牛磺酸对大鼠力竭运动后肝组织自由基损伤的对抗作用 被引量：12

1

作者 魏源 王翔 +4 位作者 李良鸣 罗桂珍 王革 银巍 林石梅 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期213-214,共2页

以大鼠力竭运动为模型 ,观察牛磺酸对肝脏组织丙二醛 (MDA)含量、谷胱甘肽 (GSH)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)和血清谷丙转氨酶 (GPT)的影响。结果显示 :力竭运动后大鼠肝组织MDA含量和血清GPT活性显著上升 ,肝组织GSH含量和SOD活性显著... 以大鼠力竭运动为模型 ,观察牛磺酸对肝脏组织丙二醛 (MDA)含量、谷胱甘肽 (GSH)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)和血清谷丙转氨酶 (GPT)的影响。结果显示 :力竭运动后大鼠肝组织MDA含量和血清GPT活性显著上升 ,肝组织GSH含量和SOD活性显著下降 ,而牛磺酸可显著地抑制力竭运动后大鼠肝组织MDA和血清GPT的升高以及肝组织中GSH含量和SOD活性的下降。提示牛磺酸对肝组织具有直接抗氧化损伤的作用。 展开更多

关键词 牛磺酸 力竭运动 丙二醛 谷胱甘肽 超氧化物歧化酶 谷丙转氨酶 实验研究

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胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨 被引量：17

2

作者 刘兰英 杨琨 +6 位作者 朱振宇 刘玉川 余细勇 银巍 汤建 马涧泉 顾军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期389-392,共4页

目的：用胚胎干细胞（ＥＳＣ）体外诱导分化为心肌细胞，从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法：（１）胚胎干细胞的培养。（２）胚胎于细胞的分化培养。（３）被分化的心肌细胞鉴定：ＲＮＡ的 提取；心脏特异性引物的... 目的：用胚胎干细胞（ＥＳＣ）体外诱导分化为心肌细胞，从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法：（１）胚胎干细胞的培养。（２）胚胎于细胞的分化培养。（３）被分化的心肌细胞鉴定：ＲＮＡ的 提取；心脏特异性引物的合成和ＲＴ－ＰＣＲ反应；探针标记、纯化和比放射活性测定；ＲＮＡ斑点杂交。结果：用最 适条件培养液对ＦＳＣ定向诱导分化，可使８０％以上的ＥＳＣ分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录ＰＣＲ和斑点杂交的结果显示：心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论：胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同，对ＥＳ细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用２ｎｍｏｌ／Ｌ维甲酸、０．６％二甲基亚砜和２０％胎牛血清组成的条件培养液。 展开更多

关键词 胚胎 干细胞 基因表达 心肌细胞 ESC

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番茄红素与癌 被引量：18

3

作者 谭新平 王银娜 刘昕 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2001年第4期71-75,共5页

番茄红素是主要的类胡萝卜素之一。最近的科学研究发现 ,它对人类健康有重要的作用。本文介绍了番茄红素的食物来源、生物合成、物理化学特性和生理活性 ,它的抗癌效果与其抗氧化活性有关。很多的流行病学研究证明 ,番茄红素对一些类型... 番茄红素是主要的类胡萝卜素之一。最近的科学研究发现 ,它对人类健康有重要的作用。本文介绍了番茄红素的食物来源、生物合成、物理化学特性和生理活性 ,它的抗癌效果与其抗氧化活性有关。很多的流行病学研究证明 ,番茄红素对一些类型的癌有预防效果 ,如前列腺癌和消化道癌。体内和体外的癌细胞培养研究也支持这一结论。因此 ,具有广泛用途的番茄红素 。 展开更多

关键词 类胡萝卜素 番茄红素 癌症 抗氧化剂 食品 抗癌作用

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人ureb1在大肠杆菌中高效表达及其抗体的制备 被引量：5

4

作者 明文玉 林学颜 +1 位作者 银巍 顾军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期228-231,共4页

目的 :构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒 ,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法 :用XhoI/NotI从pGU 2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX 4T 2的XhoI/NotI大片段连接 ,构建表达GST hureb1融合蛋白的重组载体。转化... 目的 :构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒 ,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法 :用XhoI/NotI从pGU 2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX 4T 2的XhoI/NotI大片段连接 ,构建表达GST hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达。以粗制的GST hureb1融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠 ,制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体 ,采用WesternBlot进行特异性鉴定。结果 :构建了高效表达GST hureb1融合蛋白的原核表达载体 ,融合蛋白的表达量占菌体蛋白质总量的 33 45 %。以大肠杆菌表达的GST hureb1融合蛋白免疫动物制备了高滴度、高特异性的抗hureb1的抗体。结论 :利用重组GST hureb1融合蛋白免疫动物可获得高滴度的抗hureb1抗体。重组GST 展开更多

关键词 人ureb1 DNA 重组 原核表达载体 抗体 大肠杆菌 重组融合蛋白 质粒

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p53对肝癌细胞株Hep3BP-糖蛋白表达和耐药表型的影响 被引量：6

5

作者 韩雨生 梁力建 +1 位作者 黄洁夫 明文玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期139-142,共4页

目的 :验证野生型p5 3调节肝癌细胞P -糖蛋白 (P -gp)表达的设想。方法 :通过采用脂质体介导转染技术 ,将野生型p5 3cDNA导入一种p5 3和Rb基因缺失的肝癌细胞株Hep3B。经G4 18筛选获得稳定整合了野生型p5 3的克隆 (wt-p5 3 )和空载体克... 目的 :验证野生型p5 3调节肝癌细胞P -糖蛋白 (P -gp)表达的设想。方法 :通过采用脂质体介导转染技术 ,将野生型p5 3cDNA导入一种p5 3和Rb基因缺失的肝癌细胞株Hep3B。经G4 18筛选获得稳定整合了野生型p5 3的克隆 (wt-p5 3 )和空载体克隆 (pNeo)。采用Northern或Western印迹鉴定p5 3、p2 1和P -gp的表达 ;细胞毒性试验分析细胞对化疗药的敏感性 ;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的积累浓度。结果 :wt-p5 3细胞表达有转录活性的p5 3 ,p2 1waf1/cip1蛋白升高 ,P -gp表达降低 ,与pNeo细胞相比对阿霉素和丝裂霉素化疗敏感且阿霉素荧光量为pNeo细胞的 13倍。采用 0 .2mg/L阿霉素诱导这 2组转染细胞 ,wt-p5 3细胞出现明显的凋亡。结论 :在肝癌细胞Hep3B中重建野生型p5 3的活性由于降低P -gp的表达而对化疗药敏感。 展开更多

关键词 肝细胞瘤 基因 P53 糖蛋白类 药物疗法

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抗bFGF McAb制备、鉴定及轻链可变区基因克隆和序列分析 被引量：1

6

作者 崔蕴霞 王一飞 +4 位作者 林剑 任哲 银巍 宁波 冯炼强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期353-355,共3页

目的：以重组人碱性成纤包生长因子为抗原免疫小鼠，建立多株稳定分泌ｂＦＧＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。半对ｂＦＧＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）可变区基因进行扩增及序列分析。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法和免疫沉... 目的：以重组人碱性成纤包生长因子为抗原免疫小鼠，建立多株稳定分泌ｂＦＧＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。半对ｂＦＧＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）可变区基因进行扩增及序列分析。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法和免疫沉淀法对抗体特异性和ｌｇ类型进行鉴定，同时，应用分子生物学技术，对Ｖｋ基因的ＤＮＡ片段进行克隆，并对４ａ２Ｖｋ基因进行序列测定。结果：ｂＦＧＦ单克隆抗体可特异性结合人重组ｂＦＧＦ抗原。 展开更多

关键词 单克隆抗体 基因克隆 DNA序列分析 bFGF抗体

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人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究 被引量：1

7

作者 张革 柯细松 +3 位作者 丁爱玲 银巍 杨琨 朱振宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1370-1373,共4页

目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western ... 目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论 展开更多

关键词 内皮抑素 大肠杆菌 抗体 生物学活性 PCR法 实体瘤 单克隆抗体

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血浆中洛伐他汀含量测定的色谱-质谱法 被引量：2

8

作者 郑文晖 蔡葵花 吴耀良 《分析测试学报》 CAS CSCD 2000年第4期69-70,共2页

用色谱 -质谱法测定血浆中洛伐他汀 ,采用辛伐他汀作内标 ,以乙酸乙酯为萃取液 ,经真空抽干 ,定容进样。洛伐他汀质量浓度在0.36～48mg/L之间线性关系较好。该法灵敏度高 ,前处理简单快速 ,检出限达0.1mg/L ,相对标准偏差小于8.9 % ,回... 用色谱 -质谱法测定血浆中洛伐他汀 ,采用辛伐他汀作内标 ,以乙酸乙酯为萃取液 ,经真空抽干 ,定容进样。洛伐他汀质量浓度在0.36～48mg/L之间线性关系较好。该法灵敏度高 ,前处理简单快速 ,检出限达0.1mg/L ,相对标准偏差小于8.9 % ,回收率大于92 %。 展开更多

关键词 洛伐他汀 色谱-质谱法 血浆 降血脂药 测定

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含重组碱性成纤维细胞生长因子培养基中 3T3成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能性(英文) 被引量：2

9

作者 王一飞 戴云 +2 位作者 刘杰生 林剑 崔蕴霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期97-101,共5页

目的 :重组碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对培养条件下 3T3成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能性研究。方法 :采用Giemsa染色和MTT检测法 ,经过电镜扫描 ,分段对比观察 ,研究 3T3细胞在血纤维蛋白凝块上的生长情况。结果 :rhbFG... 目的 :重组碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对培养条件下 3T3成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能性研究。方法 :采用Giemsa染色和MTT检测法 ,经过电镜扫描 ,分段对比观察 ,研究 3T3细胞在血纤维蛋白凝块上的生长情况。结果 :rhbFGF促进细胞生长并维持细胞存活的最佳浓度是 10 0ng/mL ,在含有 10 0ng/mL的低血清培养基中细胞可在血纤维蛋白凝块上生长。经 48h培养以后仍有大量的细胞存活。结论 :3T3成纤维细胞可在含有rhbFGF的低血清培养基上生长并存活 。 展开更多

关键词 成纤维细胞 RHBFGF 血纤维蛋白凝块 创伤愈合

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重组人碱性成纤维细胞生长因子对人羊水细胞及其它细胞的影响 被引量：1

10

作者 王一飞 崔蕴霞 +2 位作者 戴云 刘杰生 林剑 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期1013-1016,共4页

目的：探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子（ｒｈｂＦＧＦ） 对人羊水细胞及其它细胞的影响。方法：在低血清培养基培养条件下进行人羊水细胞及Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞，采用四甲基偶氮唑盐（ ＭＴＴ） 比色法和... 目的：探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子（ｒｈｂＦＧＦ） 对人羊水细胞及其它细胞的影响。方法：在低血清培养基培养条件下进行人羊水细胞及Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞，采用四甲基偶氮唑盐（ ＭＴＴ） 比色法和倒置显微镜观察ｒｈｂＦＧＦ 对人羊水细胞存活的影响。结果：人羊水细胞、Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞在０－４ ％ 胎牛血清培养基培养条件下，不同浓度的ｒｈｂＦＧＦ 对羊水细胞的作用存在相关性。结论：ｒｈｂＦＧＦ 能延长羊水细胞、Ｂａｌｂ／ｃ小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 展开更多

关键词 羊水 巨噬细胞 成纤维细胞 RHBFGF

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反义人IL-10和反义病毒性IL-10抗鼻咽癌细胞成瘤效应的研究 被引量：1

11

作者 陶剑平 杨琨 +1 位作者 朱振宇 林学颜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期543-545,549,共4页

目的:探讨反义人IL-10和反义病毒性IL-10抑制鼻咽癌细胞成瘤的效果。方法:扩增及克隆hIL-10 cDNA和 vIL-10基因,构建反义hIL-10和反义vIL-10双价真核表达载体pcDNA3/AS hIL-10+AS vIL-10,转染鼻咽癌细胞株SUNE。将转染阳性的SUNE细胞克... 目的:探讨反义人IL-10和反义病毒性IL-10抑制鼻咽癌细胞成瘤的效果。方法:扩增及克隆hIL-10 cDNA和 vIL-10基因,构建反义hIL-10和反义vIL-10双价真核表达载体pcDNA3/AS hIL-10+AS vIL-10,转染鼻咽癌细胞株SUNE。将转染阳性的SUNE细胞克隆和未转染的SUNE细胞接种SCID小鼠和经健康人外周血白细胞免疫重建的SCID小鼠（hu-PBL-SCID鼠）,观察成瘤效应。结果:ELISA法测得未转染SUNE细胞培养上清液中IL-10和vIL-10的总含量为242±23pg/ml,而转染阳性的SUNE细胞培养上清液中hIL-10和vIL-10的总含量仅为22±6pg/ml。在SCID鼠体内,vIL-10和hIL-10的表达与否,并不影响鼻咽癌细胞的成瘤活性,但在hu-PBL-SCID鼠体内,抑制vIL-10和hIL-10的表达则可明显抑制鼻咽癌细胞的成瘤作用。结论:反义人IL-10和反义病毒性IL-10可显著抑制鼻咽癌细胞在血hu-PBL-SCID鼠体内的成瘤作用,鼻咽癌组织表达vIL-10和hIL-10的确与鼻咽癌免疫耐受有关。 展开更多

关键词 反义人IL-10 反义病毒性IL-10 鼻咽癌 成瘤效应

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人瘦素基因克隆与序列测定 被引量：3

12

作者 徐明彤 吕凌 +2 位作者 钟光恕 程桦 傅祖植 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第2期104-107,共4页

【目的】构建人瘦素基因cDNA克隆 ,并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人瘦素基因cDNA ,获得片段 (6 40bp)连接至 pUC19载体 ,并转化大肠杆菌DH5α。以末端终止法进行序列测定。【结果】所克隆的人瘦素cDNA含全长的人瘦... 【目的】构建人瘦素基因cDNA克隆 ,并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人瘦素基因cDNA ,获得片段 (6 40bp)连接至 pUC19载体 ,并转化大肠杆菌DH5α。以末端终止法进行序列测定。【结果】所克隆的人瘦素cDNA含全长的人瘦素基因编码区 ,仅 2 87位的腺苷酸被鸟苷酸代替 ,导致 96位编码谷氨酰胺的密码子CAA改变为编码精氨酸的CGA ,其意义尚待阐明。【结论】以逆转录聚合酶链反应方法成功地构建了人瘦素基因cDNA克隆。 展开更多

关键词 瘦素 DNA序列测定 基因克隆

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HCV5’－NCR序列克隆和转录重组质粒构建 被引量：2

13

作者 吕凌 王斌 《中山医科大学学报》 CSCD 1996年第3期166-170,共5页

选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ... 选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ－ＮＣ重组质粒。对ｐＵＨＣＶ－ＮＣ分别或混合应用ＨＣＶ序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行ＰＣＲ扩增，所用产物分子量均同预期相符；酶切分析查出ＨＣＶ基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源ＮｃｏＩ切点也存在；证实ｐＵＨＣＶ－ＮＣ中克隆基因是ＨＣＶ的５’ＮＣＲ序列且插入方向为反向。应用ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双切出克隆ＨＣＶ基因，粘端插入ｐＳＰ７２的多克隆位点，均建了ｐＳＨＣＶ－ＮＣ转录重组体，对之进行了ＰＣＲ和酶切鉴定。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 基因 克隆 聚合酶链反应

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人CD23基因的亚克隆与部分序列测定

14

作者 王斌 曹丽萍 +1 位作者 涂裕英 吕凌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期340-342,共3页

已构建的ＣＤ２３ｃＤＮＡ全基因克隆ｐＢＣＤ９７６，以ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ双酶切，回收ＣＤ２３全基因，定向插入ｐＵＣ１８载体，构建ｐＵＣ１８－ＣＤ２３全基因重组体（ｐＵＣＤ９７６）。进一步利用该基因中第３９９位的Ｈｉ... 已构建的ＣＤ２３ｃＤＮＡ全基因克隆ｐＢＣＤ９７６，以ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ双酶切，回收ＣＤ２３全基因，定向插入ｐＵＣ１８载体，构建ｐＵＣ１８－ＣＤ２３全基因重组体（ｐＵＣＤ９７６）。进一步利用该基因中第３９９位的ＨｉｎｄⅡ酶切点，在ｐＵＣ１８中构建了ＣＤ２３Ｎ端４０３ｂｐ和Ｃ端６０７ｂｐ的二个亚克隆，分别称为ｐＵＣＤ４０３Ｎ和ｐＵＣＤ６０７Ｃ。并对ｐＵＣＤ６０７Ｃ进行测序，最终确认其为ＣＤ２３基因。这将为ＣＤ２３的进一步深入研究提供可靠的物质基础。 展开更多

关键词 CD23 序列测定 基因克隆

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人类心脏发育相关基因的初步筛选

15

作者 刘兰英 顾军 +1 位作者 汤建 马涧泉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期784-788,共5页

目的：从人胎儿心脏ｃＤＮＡ文库和成人心脏ｃＤＮＡ文库，通过差减杂交，筛选心脏发育相关基因。方法：（１）用２３周和２７周的人胎心脏组织构建２个ｃＤＮＡ文库，分别命名为ｉｂＦ和ＬｉｂＳ，用成人心脏构建了１个ｃＤＮＡ文库，... 目的：从人胎儿心脏ｃＤＮＡ文库和成人心脏ｃＤＮＡ文库，通过差减杂交，筛选心脏发育相关基因。方法：（１）用２３周和２７周的人胎心脏组织构建２个ｃＤＮＡ文库，分别命名为ｉｂＦ和ＬｉｂＳ，用成人心脏构建了１个ｃＤＮＡ文库，命名为ＬｉｂＡ。（２）探针的合成、纯化和比放射活性测定。（３）差减杂效和牧民性探针的富集。（４）菌落原位和。（５）差减阳性克隆的斑点杂交。 展开更多

关键词 RNA 信使 先天性心脏病 原位杂交 CDNA文库

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HCVC基因部分序列的克隆测序

16

作者 吕凌 王斌 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1996年第S1期11-15,共5页

选取５株ＨＣＶ共有序列合成一时５’端加端引物。上游加端为ＥｃｏＲⅠ切点，下游加端为ＢａｍＨＩ切点。以ＲＴ－ＰＣＲ扩增一长为５７８ｂｐ的ｃＤＮＡ作目的基因，相应酶切后，反向插入ＰＵＣ１８的多克隆位点，构建ｐＵＨＣ－Ｃ重... 选取５株ＨＣＶ共有序列合成一时５’端加端引物。上游加端为ＥｃｏＲⅠ切点，下游加端为ＢａｍＨＩ切点。以ＲＴ－ＰＣＲ扩增一长为５７８ｂｐ的ｃＤＮＡ作目的基因，相应酶切后，反向插入ＰＵＣ１８的多克隆位点，构建ｐＵＨＣ－Ｃ重组体。分别或混合应用ＨＣＶ特异内外引物和ｐＵＣ特异通用引物以ＰＣＲ扩增重组体，扩增产物分子片段均同预期一致。测序表明克隆基因与ＨＣＶ－ＣＨＮ最同源，在所测ＣＥ４９７个核苷酸及由之推导的１６０个氨基酸区域内。其核苷酸与氨基酸同源性都是９７．５％。 展开更多

关键词 克陲 分子 序列分析 DNA 肝炎病毒组 丙型 聚合酶链反应isthebomolgyoftheclo

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HCV 定量 RT-PCR 竞争性参比标准的构建

17

作者 吕凌 王斌 《中山医科大学学报》 CSCD 1997年第2期151-153,共3页

将克隆的ＨＣＶ５’ＮＣＲ序列反向插入ｐＳＰ７２的ＥｃｏＲＶ切点，构建一种能转录ＨＣＶ－ＲＮＡ的质粒ｐＳｎｃ－２。以ＲＴ－ＰＣＲ从抗ＨＥＶＩｇＭ阳性病人血浆中扩增一段２３８ｂｐ的ＨＣＶ－ｃＤＮＡ，反向插入ｐＳｎｃ－２中... 将克隆的ＨＣＶ５’ＮＣＲ序列反向插入ｐＳＰ７２的ＥｃｏＲＶ切点，构建一种能转录ＨＣＶ－ＲＮＡ的质粒ｐＳｎｃ－２。以ＲＴ－ＰＣＲ从抗ＨＥＶＩｇＭ阳性病人血浆中扩增一段２３８ｂｐ的ＨＣＶ－ｃＤＮＡ，反向插入ｐＳｎｃ－２中克隆的５’ＮＣＲ序列的ＮｃｏⅠ切点，构建插入突变型ＨＣＶ－ｃＤＮＡ重组体ｐＳｎｃ－ｅ。应用限制性酶切和ＰＣＲ对这两种重组质粒进行了鉴定，为ＨＣＶ－ＲＮＡ的定量ＰＣＲ提供有用的内参照模板。 展开更多

关键词 克隆 分子 聚合酶链反应 遗传学 丙型肝炎病毒

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PS-2基因的克隆及其在肝癌中的表达 被引量：1

18

作者 刘予川 明文玉 +4 位作者 银巍 刘兰英 马涧泉 汤健 顾军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第1期1-5,共5页

利用荧光差异显示技术比较了正常肝、肝硬化和肝癌组织 m RNA的表达 ,1 4个有差异的条带通过 Northern blot分析表明其中 9个为阳性 .令人感兴趣的是一个～ 5 0 0 bp的 c DNA片段 ,它在正常肝和肝硬化中低表达 ,在肝癌组织中高表达 .通... 利用荧光差异显示技术比较了正常肝、肝硬化和肝癌组织 m RNA的表达 ,1 4个有差异的条带通过 Northern blot分析表明其中 9个为阳性 .令人感兴趣的是一个～ 5 0 0 bp的 c DNA片段 ,它在正常肝和肝硬化中低表达 ,在肝癌组织中高表达 .通过测序 ,发现该片段与 PS- 2 ( presenilin- 2 )基因有 94 %的同源性 .PS- 2基因的突变与早发性阿尔茨海默氏症有关 ,但在肝癌发生中的作用未明 .也许 PS- 展开更多

关键词 肝癌 荧光差异显示 PS-2 基因克隆 基因表达

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细胞因子抗体及地塞米松对小鼠脓毒血症心肌及骨骼肌ATP含量的影响 被引量：1

19

作者 欧阳彬 王吉甫 +3 位作者 吴珏恒 陈敏英 刘仁斌 张清秀 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第6期442-444,447,共4页

【目的】观察和比较细胞因子抗体及地塞米松 (DXM )对脓毒血症心肌及骨骼肌细胞腺苷三磷酸 (ATP)含量的影响。【方法】制作小鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)脓毒血症模型 ,分别注射生理盐水、IL 1βAb、TNFαAb、IFNγAb、IL 1βAb +TNFαAb+IFN... 【目的】观察和比较细胞因子抗体及地塞米松 (DXM )对脓毒血症心肌及骨骼肌细胞腺苷三磷酸 (ATP)含量的影响。【方法】制作小鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)脓毒血症模型 ,分别注射生理盐水、IL 1βAb、TNFαAb、IFNγAb、IL 1βAb +TNFαAb+IFNγAb ,以及DXM ,观察各组小鼠心肌及骨骼肌ATP含量。【结果】①CLP模型心肌及骨骼肌细胞ATP含量严重减少。②IL 1βAb、TNFαAb使CLP模型小鼠心肌和或骨骼肌ATP含量轻度增加。而IL 1βAb +TNFαAb +IFNγAb ,以及DXM使CLP模型小鼠心肌及骨骼肌ATP含量增加较为明显 ,其中DXM使CLP模型心肌、骨骼肌细胞ATP含量增加 6～ 8倍。【结论】IFNγAb、DXM能显著改善脓毒血症小鼠心肌、骨骼肌细胞ATP储存。 展开更多

关键词 脓毒症 地塞米松/药理学 疾病模型 动物 腺苷三磷酸 抗体 白细胞介素 抗体 肿瘤坏死因子 抗体 干扰素

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逆转录聚合酶链反应检测广东地区高危人群庚型肝炎病毒RNA

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作者 傅涌水 吕凌 +1 位作者 周伯平 罗红涛 《实用医学杂志》 CAS 1998年第10期724-726,共3页

为了解广东地区庚型肝炎病毒（HGV）流行情况，为广东地区庚型肝炎的防治提供客观资料。以DNASIS软件对Genbank收录的3株HGV全序列：U44402、U45966和U36380进行同源性比较，取高度保守的5'非翻译区（5'UTR）设计合成两对套式... 为了解广东地区庚型肝炎病毒（HGV）流行情况，为广东地区庚型肝炎的防治提供客观资料。以DNASIS软件对Genbank收录的3株HGV全序列：U44402、U45966和U36380进行同源性比较，取高度保守的5'非翻译区（5'UTR）设计合成两对套式引物，建立检测HGVRNA的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，并对其中一输血后非甲-戊型肝炎血清PCR产物进行分子克隆与核苷酸序列分析以鉴定其特异性。结果表明，431例肝炎患者，185例静脉吸毒者及106例献血员HGVRNA阳性率分别为10．7％（46／431）、33．5%（62/185）和8．5％（9/106）。提示上述三种易感人群存在不同程度HGV感染。 展开更多

关键词 庚型肝炎病毒 聚合酶链反应 基因 序列分析

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