子虫孢子与近缘种的问题。 展开更多
关键词 家蚕 微孢子虫 核酸 克隆 核酸序列分析
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眼镜蛇蛇毒因子与大鼠中性白细胞吞噬功能减退的量效研究 被引量:3
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作者 区景松 孙培吾 王传恩 《中山医科大学学报》 CSCD 1999年第4期276-279,共4页
:研究中华眼镜蛇的蛇毒因子(CVF)与中性白细胞吞噬功能的量效关系及CVF在非协调性异种心脏移植应用中的意义。方法:①用不同剂量的CVF腹膜腔内注射(i.p.)SD大鼠,测定大鼠血液中性白细胞噬菌率;②经CVFi.p.处理后大鼠进行颈部豚鼠—大鼠... :研究中华眼镜蛇的蛇毒因子(CVF)与中性白细胞吞噬功能的量效关系及CVF在非协调性异种心脏移植应用中的意义。方法:①用不同剂量的CVF腹膜腔内注射(i.p.)SD大鼠,测定大鼠血液中性白细胞噬菌率;②经CVFi.p.处理后大鼠进行颈部豚鼠—大鼠异种心脏移植,然后测定移植前后大鼠不同时点的血液中性白细胞噬菌率。结果:①CVF能使大鼠血液中性白细胞噬菌功能减退,并呈量效关系;②经CVF处理的大鼠移植后无发生超急排斥反应(HAR),且血液中性白细胞噬菌率明显减退,至术后3d内仍未恢复。结论:①CVF有抑制中性白细胞噬菌功能,且呈量效关系;②CVF可抑制非协调性异种心脏移植的HAR,测定中性白细胞噬菌功能是一种简便测定CVF体内抗补体活性的方法。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒液类 中性白细胞 吞噬作用 心脏移植
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实验性恙虫病立克次体感染或免疫鼠的ADCC活性和cAMP水平变化
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作者 余华葵 冯慧敏 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期22-24,共3页
本文用^(61)Cr释放试验和~3H-cAMP蛋白竞争结合分析法研究了实验性恙虫病立克次体感染或免疫鼠的ADCC活性和cAMP水平变化。结果发现强毒株(B株)和减毒株(49株)接种后均能导致鼠脾细胞的ADCC水平增高及cAMP水平降低,但灭活立克次体接种... 本文用^(61)Cr释放试验和~3H-cAMP蛋白竞争结合分析法研究了实验性恙虫病立克次体感染或免疫鼠的ADCC活性和cAMP水平变化。结果发现强毒株(B株)和减毒株(49株)接种后均能导致鼠脾细胞的ADCC水平增高及cAMP水平降低,但灭活立克次体接种后对鼠脾细胞的ADCC活性及cAMP水平则无明显影响。 展开更多
关键词 恙虫病 立克次体 ADCC CAMP
全文增补中
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