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题名微量动态显色法细菌内毒素检查方法研究
被引量：2
- 1
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作者
张晨雪
蔡彤
陈晨
赵小燕
裴宇盛
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
北京联馨药业有限公司
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期1392-1398,共7页
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基金
北京市自然科学基金-海淀原始创新联合基金项目(No L222010)。
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文摘
目的通过研究确定微量动态显色法能否满足《中国药典》的要求,作为现有细菌内毒素检查法的补充。方法使用微量动态显色法鲎试剂,每孔样品和鲎试剂加样量各为25μL,检测波长405 nm,预设OD值0.05,使用半孔酶标板检测。依据《中华人民共和国药典》2020年版第四部“9101药品质量分析方法验证指导原则”的规定,按照其项下“杂质测定”中“定量”项目的具体要求,进行专属性、准确度、精密度、定量限、线性、范围、耐用度7项内容的方法学验证,并对48个药品品种共74批样品开展了品种适用性研究,对76个药品品种共143批样品(包括133批阴性样品和10批阳性样品)进行日常检验,并将结果与传统显色法检验结果进行了比对分析。结果经过方法学验证,表明微量动态显色法符合《中华人民共和国药典》对定量方法的要求;经过品种适用性与一致性比对研究,结果表明微量动态显色法与传统显色法相比,具有较好的等效性。结论微量动态显色法可以作为现有细菌内毒素的补充方法推广使用。
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关键词
细菌内毒素
方法学验证
品种适用性
一致性比对
微量动态显色法
补充替代方法
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Keywords
bacterial endotoxin
methodological validation
variety suitability
consistency comparison
micro kinetic chromogenic assay
complementary alternative methods
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
R392.11
[医药卫生—免疫学]
R446.9
[医药卫生—诊断学]
R927.12
[医药卫生—药学]
R996
[医药卫生—毒理学]
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题名单磷酰脂A佐剂的热原控制方法研究
被引量：8
- 2
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作者
裴宇盛
蔡彤
陈晨
高华
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第8期1174-1177,共4页
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基金
国家科技部“重大新药创制”科技重大专项(No 2018ZX09101001-003-005)。
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文摘
目的研究建立单磷酰脂A佐剂的热原控制方法。方法对2批不同来源的单磷酰脂A分别采用细菌内毒素检查法、TLR2高表达HEK细胞和TLR4高表达HEK细胞报告基因法进行了线性与范围、专属性、检测限、耐用度、回收率等方法学研究。结果2批样品使用3种方法的线性与范围、检测限、耐用度、回收率等方法学研究结果均符合规定。专属性方面的研究显示,细菌内毒素检查法、TLR4高表达HEK细胞报告基因法不能区分细菌内毒素和单磷酰脂A。结论细菌内毒素检查法、TLR4高表达HEK细胞报告基因法检测专属性均无法满足质量控制要求。TLR2高表达HEK细胞报告基因法可作为单磷酰脂A佐剂的热原控制方法。
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关键词
单磷酰脂A
佐剂
细菌内毒素检查法
报告基因法
热原检查
质量控制
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Keywords
monophosphoryl lipid A
adjuvant
bacterial endotoxin test
reporter gene assay
pyrogen test
quality control
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分类号
R363.14
[医药卫生—病理学]
R392.11
[医药卫生—免疫学]
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题名《中国药典》2020年版蛋黄卵磷脂细菌内毒素检测
被引量：7
- 3
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作者
裴宇盛
赵小燕
陈晨
高华
蔡彤
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期1227-1230,共4页
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基金
国家科技重大专项(No.2018ZX09101001)
国家药典委员会药品标准制修订研究课题(No.2020Y007)。
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文摘
目的解决蛋黄卵磷脂内毒素检测方法应用中的问题,研究建立蛋黄卵磷脂(供注射用)的细菌内毒素检查方法。方法取吐温80的乙醇溶液(吐温80∶无水乙醇=2.5 g∶2.7 mL,混匀4 min)配制0.1 kg·L^(-1)的蛋黄卵磷脂溶液,制备供试品溶液时,取1 mL蛋黄卵磷脂溶液加入检查用水10μL(供试品阳性对照加入5×10^(5) EU·L^(-1)的内毒素标准溶液10μL),用内毒素检查用水稀释20倍后,用动态浊度法检测,标准曲线范围10~10 EU·L^(-1)。使用2个厂家的鲎试剂对8批样品进行了内毒素检查的方法学研究。结果8批样品的回收率均符合药典中规定的50%~200%之间,符合干扰试验要求,解决了目前的内毒素检查法在实际应用中的问题。结论建立了具有较好耐用度的蛋黄卵磷脂细菌内毒素检查方法,为药典修订提供依据。
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关键词
蛋黄卵磷脂
吐温80
无水乙醇
动态浊度法
中国药典
细菌内毒素
干扰试验
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Keywords
egg yolk lecithin
Tween 80
anhydrous ethanol
kinetic-turbidimetric assay
Chinese Pharmacopoeia
bacterial endotoxin
interference test
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分类号
R-61
[医药卫生]
R155.56
[医药卫生—营养与食品卫生学]
R344.51
[医药卫生—基础医学]
R996
[医药卫生—毒理学]
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题名细菌内毒素光度法检测能力验证研究
被引量：6
- 4
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作者
杜颖
陈晨
蔡彤
谭德讲
高华
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期1717-1722,共6页
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基金
国家药典委员会国家药品标准制修订研究(No.2022Y09)。
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文摘
目的设计并实施细菌内毒素光度法检测能力验证计划,以评价实验室使用光度法测定细菌内毒素的能力和水平。方法按照《中国药典》2015年版四部(通则1143)细菌内毒素检查法-方法2光度测定法,各实验室使用其中任一种方法,测定待测样品内毒素含量。对参加实验室的反馈结果,使用统计软件JMP13进行统计分析,采用参加者的公议值,即本次所有参加实验室的有效检测结果的稳健平均值作为该轮次能力验证待测样品内毒素含量的指定值X。根据以下准则评价参加实验室的结果:(1)实验室检测结果在样品指定值的50%~200%范围内,为满意结果;(2)实验室检测结果不在样品指定值的50%~200%范围内,为不满意结果。结果49个实验室参加了本次能力验证计划,获“满意”结果的实验室有45家,满意度为91.8%;获“不满意”结果的实验室4家,均为检测结果不在样品指定值的50%~200%范围内,不满意率为8.2%。结论本轮能力验证参加实验室大部分可以准确检测出待测样品中的细菌内毒素含量,表明目前我国的实验室细菌内毒素检测水平总体较好。
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关键词
能力验证
细菌内毒素
光度测定法
浊度法
显色基质法
稳健平均值
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Keywords
proficiency testing
bacterial endotoxin
photometric method
turbidimetric method
chromogenic method
robust mean
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
R392.11
[医药卫生—免疫学]
R927.1
[医药卫生—药学]
R996
[医药卫生—毒理学]
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题名骨肽原液对骨髓间充质干细胞成骨分化作用的影响
被引量：5
- 5
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作者
张媛
吴彦霖
纳涛
杨泽岸
胡文言
高华
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
中国生化制药工业协会
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期791-797,共7页
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基金
国家药典委员会国家药品标准提高研究课题(No 2018H001)。
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文摘
目的考察骨肽原液对胎儿骨髓间充质干细胞(fetal marrow mesenchymal stem cells,F-BMSCs)成骨分化的影响,并对其相关作用机制进行初步探讨。方法选取4个不同厂家生产的骨肽原液,对F-BMSCs干预的同时进行成骨诱导。诱导后在不同时间点进行ALP活性及茜素红染色检测,使用定量PCR进行骨分化标志物基因OPN、OCN、Runx2、ALP表达的检测,使用Western blot进行特异性标记蛋白Runx2和OCN表达的检测。结果经成骨诱导后,与诱导组相比,骨肽供试品组厂家C骨肽原液处理的F-BMSCs ALP活性明显增加(P<0.05);厂家B、L骨肽原液处理的F-BMSCs ALP活性高于诱导组,但差异无显著性(P>0.05)。F-BMSCs经茜素红染色,肉眼观察厂家B、C、L骨肽原液处理的F-BMSCs红色明显增强;显微镜下厂家B、C、L骨肽原液处理的F-BMSCs茜素红染色阳性结节状覆盖面积明显多于诱导组。厂家B骨肽原液处理的F-BMSCs成骨分化标志物基因OPN、OCN、Runx2、ALP的mRNA表达量增加,明显高于诱导组;Runx2、OCN蛋白表达亦明显高于诱导组。结论骨肽原液对F-BMSCs的成骨分化具有明显促进作用。
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关键词
骨肽原液
间充质干细胞
成骨分化
碱性磷酸酶
茜素红
骨钙素
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Keywords
ossotide stock solution
mesenchymal stem cells
osteogenic differentiation
alkaline phosphatase
alizarin red
osteocalcin
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分类号
R-332
[医药卫生]
R329.24
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名骨肽原液促UMR106细胞增殖法的建立及验证
被引量：2
- 6
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作者
吴彦霖
张媛
杨泽岸
胡文言
高华
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机构
中国食品药品检定研究院化学药品检定所药理室
中国生化制药工业协会
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第9期1324-1328,共5页
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基金
国家药典委员会国家药品标准提高研究项目(No 2018H001)。
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文摘
目的建立骨肽原液促UMR106细胞增殖法并进行方法学验证,确定方法的限值和判定标准,为建立骨肽原液的生物活性测定方法提供研究数据。方法1)选取2个厂家的骨肽原液进行UMR106细胞增殖方法建立;2)选用1批样品进行方法学验证;3)选取13个厂家39批的骨肽原液进行方法限值和判定标准的确定。结果1)建立了骨肽原液致UMR106细胞增殖方法;2)重复性、中间精密度和耐用性结果符合方法学验证的要求;3)13个厂家39批骨肽原液中:8个厂家的骨肽原液促UMR106细胞增殖率≥150%,5个厂家的骨肽原液促UMR106细胞增殖率<150%。结论骨肽原液促UMR106细胞增殖方案:以1.0 g·L^-1骨肽原液药物浓度作为限值剂量,增殖率≥150%作为符合规定的判定标准。
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关键词
骨肽
成骨
UMR106
生物活性测定法
方法学验证
质量标准
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Keywords
bone peptide
osteogenesis
UMR106
bioactivity assay
validation
quality standard
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分类号
R-332
[医药卫生]
R329.28
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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