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汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建
被引量:
3
1
作者
白雪帆
Fack F
+1 位作者
杭长寿
Bautz EKF
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999年第1期1-5,共5页
目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的...
目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的噬菌体载体fuse5,电穿孔导入MC1061菌建库。转化菌培养扩增后提取重组噬菌体,感染K91细胞测定库容,并随机挑选若干克隆测序。结果:构建的S基因噬菌体文库库容(以转导单位TU表示)为3.375X1010。抽检的8个克隆中有5个含有4种大小和组成不同的正确插人的S基因片断,另外3个克隆均为野生型载体的回复突变。结论:所建文库有足够大的库容和较好的多样性,预计可以满足筛检汉坦病毒核衣壳蛋白抗原表位的需要。
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关键词
噬菌体肽库
汉坦病毒
核衣壳蛋白
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职称材料
题名
汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建
被引量:
3
1
作者
白雪帆
Fack F
杭长寿
Bautz EKF
机构
第四军医大学唐都医院感染科
德国海德堡大学分子遗传学
研究所
中国预防医学科学院病毒学研究所出血热研究室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999年第1期1-5,共5页
基金
欧共体科委资助!CI1-CT94-0024
文摘
目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的噬菌体载体fuse5,电穿孔导入MC1061菌建库。转化菌培养扩增后提取重组噬菌体,感染K91细胞测定库容,并随机挑选若干克隆测序。结果:构建的S基因噬菌体文库库容(以转导单位TU表示)为3.375X1010。抽检的8个克隆中有5个含有4种大小和组成不同的正确插人的S基因片断,另外3个克隆均为野生型载体的回复突变。结论:所建文库有足够大的库容和较好的多样性,预计可以满足筛检汉坦病毒核衣壳蛋白抗原表位的需要。
关键词
噬菌体肽库
汉坦病毒
核衣壳蛋白
Keywords
phage peptide library hantavirus nucleocapsid protein
分类号
R373.32 [医药卫生—病原生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建
白雪帆
Fack F
杭长寿
Bautz EKF
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999
3
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