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长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：8: 1; 作者王吉卫礼 +5 位作者付瑞李晓波冯育芳王淑菁岳秉飞贺争鸣《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第2期58-63,共6页; 目的建立长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测。方法根据已发表的小鼠肝炎病毒(MHV)S基因序列,设计合成引物。提取MHV细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感... 展开更多; 关键词小鼠肝炎病毒反转录聚合酶链式反应长爪沙鼠小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定被引量：1: 2; 作者王吉付瑞 +5 位作者李晓波王淑菁巩薇卫礼岳秉飞贺争鸣《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期57-62,共6页; 目的了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点。方法猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴... 展开更多; 关键词乙型脑炎病毒分离鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用被引量：13: 3; 作者王吉卫礼 +5 位作者付瑞李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第12期47-54,共8页; 目的：建立猫疱疹病毒I型（ FHV-1）实时荧光定量PCR检测方法，应用于实验用猫及临床患猫FHV-1的快速检测。方法根据已发表的FHV-1 TK基因序列设计特异引物和TaqMan探针，使用分子生物学方法制备质粒标准品，建立FHV-1实时荧光定量PCR... 展开更多; 关键词猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR 猫; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用被引量：6: 4; 作者王吉付瑞 +7 位作者李晓波王淑菁王莎莎李威秦骁巩薇岳秉飞贺争鸣《中国比较医学杂志》北大核心 2017年第11期68-74,共7页; 目的建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BVDV 1型和BVDV 2型包含5’UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDV RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行方... 展开更多; 关键词牛病毒性腹泻病毒 RT-PCR 牛源样本; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：8: 1; 作者王吉卫礼付瑞李晓波冯育芳王淑菁岳秉飞贺争鸣; 机构中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第2期58-63,共6页; 基金实验动物新品种的种群建立与质量标准化研究(国家科技支撑计划项目:2011BAI15B01); 文摘目的建立长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测。方法根据已发表的小鼠肝炎病毒(MHV)S基因序列,设计合成引物。提取MHV细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感性、稳定性、重复性试验。并对65只长爪沙鼠及12只小鼠进行检测。结果建立的MHV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以MHV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为3.1 pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-3/mL。65只沙鼠经RT-PCR检测,均为阴性,12只小鼠经RT-PCR检测,有3只MHV阳性,测序结果与Genbank中MHV核酸序列同源性均为97%。结论建立的长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测。; 关键词小鼠肝炎病毒反转录聚合酶链式反应长爪沙鼠小鼠; Keywords Mouse Hepatitis Virus RT-PCR Mongolian gerbil Mouse; 分类号 R33 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定被引量：1: 2; 作者王吉付瑞李晓波王淑菁巩薇卫礼岳秉飞贺争鸣; 机构中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期57-62,共6页; 文摘目的了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点。方法猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴定。结果 25只猪脑组织接种BHK_(21)细胞,有3个组织处理液能使BHK21细胞发生圆缩、集聚等病变;3个组织接种的BHK_(21)病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生强绿色荧光反应;中和实验结果显示3株新分离株中和效价均为1∶64;电镜下可见直径40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR产物测序结果与疫苗株E区段核苷酸比较同源性均为95%;3株新分离株均为GIII型乙脑病毒。结论实验表明小型猪场存在乙型脑炎病毒感染,为GIII型乙型脑炎病毒。; 关键词乙型脑炎病毒分离鉴定; Keywords Japanese encephalitis virus JEV Isolation Identification; 分类号 R-33 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用被引量：13: 3; 作者王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣; 机构中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第12期47-54,共8页; 基金实验动物质量检测关键技术研究(国家科技支撑计划项目:2013BAK11B01); 文摘目的：建立猫疱疹病毒I型（ FHV-1）实时荧光定量PCR检测方法，应用于实验用猫及临床患猫FHV-1的快速检测。方法根据已发表的FHV-1 TK基因序列设计特异引物和TaqMan探针，使用分子生物学方法制备质粒标准品，建立FHV-1实时荧光定量PCR方法，并对方法的线性、特异性、敏感性、及稳定性等进行测定。用建立的方法对48份猫临床样品进行检测。结果成功建立FHV-1实时荧光定量PCR方法；该方法的线性范围为（1×102～1×109）copies／μL，与单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）、犬疱疹病毒（CHV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猫细小病毒（ FPV）均无交叉反应，检测灵敏度可达到10 copies／μL。批内变异系数均小于5％。应用该方法从48份猫临床样本中检测出33份FHV-1核酸阳性。结论建立的FHV-1PCR检测方法具有特异、敏感及稳定的特点，适合于临床FHV-1的快速定量检测。; 关键词猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR 猫; Keywords Feline herpesvirus 1 Real-time fluorescent quantitative PCR Cat; 分类号 R33 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用被引量：6: 4; 作者王吉付瑞李晓波王淑菁王莎莎李威秦骁巩薇岳秉飞贺争鸣; 机构中国食品药品检定研究院; 出处《中国比较医学杂志》北大核心 2017年第11期68-74,共7页; 基金中国食品药品检定研究院学科带头人培养基金项目(编号:2015X5); 文摘目的建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BVDV 1型和BVDV 2型包含5’UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDV RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测了小牛血清、小牛血清去蛋白提取液、脾多肽注射液等41批次牛源性样本和64份牛血浆样本。牛源样本和64份牛临床样本。结果建立的BVDV RT-PCR检测方法与牛副流感病毒III型(BPIV3)、猪瘟病毒(CSFV)、乙型脑炎病毒(JEV)均无交叉反应;检测BVDV 1型和BVDV 2型DNA模板最低浓度分别为每微升8.87×10~2拷贝和6.31×10~2拷贝,BVDV 1型和2型c DNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带。应用建立的BVDV RT-PCR方法检测41批次牛源样本和64份牛血浆样本,核酸阳性率分别为14.6%和29.7%。结论建立的BVDV RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源样本携带BVDV核酸的检测。; 关键词牛病毒性腹泻病毒 RT-PCR 牛源样本; Keywords Bovine viral diarrhea virus RT PCR Bovine derived samples; 分类号 R-33 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用	王吉卫礼付瑞李晓波冯育芳王淑菁岳秉飞贺争鸣	《中国比较医学杂志》 CAS	2013	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定	王吉付瑞李晓波王淑菁巩薇卫礼岳秉飞贺争鸣	《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用	王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣	《中国比较医学杂志》 CAS	2014	13	在线阅读下载PDF 职称材料
4	牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用	王吉付瑞李晓波王淑菁王莎莎李威秦骁巩薇岳秉飞贺争鸣	《中国比较医学杂志》北大核心	2017	6	在线阅读下载PDF 职称材料