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寄生虫基因组研究 被引量：2
1
作者 李晖婷 吴忠道 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期84-85,共2页
关键词 寄生虫 基因组计划 高丰度基因 基因测序技术
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恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs25和Pfs48/45基因编码序列的体外扩增 被引量：32
2
作者 罗树红 余新炳 +1 位作者 李学荣 陈观今 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第1期3-6,共4页
目的：体外扩增编码恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs和Pfs48／45的基因序列，为进一步对其进行克隆和体外高效表达创造条件。方法：特定寡核苷酸引物的设计、合成与纯化；恶性疟原虫FCC1／HN株体外培养；利用碱裂解法从培养的恶性疟原虫FCC1... 目的：体外扩增编码恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs和Pfs48／45的基因序列，为进一步对其进行克隆和体外高效表达创造条件。方法：特定寡核苷酸引物的设计、合成与纯化；恶性疟原虫FCC1／HN株体外培养；利用碱裂解法从培养的恶性疟原虫FCC1／HN株提取染色体DNA；PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析。结果：从恶性疟原虫FCC1／HN株基因组DNA中特异扩增出编码Pfs25和Pfs48／45基因序列，其片段大小分别为657bp和1，359bp。而用间日疟原虫基因组DNA为模板作对照，无扩增条带出现。结论：体外扩增编码恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs25和Pfs48／45基因序列与预期长度相符合，从而，为该基因的克隆、测序和表达奠定基础。 展开更多
关键词 恶性 疟原虫 传播阻断抗原 pfs25 pfs48/45
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日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的分离和EST序列测定 被引量：23
3
作者 吴忠道 余新炳 +2 位作者 郑亦男 李焱 周俊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期3-5,共3页
目的　运用表达序列标签技术（ＥＳＴ方法） ，从ＳｊｃＤＮＡ文库中分离、鉴定和测定血吸虫表达基因序列。方法　应用ＥＳＴ方法，从Ｓｊ ｃＤＮＡ 文库中随机挑选出单个重组克隆进行ＰＣＲ直接序列分析，通过互联网将获得的ＥＳＴ 序... 目的　运用表达序列标签技术（ＥＳＴ方法） ，从ＳｊｃＤＮＡ文库中分离、鉴定和测定血吸虫表达基因序列。方法　应用ＥＳＴ方法，从Ｓｊ ｃＤＮＡ 文库中随机挑选出单个重组克隆进行ＰＣＲ直接序列分析，通过互联网将获得的ＥＳＴ 序列送入ＮＣＢＩＧｅｎＢａｎｋ 进行同源性检索，并将发现的未知基因ＥＳＴ序列送入ＮＣＢＩｄｂＥＳＴ 以获得ＧｅｎＢａｎｋ 进入号。结果　分离了１００ 个Ｓｊ重组克隆，并已对２５ 个克隆ｃＤＮＡ 插入片段的ＰＣＲ 产物进行直接序列分析，获得了２１ 个ＥＳＴ 序列。其中２ 个ＥＳＴ 序列为ＧｅｎＢａｎｋ 中已知的血吸虫基因序列，１９ 个为未知基因序列。这１９ 个ＥＳＴ序列已被ＮＣＢＩｄｂＥＳＴ和ＧｅｎＢａｎｋ 接受并获得了新序列进入号。结论　采用ＥＳＴＰＣＲ直接序列分析方法可大量获得血吸虫表达基因ＥＳＴ序列，为进一步开展日本血吸虫（中国大陆株） 表达基因的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 PCR 直接序列分析 CDNA文库
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免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库基因的亚克隆与鉴定 被引量：8
4
作者 沈际佳 蒋作君 +3 位作者 汪渊 周青 余新炳 吴忠道 《安徽医科大学学报》 CAS 1999年第3期164-166,共3页
目的亚克隆免疫筛选日本血吸虫ｃＤＮＡ文库得到的基因。方法在体外将血吸虫ｃＤＮＡ文库基因的ＰＣＲ产物和ｐＧＥＭＴ载体连接，转染大肠杆菌ＸＬ１Ｂｌｕｅ，经抗生素及呈色底物Ｘｇａｌ粗筛，再用限制性内切酶及ＰＣＲ方法进... 目的亚克隆免疫筛选日本血吸虫ｃＤＮＡ文库得到的基因。方法在体外将血吸虫ｃＤＮＡ文库基因的ＰＣＲ产物和ｐＧＥＭＴ载体连接，转染大肠杆菌ＸＬ１Ｂｌｕｅ，经抗生素及呈色底物Ｘｇａｌ粗筛，再用限制性内切酶及ＰＣＲ方法进一步鉴定。结果成功地将文库中４个大小不同的日本血吸虫基因片段连接到载体中，获得４个重组子。结论为可能编码保护性抗原的血吸虫基因测序和将其亚克隆入真核表达质粒奠定基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 基因 文库 克隆 cDNA 亚克隆
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保护性免疫血清及单克隆抗体筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 被引量：25
5
作者 沈际佳 蒋作君 +2 位作者 余新炳 汪学龙 吴忠道 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期31-33,共3页
目的　为寻找有效的抗日本血吸虫感染疫苗候选抗原分子。方法　用紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,再用同法免疫鼠脾细胞制备的单克隆抗体对所获阳性克隆进行再筛选 ,并对免疫筛选的阳性克隆的cDNA插入片段进... 目的　为寻找有效的抗日本血吸虫感染疫苗候选抗原分子。方法　用紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,再用同法免疫鼠脾细胞制备的单克隆抗体对所获阳性克隆进行再筛选 ,并对免疫筛选的阳性克隆的cDNA插入片段进行PCR扩增。结果　兔免疫血清确定 12个阳性克隆 ,其中 6个克隆与 2株以上的单抗呈阳性反应 :PCR扩增cDNA插入片段大小约 40 0bp～ 1 4kb左右。结论　已筛选到与致弱尾蚴免疫兔血清及同法免疫制备单抗产生特异反应的阳性克隆 ,获得一批编码可能具有保护性作用的日本血吸虫抗原的基因片段。 展开更多
关键词 日本血吸虫 CDNA文库 单克隆抗体
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45年恙螨与媒介恙螨传播恙虫病的基础研究 被引量：9
6
作者 黎家灿 郑小英 +3 位作者 奚志勇 倪宏 张海红 陈成福 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期1-9,共9页
报告作者等 45年来恙螨以及媒介恙螨传播恙虫病基础研究结果 ,主要包括 :①恙螨调查研究 :种类的发现 ,恙虫病东方体的分离和检测 ,媒介恙螨孳生地及其恙虫病流行 ;②恙螨生活史和实验生态研究 :恙螨培育成功与生活史的实验 ,恙螨实验... 报告作者等 45年来恙螨以及媒介恙螨传播恙虫病基础研究结果 ,主要包括 :①恙螨调查研究 :种类的发现 ,恙虫病东方体的分离和检测 ,媒介恙螨孳生地及其恙虫病流行 ;②恙螨生活史和实验生态研究 :恙螨培育成功与生活史的实验 ,恙螨实验生态和恙虫病流行的预测预报 ;③恙螨传病机制及其控制恙虫病流行研究 :恙虫病东方体阳性恙螨模型的建立及其东方体在恙螨体内的动态 ,恙螨体内东方体垂直传递和传病潜力 ,以及防灭恙螨与控制恙虫病的流行。 展开更多
关键词 恙螨 恙虫热 遗传学 恙虫病东方体 传染控制 媒介恙螨
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广州市及珠江三角洲淡水鱼华支睾吸虫感染的初步调查 被引量：11
7
作者 詹希美 吕芳丽 +5 位作者 俞慕华 何蔼 张瑞林 梁瑜 付承彬 李道宁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期109-109,103,共2页
关键词 华支睾吸虫感染 淡水鱼 流行病学
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以pcD-IL-2为基因佐剂的含日本血吸虫SjFABPc基因真核表达重组质粒裸DNA免疫小鼠的研究 被引量：11
8
作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 吴忠道 周俊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期7-10,共4页
目的　在小鼠模型中评价含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白分子基因的真核表达质粒pcD -SjFABPc与含IL - 2基因佐剂的质粒构建体 pCD -IL - 2经肌注、皮内途径导入机体后所诱生的免疫反应。 方法　碱裂解法大量制备重组质粒 pcD-SjFABPc、pCD ... 目的　在小鼠模型中评价含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白分子基因的真核表达质粒pcD -SjFABPc与含IL - 2基因佐剂的质粒构建体 pCD -IL - 2经肌注、皮内途径导入机体后所诱生的免疫反应。 方法　碱裂解法大量制备重组质粒 pcD-SjFABPc、pCD -IL - 2重组质粒及空质粒 pcDNA3,经肌肉及皮内注射免疫BALB/c小鼠 ,每只鼠注射 10 0 μg ,两周后同量加强免疫一次。分别于末次免疫后的第 2 0d、5 0d及 65d用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖与NK细胞活性 ,并用双夹心ELISA测定血清细胞因子IL - 2、IFN -γ及IL - 10含量 ;ELISA法测定免疫鼠血清IgG抗体。 结果　NK细胞杀伤活性及脾淋巴细胞增殖测定 ,加佐剂组 ( pcD -SjFABPc联合 pCD -IL - 2组 )较不加佐剂组 ( pcD -SjFABPc组 )NK细胞杀伤及脾淋巴细胞增殖活性皆增加 (P <0 .0 5 )。两途径三次检测IL - 2及IFN -γ值均明显高于NS对照组和空质粒组 ,且加佐剂组的明显高于不加佐剂组的 (P <0 .0 5 ) ;不同途径各组IL - 10值与NS及空质粒对照组的比较则无显著性差别 (P >0 .0 5 )。注射质粒后 2 0d和 5 0d ,未测出抗体 ;免疫后 65d检测 ,pcD -SjFABPc和pcD -SjFABPc联合 pcD -IL - 2免疫组的OD值明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,而该两组OD490 值之间无显著性差异 (P >0 .0 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 DNA免疫 IL-2基因佐剂
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转HBx基因肝癌细胞增殖与抗凋亡特性研究 被引量：7
9
作者 闵军 刘彦文 +2 位作者 陈积圣 罗树红 余新炳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 2000年第S1期46-49,共4页
:【目的】研究转HBx基因肝癌细胞增殖与拮抗凋亡特性 ,探讨肝癌恶性表型的分子基础。【方法】以携HBx基因重组逆转录病毒感染QGY770 1肝癌细胞 ,G418筛选 ,PCR与RT PCR鉴定 ;流式细胞仪 (FCM)检测细胞增殖周期 ;用阿霉素诱导细胞凋亡 ,... :【目的】研究转HBx基因肝癌细胞增殖与拮抗凋亡特性 ,探讨肝癌恶性表型的分子基础。【方法】以携HBx基因重组逆转录病毒感染QGY770 1肝癌细胞 ,G418筛选 ,PCR与RT PCR鉴定 ;流式细胞仪 (FCM)检测细胞增殖周期 ;用阿霉素诱导细胞凋亡 ,FCM定量检测。【结果】QGY770 1肝癌细胞经HBx基因转染后 ,G418筛选 4～ 6周获阳性克隆株QGY/HBx ,PCR与RT -PCR分别证实细胞有HBx基因整合与HBxmRNA表达 ;细胞周期分析结果表明 ,QGY/HBx细胞的细胞周期进程明显加快 ,并可明显抵制阿霉素的凋亡诱导作用。【结论】HBx基因可加速肝癌细胞周期的进程 ,并增强肝癌细胞的抗凋亡能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因 HBx 细胞周期 凋亡 转基因
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日本血吸虫大陆株脂肪酸结合蛋白SjFABPc编码区基因的体外扩增及克隆 被引量：8
10
作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 李焱 刘彦文 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第3期33-36,共4页
目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）抗原的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质位pcDNA3中，为进一步对其进行核酸疫苗研究奠定基础。方法特定寡核苷酸引物的设计与合成；异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离日本... 目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）抗原的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质位pcDNA3中，为进一步对其进行核酸疫苗研究奠定基础。方法特定寡核苷酸引物的设计与合成；异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离日本血吸虫成虫RNA，RT－PCR扩增目的基因；分子克隆常规操作将扩增产物亚克隆至中间载体pUC18中，然后走向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT－PCR特异性扩增出SjFABPc编码区基因序列，其片段大小为440hp；经酶切、PCR鉴定表明所构建的质粒pUC－SjFABPc和pCD－SjFABPc中含有所扩增的基因序列。结论RT－PCR扩增的SjFABPc抗原编码区基因序列与预期长度相村合；成功地构建了含目的基因的真核表达质粒pCD－SjFABPc。从而，为进一步对其进行DNA免疫系列研究工作奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 RT-PCR 基因克隆
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日本血吸虫(中国大陆株)若干酶类基因的发现 被引量：6
11
作者 李晖婷 余新炳 +3 位作者 吴忠道 李焱 包俊英 邵筱 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期46-48,共3页
目的　运用表达序列标签 (EST)技术 ,从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)cDNA文库中分离、鉴定出有潜在应用价值的血吸虫基因序列。方法　应用EST方法 ,从日本血吸虫cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆 ,PCR扩增出插入片段 ,并进行... 目的　运用表达序列标签 (EST)技术 ,从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)cDNA文库中分离、鉴定出有潜在应用价值的血吸虫基因序列。方法　应用EST方法 ,从日本血吸虫cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆 ,PCR扩增出插入片段 ,并进行PCR产物直接测序 ;将获得的序列资料与EBI和GenBank进行BLASTn和BLASTx同源性检索 ,对可能的酶类基因序列进行分析。结论　采用EST策略 ,可获得日本血吸虫 (中国大陆株 )若干酶类基因序列EST ,为进一步的cDNA全长扩增和克隆奠定基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 中国大陆株 CDNA文库 表达序列标签 酶 糖酵解酶
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日本血吸虫(中国大陆株)成虫表达序列标签的获取及新基因的发现 被引量：7
12
作者 卞国武 余新炳 +3 位作者 吴忠道 徐劲 单志新 马长玲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期36-39,共4页
目的　运用表达序列标签 (ExpressedSequenceTag ,EST)技术快速、经济地发现日本血吸虫 (中国大陆株 )新基因。方法　随机挑取日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA文库单个重组克隆进行部分测序以获得EST ,获得的EST通过BLAST程序同EMBL... 目的　运用表达序列标签 (ExpressedSequenceTag ,EST)技术快速、经济地发现日本血吸虫 (中国大陆株 )新基因。方法　随机挑取日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA文库单个重组克隆进行部分测序以获得EST ,获得的EST通过BLAST程序同EMBL寄生虫数据库和GenBank数据库进行比较及同源性分析。结果　本研究共随机挑取日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA文库单个重组克隆 2 0 0个 ,获得了 76个有EST价值的序列 ,其中 7.9%为日本血吸虫已知序列 ,5 .3 %为日本血吸虫同源序列。曼氏血吸虫或其他生物的同源序列占有EST价值的序列的 2 2 .4 % ,未知序列占 5 9.2 %。在获得的76个有EST价值的序列中 ,66个成功在GenBankdbEST中登录。通过同源性分析 ,发现了一些令人感兴趣的基因。结论　EST方法有助于快速、经济地发现日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫新基因。 展开更多
关键词 日本血吸虫 CDNA文库 表达序列标签 EST
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细粒棘球蚴全长cDNA文库的构建及初步鉴定 被引量：9
13
作者 陆家海 陈慧红 +2 位作者 余新炳 冯德元 郭中敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期31-33,共3页
目的　分离目的基因构建cDNA文库的经典方法繁琐且不易得到全长cDNA(3’和 5’端 ,尤其是基因的 5’非翻译区 )。本研究通过构建细粒棘球蚴全长cDNA文库 ,筛选全长目的基因 ,研究其结构和功能。方法　采用TRIZOL试剂提取E .granulosus总... 目的　分离目的基因构建cDNA文库的经典方法繁琐且不易得到全长cDNA(3’和 5’端 ,尤其是基因的 5’非翻译区 )。本研究通过构建细粒棘球蚴全长cDNA文库 ,筛选全长目的基因 ,研究其结构和功能。方法　采用TRIZOL试剂提取E .granulosus总RNA ,用ClonTech公司的SMARTTMcDNA文库构建试剂盒构建E .granulosus原头节全长cDNA文库 ,文库的包装使用EICENTERTECHNOLOGIES公司提供的包装蛋白。结果与结论　成功构建细粒棘球蚴全长cDNA文库 ,文库滴度为 1.4× 10 7pfu/ml。文库的重组效率达到 99%以上 ,插入片段长度约为 1.1kb。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 全长CDNA文库 基因构建
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日本血吸虫新基因Sj Dad1的DNA免疫动物保护性实验研究 被引量：5
14
作者 李焱 余新炳 +3 位作者 吴忠道 孟玮 陈慧红 彭寨玉 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期44-46,共3页
目的　观察日本血吸虫未知基因SjDad1的DNA免疫保护动物实验效果 ,探讨其作为疫苗候选分子的可能性。方法　构建SjDad1的真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1,两次质粒DNA免疫BALB/c小鼠后给予小鼠日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,设置生理盐水对照... 目的　观察日本血吸虫未知基因SjDad1的DNA免疫保护动物实验效果 ,探讨其作为疫苗候选分子的可能性。方法　构建SjDad1的真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1,两次质粒DNA免疫BALB/c小鼠后给予小鼠日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,设置生理盐水对照组 (NS)和pEGFP -N3 对照组 ,攻击感染后 4 2天处死小鼠 ,计算减虫率和减卵率。结果　双酶切和PCR反应以及测序结果证实重组真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1构建成功 ,DNA免疫动物的保护实验证明 pEGFP -N3 -SjDad1与生理盐水组相比对小鼠没有显著的减虫作用 (P >0 0 5 ) ,减卵效果具有显著性意义 (P <0 0 1) ,减卵率是6 5 74 %。结论　日本血吸虫 pEGFP -N3 -SjDad1有抗血吸虫生殖作用 ,具有疫苗研究开发价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗凋亡因子1 DNA免疫 动物实验 免疫保护
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地里纤恙螨红、白体色体内恙虫病立克次体的聚合酶链反应技术检测及其传病作用 被引量：10
15
作者 黎家灿 郑小英 +1 位作者 倪宏 陈添胜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期2-3,共2页
本文应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了红、白体色地里纤恙螨亲代成虫及子代幼虫体内恙虫病立克次体ＤＮＡ的动态变化，结果表明：恙虫病立克次体能在红、白体色恙螨体内生长繁殖，且至少持续２７０天，并可以经卵传递给子代。叮咬... 本文应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了红、白体色地里纤恙螨亲代成虫及子代幼虫体内恙虫病立克次体ＤＮＡ的动态变化，结果表明：恙虫病立克次体能在红、白体色恙螨体内生长繁殖，且至少持续２７０天，并可以经卵传递给子代。叮咬试验证明两体色恙螨幼虫均具有叮咬和传病能力。 展开更多
关键词 恙虫病 立克次体 聚合酶链反应
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日本血吸虫精氨酸酶编码基因cDNA的分离和序列分析 被引量：6
16
作者 吴忠道 郑亦男 +1 位作者 徐劲 余新炳 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期85-88,共4页
【目的】分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,S .j)新基因。【方法】应用免疫学方法筛选S .jcDNA文库获得阳性克隆 ;通过PCR直接序列测定技术 ,表达序列标签 (EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定 ;采用亚克隆技术及生... 【目的】分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,S .j)新基因。【方法】应用免疫学方法筛选S .jcDNA文库获得阳性克隆 ;通过PCR直接序列测定技术 ,表达序列标签 (EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定 ;采用亚克隆技术及生物信息学等技术 ,对获得的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。【结果】获得了一个含10 6 1bp外源插入片段的阳性克隆 ,其cDNA序列含有一个 840bp的阅读框 ,编码 2 79个氨基酸 ,属精氨酸酶家族 ,与国际蛋白质库中的酵母、蛙、人和大鼠精氨酸酶序列的同源性分别为 44 % ,5 0 % ,5 1% ,5 3%和 5 4%。【结论】获得了编码日本血吸虫精氨酸酶编码基因全长cDNA ,为日本血吸虫精氨酸酶基因功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 精氨酸酶 序列分析 CDNA 编码基因
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微孢子虫及人芽囊原虫混合感染与病原体形态观察 被引量：9
17
作者 张瑞琳 梁炽 林六文 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期17-19,共3页
目的鉴别微孢子虫和人芽囊原虫及其各发育阶段的形态学特征，探讨引起腹泻的相关病因。方法取病人排泄物涂片进行活体观察；将涂片固定染色制成永久性标本；对从排泄物中分离的脱落肠组织进行切片，采用光学显微镜和透射电镜观察及图像... 目的鉴别微孢子虫和人芽囊原虫及其各发育阶段的形态学特征，探讨引起腹泻的相关病因。方法取病人排泄物涂片进行活体观察；将涂片固定染色制成永久性标本；对从排泄物中分离的脱落肠组织进行切片，采用光学显微镜和透射电镜观察及图像分析。结果观察到该两种病原体不同发育阶段的外部形态特征及内部基本结构，初步确定了其属性及寄生关系。结论微孢子虫和人芽囊原虫的不同发育阶段寄生于肠组织，其所造成的肠组织坏死是引起慢性腹泻的主要原因。 展开更多
关键词 微孢子虫 人芽囊原虫 慢性 腹泻 混合感染
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抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建和鉴定 被引量：5
18
作者 陈代雄 俞慕华 +3 位作者 梁瑜 詹希美 何蔼 王轶 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期33-35,共3页
目的　构建抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,以探索制备日本血吸虫病诊断用单克隆抗体的新方法。方法　用文库构建试剂盒 ,以日本血吸虫感染小鼠脾脏为材料 ,建立噬菌体抗体文库 ,并对其进行鉴定。结果　构建完成了一滴度为6 42× 10 ... 目的　构建抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,以探索制备日本血吸虫病诊断用单克隆抗体的新方法。方法　用文库构建试剂盒 ,以日本血吸虫感染小鼠脾脏为材料 ,建立噬菌体抗体文库 ,并对其进行鉴定。结果　构建完成了一滴度为6 42× 10 10 cfu/ml的噬菌体抗体库。结论　日本血吸虫噬菌体抗体库的建立为对文库进行进一步的筛选。 展开更多
关键词 日本血吸虫 噬菌体抗体库 构建 鉴定
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应用胶体金免疫层析法快速检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原研究 被引量：7
19
作者 徐劲 陆家海 +1 位作者 方建民 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期26-27,共2页
目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克... 目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线。结果 ICT测试条只与HRPⅡ抗原有特异性反应 ,与间日疟无交叉反应。与显微镜检比较特异性为 10 0 %。用该法检测体外培养的恶性疟原虫HRPⅡ抗原 ,其灵敏度在体外培养实验中 ,当红细胞感染虫体为 1%时使用 5 μl血稀释 10 0倍仍能检测出来。该法检测 30份用病原学确诊的恶性疟原虫和 2 0份间日疟标本 ,检出率为 10 0 % ,与间日疟无交叉反应。结论 ICT检测血中恶性疟原虫中HRPⅡ抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 HRPⅡ抗原 胶体金免疫层析法
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含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(SjFABPc)基因DNA重组质粒pCD-SjFABPc在哺乳动物细胞中的表达 被引量：6
20
作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 吴忠道 周俊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期39-42,共4页
目的　观察裸DNA重组质粒pCD -SjFABPc在体外转染HepG2细胞以及质粒DNA免疫鼠肌组织中的表达 ,为进一步应用该质粒进行DNA免疫实验奠定基础。方法　用脂质体介导DNA转染法将pCD -SjFABPc转染贴壁细胞HepG2 ,G418加压筛选获得阳性克隆细... 目的　观察裸DNA重组质粒pCD -SjFABPc在体外转染HepG2细胞以及质粒DNA免疫鼠肌组织中的表达 ,为进一步应用该质粒进行DNA免疫实验奠定基础。方法　用脂质体介导DNA转染法将pCD -SjFABPc转染贴壁细胞HepG2 ,G418加压筛选获得阳性克隆细胞并传代培养 ,SDS -PAGE及Western -blot鉴定目的基因在HepG2细胞中的表达 ;将pCD -SjFABPc质粒肌注免疫BALB/c小鼠 ,于 6 5d后取注射部位的肌组织约 0 3cm3 大小 ,经固定、包埋、切片 ,免疫酶组织化学染色 ,显微照相记录。结果　在被转染的HepG2细胞裂解样品中 ,呈现一分子量约 14kDa大小且能被感染兔血清特异识别的条带 ;免疫组化结果显示免疫组切片标本中有特异性阳性反应。结论　pCD 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 重组质粒 DNA
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