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超高效液相色谱-串联质谱法测定肉制品中的虾过敏原
被引量：
7
1
作者
刘彤彤
梁瑞强
+4 位作者
韩伟娜
罗娇依
曹进
孙姗姗
陈启
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2023年第6期292-299,共8页
目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法检测肉制品中虾过敏原的定量方法。方法:选取基质较为复杂的肉制品(西式火腿、香肠和肉丸)作为研究对象。样品经磷...
目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法检测肉制品中虾过敏原的定量方法。方法:选取基质较为复杂的肉制品(西式火腿、香肠和肉丸)作为研究对象。样品经磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer solution,PBS)超声提取30 min,离心(10000 r/min,15℃,10 min)后加入乙腈去除脂肪,取样液加入内标肽段(2.5μmol/L,40μL)和胰蛋白酶(1 mg/mL,10μL)在37℃下酶解16 h后上液质进行分析,样品经T3柱进行分离,0.1%甲酸-水溶液和乙腈梯度洗脱,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)正离子模式采集数据,内标法定量。结果:采用该方法测定肉制品中虾过敏原蛋白含量,其中定量肽段在0.001~2.0μmol/L范围内,线性关系良好,决定系数R2为1.0000,检出限为0.67 mg/kg,定量限为2.00 mg/kg;在三个加标浓度水平下,回收率为83.2%~104.5%,精密度为2.63%~7.92%。结论:该方法具有特异性强、灵敏度高和回收率好等优势,适用于肉制品中虾过敏原的筛查定量。
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关键词
超高效液相色谱-串联质谱法
肉制品
虾过敏原
特征肽段
原肌球蛋白
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职称材料
基于生物质谱的蛋白质组学分析大西洋鲑中生物标志性肽段及过敏原特异性肽段
被引量：
1
2
作者
罗娇依
郑越男
+3 位作者
刘彤彤
曹进
郭亚辉
孙姗姗
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期1-12,共12页
基于蛋白质组学自下而上研究策略,采用纳升液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用法(Nano-UHPLC-Q/Exactive-HRMS)和超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)筛选、鉴定大西洋鲑中生物标志性肽段和过敏原β-小清蛋白特异性肽段,...
基于蛋白质组学自下而上研究策略,采用纳升液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用法(Nano-UHPLC-Q/Exactive-HRMS)和超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)筛选、鉴定大西洋鲑中生物标志性肽段和过敏原β-小清蛋白特异性肽段,并提出了UHPLC-MS/MS测定其含量的方法。称取5 g处理好的样品,加入10 mL正己烷除脂,离心,于沉淀中加入5 mL磷酸盐缓冲溶液(提取剂),涡旋,于60℃水浴加热30 min,再用20 mL冷丙酮富集、纯化,得到的蛋白提取液经胰蛋白酶酶解后,采用Nano-UHPLC-Q/Exactive-HRMS初步筛选大西洋鲑生物标志性肽段与过敏原β-小清蛋白特异性肽段,用UHPLC-MS/MS对初筛的肽段进行多反应监测(MRM)模式验证。在酶解后的溶液中加入内标,采用UHPLC-MS/MS测定,内标法定量。结果显示:筛选出3条可用于定量的大西洋鲑生物标志性肽段VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER和1条过敏原β-小清蛋白特异性肽段TFFHTIGFASK;VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER标准曲线的线性范围在5.00μmol·L^(-1)以内,TFFHTIGFASK标准曲线的线性范围在10.00μmol·L^(-1)以内,检出限(3S/N)为0.32~1.55μg·g^(-1);空白样品中4条肽段的加标回收率为90.2%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.5%~4.6%;方法用于测定大西洋鲑贮存过程中VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER、TFFHTIGFASK的含量,LTEIQSLER和TFFHTIGFASK含量没有发生明显变化,而VAVNVEETK和VAPLSEDFK含量随着贮存天数的延长逐渐降低,其中VAPLSEDFK适用于大西洋鲑新鲜度评价。
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关键词
大西洋鲑
生物标志性肽段
β-小清蛋白
特异性肽段
蛋白质组学
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职称材料
题名
超高效液相色谱-串联质谱法测定肉制品中的虾过敏原
被引量：
7
1
作者
刘彤彤
梁瑞强
韩伟娜
罗娇依
曹进
孙姗姗
陈启
机构
中国食品药品检定研究院
浙江树人学院
出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2023年第6期292-299,共8页
基金
中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金(2018C1)。
文摘
目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法检测肉制品中虾过敏原的定量方法。方法:选取基质较为复杂的肉制品(西式火腿、香肠和肉丸)作为研究对象。样品经磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer solution,PBS)超声提取30 min,离心(10000 r/min,15℃,10 min)后加入乙腈去除脂肪,取样液加入内标肽段(2.5μmol/L,40μL)和胰蛋白酶(1 mg/mL,10μL)在37℃下酶解16 h后上液质进行分析,样品经T3柱进行分离,0.1%甲酸-水溶液和乙腈梯度洗脱,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)正离子模式采集数据,内标法定量。结果:采用该方法测定肉制品中虾过敏原蛋白含量,其中定量肽段在0.001~2.0μmol/L范围内,线性关系良好,决定系数R2为1.0000,检出限为0.67 mg/kg,定量限为2.00 mg/kg;在三个加标浓度水平下,回收率为83.2%~104.5%,精密度为2.63%~7.92%。结论:该方法具有特异性强、灵敏度高和回收率好等优势,适用于肉制品中虾过敏原的筛查定量。
关键词
超高效液相色谱-串联质谱法
肉制品
虾过敏原
特征肽段
原肌球蛋白
Keywords
ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS)
meat products
shrimp allergens
signature peptide
tropomyosin
分类号
TS251.65 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
基于生物质谱的蛋白质组学分析大西洋鲑中生物标志性肽段及过敏原特异性肽段
被引量：
1
2
作者
罗娇依
郑越男
刘彤彤
曹进
郭亚辉
孙姗姗
机构
中国食品药品检定研究院
国家
市场监管
重点
实验室
(
食品质量
与安全
)
松滋市公共检验检测中心
江南大学
食品
学院
食品
科学与技术
国家
重点
实验室
出处
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期1-12,共12页
基金
中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金(2020C4)。
文摘
基于蛋白质组学自下而上研究策略,采用纳升液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用法(Nano-UHPLC-Q/Exactive-HRMS)和超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)筛选、鉴定大西洋鲑中生物标志性肽段和过敏原β-小清蛋白特异性肽段,并提出了UHPLC-MS/MS测定其含量的方法。称取5 g处理好的样品,加入10 mL正己烷除脂,离心,于沉淀中加入5 mL磷酸盐缓冲溶液(提取剂),涡旋,于60℃水浴加热30 min,再用20 mL冷丙酮富集、纯化,得到的蛋白提取液经胰蛋白酶酶解后,采用Nano-UHPLC-Q/Exactive-HRMS初步筛选大西洋鲑生物标志性肽段与过敏原β-小清蛋白特异性肽段,用UHPLC-MS/MS对初筛的肽段进行多反应监测(MRM)模式验证。在酶解后的溶液中加入内标,采用UHPLC-MS/MS测定,内标法定量。结果显示:筛选出3条可用于定量的大西洋鲑生物标志性肽段VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER和1条过敏原β-小清蛋白特异性肽段TFFHTIGFASK;VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER标准曲线的线性范围在5.00μmol·L^(-1)以内,TFFHTIGFASK标准曲线的线性范围在10.00μmol·L^(-1)以内,检出限(3S/N)为0.32~1.55μg·g^(-1);空白样品中4条肽段的加标回收率为90.2%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.5%~4.6%;方法用于测定大西洋鲑贮存过程中VAVNVEETK、VAPLSEDFK、LTEIQSLER、TFFHTIGFASK的含量,LTEIQSLER和TFFHTIGFASK含量没有发生明显变化,而VAVNVEETK和VAPLSEDFK含量随着贮存天数的延长逐渐降低,其中VAPLSEDFK适用于大西洋鲑新鲜度评价。
关键词
大西洋鲑
生物标志性肽段
β-小清蛋白
特异性肽段
蛋白质组学
Keywords
Salmo salar
biomarker peptide
β-parvalbumin
specific peptide
proteomics
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
超高效液相色谱-串联质谱法测定肉制品中的虾过敏原
刘彤彤
梁瑞强
韩伟娜
罗娇依
曹进
孙姗姗
陈启
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2023
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于生物质谱的蛋白质组学分析大西洋鲑中生物标志性肽段及过敏原特异性肽段
罗娇依
郑越男
刘彤彤
曹进
郭亚辉
孙姗姗
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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