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汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建 被引量:3
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作者 白雪帆 Fack F +1 位作者 杭长寿 Bautz EKF 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期1-5,共5页
目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的... 目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的噬菌体载体fuse5,电穿孔导入MC1061菌建库。转化菌培养扩增后提取重组噬菌体,感染K91细胞测定库容,并随机挑选若干克隆测序。结果:构建的S基因噬菌体文库库容(以转导单位TU表示)为3.375X1010。抽检的8个克隆中有5个含有4种大小和组成不同的正确插人的S基因片断,另外3个克隆均为野生型载体的回复突变。结论:所建文库有足够大的库容和较好的多样性,预计可以满足筛检汉坦病毒核衣壳蛋白抗原表位的需要。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 汉坦病毒 核衣壳蛋白
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