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呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法的建立 被引量:7
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作者 王吉 卫礼 +1 位作者 贺争鸣 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第9期46-50,共5页
目的建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法,应用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。方法根据已发表的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)M1基因序列,设计合成引物。提取Reo3细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件... 目的建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法,应用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。方法根据已发表的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)M1基因序列,设计合成引物。提取Reo3细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感性、重复性试验。结果建立的Reo3RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以Reo3 RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为0.42pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-9/mL。结论建立的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法可用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。 展开更多
关键词 呼肠孤病毒Ⅲ型 反转录聚合酶链式反应 实验动物 人用动物源性材料及生物制品
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脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:1
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作者 王吉 付瑞 +6 位作者 卫礼 李晓波 冯育芳 巩薇 王淑菁 岳秉飞 贺争鸣 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第7期44-49,共6页
目的建立脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测。方法根据已发表的EMCV VP1基因序列设计合成引物。建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。用该方法检测62只长爪沙鼠、12... 目的建立脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测。方法根据已发表的EMCV VP1基因序列设计合成引物。建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。用该方法检测62只长爪沙鼠、12只小鼠。结果建立的EMCV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以EMCV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为4.1 pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-7mL-1。经RT-PCR检测,62只沙鼠均为阴性;12只小鼠中有1只EMCV核酸阳性,测序结果与GenBank中EMCV标准株核苷酸序列进行比对,其同源性为85%。结论建立的脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测。 展开更多
关键词 脑心肌炎病毒 反转录聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠
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