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食品来源粪肠球菌的全基因组分析 被引量:3
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作者 孙淑玥 王珊珊 +2 位作者 崔生辉 徐颖华 卢雪梅 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第19期7572-7577,共6页
目的了解食品来源粪肠球菌的全基因组分子特征,并与临床分离菌株进行比较基因组学分析。方法对收集的食品来源粪肠球菌进行全基因组测序和生物信息学分析,比较分析3株食品来源粪肠球菌和7株已发表的临床分离粪肠球菌基因组,对比粪肠球... 目的了解食品来源粪肠球菌的全基因组分子特征,并与临床分离菌株进行比较基因组学分析。方法对收集的食品来源粪肠球菌进行全基因组测序和生物信息学分析,比较分析3株食品来源粪肠球菌和7株已发表的临床分离粪肠球菌基因组,对比粪肠球菌基因组中携带的耐药基因、毒力基因和移动元件,筛选核心基因,构建系统进化树。结果 3株食品来源粪肠球菌染色体全基因组序列全长分别为2816436、3005875和2818728 bp,共含有2733、2853和2756个基因,基因平均鸟嘌呤和胞嘧啶(guanine and cytosine,GC)含量为38.0%。在全基因组核酸水平上,食品与临床分离的粪肠球菌线性关系良好,基因组结构高度相似。3株食品来源菌株基因组中含有3-7种耐药基因、8-19种毒力基因和42-67个移动元件,与临床分离菌株比较,无显著性差异(P>0.05)。系统进化树分析发现食品来源和临床分离粪肠球菌分布在一个进化分枝,分子遗传关系距离较近。结论本研究获得了食品来源粪肠球菌全基因组基本特征的背景材料,证实了食品来源和临床分离粪肠球菌进化溯源关系相近,基因组无显著差异(P>0.05),为后续食品工业界实际应用粪肠球菌的安全性评价奠定了基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 全基因组测序 系统发育分析 比较基因组学
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食源性人兽共患病病原检测方法研究进展
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作者 朱宝康 田博 +1 位作者 徐颖华 卢雪梅 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第17期6743-6750,共8页
食源性人兽共患病是指摄入被人与脊椎动物共同病原微生物污染的食物后,在人与脊椎动物之间相互传播的疾病。随着饮食习惯及畜牧业的发展,食源性人兽共患病对食品安全、人类公共卫生安全及畜牧业的持续发展发起了更加严峻的挑战。近几年... 食源性人兽共患病是指摄入被人与脊椎动物共同病原微生物污染的食物后,在人与脊椎动物之间相互传播的疾病。随着饮食习惯及畜牧业的发展,食源性人兽共患病对食品安全、人类公共卫生安全及畜牧业的持续发展发起了更加严峻的挑战。近几年全球范围内食源性人兽共患病的传播,正是由人类的不良饮食习惯、对人与自然和谐共处意识的缺乏、对公共卫生风险防控能力的不足所导致的。因此,了解目前对食源性人兽共患病的防治措施及防控检测手段,进一步开发拓展对食源性人兽共患病病原安全有效、快速、经济的检测方法是十分必要的。本文综述了近年以细菌、病毒、寄生虫为代表的食源性人兽共患病病原的常用检测手段,以期为食品质量安全控制提供参考,同时也为新技术的开发提供研究基础。 展开更多
关键词 食源性人兽共患病 食品安全 病原检测
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金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品的研制 被引量:2
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作者 陈驰 梁丽 +9 位作者 王春娥 石继春 龙新星 刘茹凤 黄洋 李康 徐潇 李江姣 徐颖华 叶强 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第20期8251-8257,共7页
目的研制金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品。方法将10株金黄色葡萄球菌和10株阴性对照代表性菌株分别在适宜条件下复苏培养,制备合适浓度的菌悬液,并加热灭活和分装。随机抽样不同候选参考品样品10支进行均匀性分析,并将样品... 目的研制金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品。方法将10株金黄色葡萄球菌和10株阴性对照代表性菌株分别在适宜条件下复苏培养,制备合适浓度的菌悬液,并加热灭活和分装。随机抽样不同候选参考品样品10支进行均匀性分析,并将样品分别置于2~8、25、37℃条件下保藏以及反复冻融,评价标准物质的稳定性。同时对候选参考品的准确性、特异性、重复性、最低检出限进行分析,并组织8家实验室进行协作标定。结果制备了由阳性、阴性、重复性和最低检出限样品组成的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用候选参考品。不同候选参考品不同样品间的Ct值的变异系数在1.23%~3.86%之间,表明制备候选参考品均匀性良好。同时证实P1~10阳性和最低检出限候选参考品样品在反复冻融及加速破坏条件下稳定性良好。应用3个不同厂家生产试剂盒进行重复性验证实验显示,样本的Ct值均小于5.0%,表明候选参考品的重复性良好。除P6阳性候选参考品样品不能被部分试剂盒检出,其余阳性参考品样品均能成功检测、最低检出限为1.0×10^(3)个/m L。协作标定结果进一步表明阳性、阴性、重复性和最低检出限候选参考品均符合国家参考品的各项要求。结论研制的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品已获得批准,可用于金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒的质量控制和评价。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 核酸 国家参考品 均匀性 稳定性
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粪肠球菌核酸检测试剂国家参考品的研制 被引量:1
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作者 王春娥 石继春 +5 位作者 徐潇 刘茹凤 杜宗利 龙新星 徐颖华 叶强 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第12期4801-4806,共6页
目的研制粪肠球菌核酸检测试剂的国家参考品。方法将9株粪肠球菌和8株非粪肠球菌参考品候选菌株分别在各自适宜的培养条件下培养,收集新鲜培养物进行计数、灭活、稀释和分装,并对参考品进行均匀性和稳定性评估。组织3家实验室对研制的... 目的研制粪肠球菌核酸检测试剂的国家参考品。方法将9株粪肠球菌和8株非粪肠球菌参考品候选菌株分别在各自适宜的培养条件下培养,收集新鲜培养物进行计数、灭活、稀释和分装,并对参考品进行均匀性和稳定性评估。组织3家实验室对研制的参考品进行了协作标定。结果研制了由9份阳性候选参考品、8份阴性候选参考品、重复性参考品和最低检出限参考品组成的粪肠球菌参考品。阳性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品循环阈值(cycle threshold, Ct)的变异系数(coefficient of variation, CV)均在5.0%以内,分装均匀性良好;参考品各成分的稳定性良好(P值均小于0.05);协作标定结果显示阳性参考品符合率及阴性参考品符合率均为100%,重复性参考品检测Ct值的CV均在5.0%以内,参考品最低检出限为1.0×10^(3)个/mL。结论研制的参考品可用于粪肠球菌核酸检测试剂的质量评价。 展开更多
关键词 粪肠球菌 核酸 国家参考品 均匀性 稳定性 协作标定
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不同来源屎肠球菌的全基因组序列分析 被引量:1
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作者 王春娥 石继春 +6 位作者 徐潇 李康 梁丽 陈驰 龙新星 叶强 徐颖华 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第13期4250-4257,共8页
目的 了解不同分离来源的屎肠球菌(Enterococcus faecium)标准菌株的全基因组特征。方法 采用高通量测序技术对中国医学细菌保藏管理中心保藏的分离于食品和临床患者的6株屎肠球菌标准菌株进行全基因组测序,采用velvet 1.2.03和glimmer ... 目的 了解不同分离来源的屎肠球菌(Enterococcus faecium)标准菌株的全基因组特征。方法 采用高通量测序技术对中国医学细菌保藏管理中心保藏的分离于食品和临床患者的6株屎肠球菌标准菌株进行全基因组测序,采用velvet 1.2.03和glimmer 3.02等生物信息学软件对测序数据进行基因组装、基因预测及功能注释,分析基因组中所含耐药基因和毒力基因;并与已发表的6株临床分离的代表性屎肠球菌进行核心基因组和泛基因组比较分析,构建系统发育分子进化树。结果 6株屎肠球菌标准菌株的基因组序列大小约为2.9Mbp,不同菌株基因组中共鉴定出2669~3085个基因,平均G+C含量为38.0%;基因组耐药基因注释分析发现,每株屎肠球菌含有21~37种数量不等的耐药基因,食品来源菌株所携带耐药基因明显少于临床分离株(P=0.009)。而不同来源菌株之间所含毒力基因数量无显著性差异,含有5~8种数量不等的毒力基因,其中参与生物膜形成的基因BopD和胆盐水解酶基因bsh存在于所有菌株中。比较基因组学分析结果显示,随着屎肠球菌基因组测序数量的增加,泛基因组所含基因数量随之增加,而核心基因组则趋于稳定。全基因组的系统发育树进化分析结果显示, 12株屎肠球菌被分成3个进化分支,其中5株食品来源的菌株均分布在同一个进化分支。结论 本研究获得6株屎肠球菌标准菌株的全基因组序列,证实食品来源菌株均携带一定数量的耐药基因和毒力基因,提示应加强食源性菌株的安全监测。本研究结果可为后续屎肠球菌耐药机制、致病性等研究提供数据支持。 展开更多
关键词 屎肠球菌 不同来源 全基因组序列分析 食源性微生物
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