适于茭白茎部蛋白质组分析的双向电泳技术体系的建立 被引量：3

1

作者 刘倩 阮松林 +2 位作者 俞晓平 马华升 叶子弘 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期281-286,共6页

对茭白茎部总蛋白的提取方法,以及2-DE的条件进行了摸索比较,以期得到适合于茭白茎部组织双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法。结果表明:应用三氯乙酸(TCA)—丙酮沉淀法在研磨时加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP),适当增加离心、沉淀的次数和时间,并... 对茭白茎部总蛋白的提取方法,以及2-DE的条件进行了摸索比较,以期得到适合于茭白茎部组织双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法。结果表明:应用三氯乙酸(TCA)—丙酮沉淀法在研磨时加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP),适当增加离心、沉淀的次数和时间,并且提高裂解浓度,可以得到浓度较高,质量较好的蛋白质样品;在蛋白含量测定中减少误差,对2-DE方法中上样量的多少、等电聚焦的程序进行优化,比较并选择染色方法,最终得到蛋白质点数目多,背景清晰,条纹较少,拖尾现象不明显的电泳图谱。 展开更多

关键词 茭白 双向电泳 蛋白质组

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水稻突触融合相关蛋白基因(OsKNOLLE)在酵母中的异源表达及在非生物胁迫中的作用初探

2

作者 王飞娟 朱诚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1251-1257,共7页

突触融合相关蛋白属于多功能蛋白家族SNARE(SolubleN-ethylmaleimide-sensitive factor attachment pro-tein receptor)的亚家族蛋白,这类家族在植物的许多生理过程中都起着非常重要的作用。为探明水稻突触融合相关蛋白OsKNOLLE(Syntaxi... 突触融合相关蛋白属于多功能蛋白家族SNARE(SolubleN-ethylmaleimide-sensitive factor attachment pro-tein receptor)的亚家族蛋白,这类家族在植物的许多生理过程中都起着非常重要的作用。为探明水稻突触融合相关蛋白OsKNOLLE(Syntaxin-related protein KNOLLE)的功能,文章从"中花11"水稻根中克隆OsKNOLLE基因的CDS序列并构建到酵母表达载体pYX212上,同时转化酿酒酵母菌株BY4741。通过比较不同酵母转化子在多种非生物因子胁迫下的表型,显示转OsKNOLLE酵母菌比对照菌适应逆境能力更强,表明OsKNOLLE与盐、Cu2+、H2O2、Cd2+、Hg2+胁迫相关,推测OsKNOLLE在植物对逆境的耐性中发挥重要作用。本研究为OsKNOLLE基因的研究提供方法支持,同时明确了其与不同非生物因子的相关性。 展开更多

关键词 水稻 突触融合相关蛋白 异源表达 非生物胁迫 功能分析

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桔小实蝇气味结合蛋白BdorOBP2的cDNA克隆、组织表达及配基结合特性 被引量：21

3

作者 陈玲 李红亮 +4 位作者 周宇翔 赵磊 张林雅 倪翠侠 商晗武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期612-621,共10页

为了研究桔小实蝇Bactrocera dorsalis气味结合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)参与其嗅觉识别过程中的功能及其与植物气味的结合特性,本研究克隆了桔小实蝇的一个气味结合蛋白基因,命名为BdorOBP2(GenBank登录号为KC773766),并对... 为了研究桔小实蝇Bactrocera dorsalis气味结合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)参与其嗅觉识别过程中的功能及其与植物气味的结合特性,本研究克隆了桔小实蝇的一个气味结合蛋白基因,命名为BdorOBP2(GenBank登录号为KC773766),并对该基因进行了原核表达。BdorOBP2开放阅读框长447bp,编码148个氨基酸,具有典型的6个半胱氨酸位点。定量PCR结果显示,桔小实蝇BdorOBP2在不同组织中均有表达,其中头部中的表达量最高,翅中表达量最低(为头部表达量的63%±6%)。构建了BdorOBP2原核表达载体,诱导并获得了重组BdorOBP2并进行了亲和层析纯化。最后以N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)为荧光探针,利用荧光竞争结合实验测定了重组BdorOBP2与7种主要寄主水果气味物质的结合能力,发现其对多数酯类和醛类化合物亲合力较强,亲合力最强的气味物质为反-2-己烯醛和β-紫罗兰酮,结合常数KD分别为9.96和15.37μmol/L。本研究结果可为高效地开发和设计桔小实蝇的嗅觉引诱剂配方提供一定的理论依据和参考。 展开更多

关键词 桔小实蝇 气味结合蛋白 组织表达谱 原核表达 荧光竞争结合实验

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迷迭香挥发物不同组合对假眼小绿叶蝉行为的调控 被引量：23

4

作者 钮羽群 王梦馨 +3 位作者 崔林 叶火香 潘铖 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期2380-2387,共8页

为探讨茶园群落中非茶植物气味引诱或驱避重要茶树害虫假眼小绿叶蝉的效应,遂将茶园常见杂草迷迭香挥发物中樟脑、α-松油醇和石竹烯分别配成10-2g/m L剂量,再等量组成混合物,在每个橡皮头上载100#L制成诱芯,附于素馨黄粘板上,于茶园中... 为探讨茶园群落中非茶植物气味引诱或驱避重要茶树害虫假眼小绿叶蝉的效应,遂将茶园常见杂草迷迭香挥发物中樟脑、α-松油醇和石竹烯分别配成10-2g/m L剂量,再等量组成混合物,在每个橡皮头上载100#L制成诱芯,附于素馨黄粘板上,于茶园中诱捕假眼小绿叶蝉,发现这种三组分诱芯明显地驱避假眼小绿叶蝉。将行为反应中分别对假眼小绿叶蝉呈现显著引诱效应的10-2g/m L樟脑、10-4g/m L石竹烯、10-6g/m Lα-水芹烯、10-4g/m Lα-松油醇和10-8g/m L桉树脑等量配成五组分混合物,同法制成诱芯,附于素馨黄粘板,诱捕假眼小绿叶蝉。发现五组分诱芯:(1)显著引诱假眼小绿叶蝉,诱效稍强于现价段茶园中使用的源于茶梢挥发物的诱芯;(2)每日诱捕的假眼小绿叶蝉数与天数呈抛物线关系;(3)加入液体石蜡作为缓释剂,可将诱效的半衰期延长2.5—4.0d;(4)18:00—6:00诱得的假眼小绿叶蝉数量占全天的70%—75%。分析认为:非茶植物迷迭香的挥发物中含有显著引诱假眼小绿叶蝉信息物质,这类信息物质制成的五组分诱芯的诱效较强,可以作为一种防治假眼小绿叶蝉的手段,早晨和黄昏是最佳诱捕时分。 展开更多

关键词 迷迭香 挥发物 假眼小绿叶蝉 引诱剂 茶树 吸引-排斥策略

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虫害诱导的植物挥发物代谢调控机制研究进展 被引量：37

5

作者 穆丹 付建玉 +1 位作者 刘守安 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期4221-4233,共13页

长期受自然界的非生物/生物侵害,植物逐步形成了复杂的防御机制,为防御植食性昆虫的为害,植物释放虫害诱导产生的挥发性化合物(herbivore-induced plant volatiles,HIPVs)。HIPVs是植物-植食性昆虫-天敌三级营养关系之间协同进化的结果... 长期受自然界的非生物/生物侵害,植物逐步形成了复杂的防御机制,为防御植食性昆虫的为害,植物释放虫害诱导产生的挥发性化合物(herbivore-induced plant volatiles,HIPVs)。HIPVs是植物-植食性昆虫-天敌三级营养关系之间协同进化的结果。HIPVs的化学组分因植物、植食性昆虫种类的不同而有差异。生态系统中,HIPVs可在植物与节肢动物、植物与微生物、虫害植物与邻近的健康植物、或同一植株的受害和未受害部位间起作用,介导防御性反应。HIPVs作为寄主定位信号,在吸引捕食性、寄生性天敌过程中起着重要作用。HIPVs还可以作为植物间信息交流的工具,启动植株的防御反应而增强抗虫性。不论从生态学还是经济学角度来看,HIPVs对于农林生态系中害虫综合治理策略的完善具有重要意义。前期的研究在虫害诱导植物防御的化学生态学方面奠定了良好基础,目前更多的研究转向阐述虫害诱导植物抗性的分子机制。为了深入了解HIPVs的代谢调控机制,主要从以下几个方面进行了综述。因为植食性昆虫取食造成的植物损伤是与昆虫口腔分泌物共同作用的结果,所以首先阐述口腔分泌物在防御反应中的作用。挥发物诱导素volicitin和β-葡萄糖苷酶作为口腔分泌物的组分,是产生HIPVs的激发子,通过调节伤信号诱发HIPVs的释放。接着阐述了信号转导途径对HIPVs释放的调节作用,并讨论了不同信号途径之间的交互作用。就HIPVs的代谢过程而言,其过程受信号转导途径(包括茉莉酸、水杨酸、乙烯、过氧化氢信号途径)的调控,其中茉莉酸信号途径是诱发HIPVs释放的重要途径。基于前人的研究,综述了HIPVs的主要代谢过程及其过程中关键酶类的调控作用。文中的HIPVs主要包括萜烯类化合物、绿叶挥发物和莽草酸途径产生的芳香族化合物,如水杨酸甲酯和吲哚等。作为化学信号分子,这些化合物中的一部分还能激活邻近植物防御基因的表达。萜烯合酶是各种萜烯类化合物合成的关键酶类,脂氧合酶、过氧化氢裂解酶也是绿叶挥发物代谢途径中的研究热点,而苯丙氨酸裂解酶和水杨酸羧基甲基转移酶分别是合成水杨酸及其衍生物水杨酸甲酯的关键酶类。这些酶类的基因在转录水平上调控着HIPVs代谢途径。最后展望了HIPVs的研究前景。 展开更多

关键词 虫害诱导的植物挥发物 激发子 信号转导 代谢 调控机制

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显著调控假眼小绿叶蝉行为的迷迭香挥发物鉴定 被引量：16

6

作者 钮羽群 潘铖 +5 位作者 王梦馨 周宁宁 张新亭 崔林 陈学新 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期5477-5483,共7页

茶园生态系中生长着众多草本和木本植物,迷迭香就是其中常见的木本杂草。以其幼嫩部分为味源、茶园重要害虫假眼小绿叶蝉为试虫,用Y形管嗅觉仪做行为测定,以洁净空气为CK,发现随着味源剂量增加,其引诱的假眼小绿叶蝉数增至一个数值再减... 茶园生态系中生长着众多草本和木本植物,迷迭香就是其中常见的木本杂草。以其幼嫩部分为味源、茶园重要害虫假眼小绿叶蝉为试虫,用Y形管嗅觉仪做行为测定,以洁净空气为CK,发现随着味源剂量增加,其引诱的假眼小绿叶蝉数增至一个数值再减少,二者呈抛物线关系。从迷迭香挥发物中鉴定出46种化合物,包含醇类9种、酮类4种、酯类4种、酸类1种、烯烃类18种、烷烃类7种、醚类1种、醛类1种和酚类1种。醇类含量最大,占总量52.20%;单组分中桉树脑、左旋α-蒎烯和马鞭草烯酮的含量最大,分别占总量的42.54%、10.37%和6.82%。使用迷迭香挥发物中含量较大的25种组分为味源,每味源配制几种剂量,以正己烷为CK,用Y形管嗅觉仪进行行为测定,发现10-2g/mL樟脑、10-4g/mL石竹烯、10-6g/mL和10-8g/mLα-水芹烯、10-4g/mL和10-10g/mLα-松油醇、10-10g/mL和10-8g/mL桉树脑显著引诱假眼小绿叶蝉;而10-10g/mLβ-蒎烯显著排斥假眼小绿叶蝉。经分析认为:茶园中除了茶树之外,还有其它植物挥发物引诱假眼小绿叶蝉,可为筛选茶园中诱虫植物提供参考。 展开更多

关键词 迷迭香 挥发物 假眼小绿叶蝉 引诱 诱虫植物

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中华蜜蜂Orco嗅觉受体基因的克隆、表达及亚细胞定位 被引量：12

7

作者 张林雅 谢冰花 +3 位作者 倪翠侠 赵磊 李红亮 商晗武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1246-1254,共9页

【目的】克隆鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana的Orco嗅觉受体基因,并对其在工蜂触角上进行免疫荧光定位。【方法】利用RT-PCR技术克隆中华蜜蜂Orco基因,并对其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,使用Real-time PCR技术鉴定其在中华蜜... 【目的】克隆鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana的Orco嗅觉受体基因,并对其在工蜂触角上进行免疫荧光定位。【方法】利用RT-PCR技术克隆中华蜜蜂Orco基因,并对其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,使用Real-time PCR技术鉴定其在中华蜜蜂不同发育时期及不同组织的表达谱;利用免疫荧光定位技术在中华蜜蜂工蜂触角中对Orco进行亚细胞定位。【结果】获得中华蜜蜂Orco基因的全长cDNA序列,命名为AcerOrco(GenBank登录号:JF968610.1),其全长为1434bp,编码477个氨基酸,预测其含7个跨膜结构以及4个位于细胞膜外的亲水区。表达谱分析显示,AcerOrco在卵、幼虫和蛹期呈低丰度表达,1日龄及内勤蜂时期主要在触角和足中表达,且在1日龄的触角中表达量最高;采集蜂时期的触角、头(去除触角)、胸、腹和翅中均有较高丰度的表达。亚细胞定位结果显示,AcerOrco不仅在采集蜂触角鞭节上大量表达(尤其在触角鞭节第1亚节中表达量较高),而且常成对出现,并且发现AcerOrco可能主要在触角毛形感器的外部神经元(outer dendrite,OD)以及板形感器的树突神经元中表达。【结论】成功克隆了AcerOrco基因全长,获得了其表达谱,且将其定位于工蜂采集蜂的触角感器神经元上,最终推测AcerOrco与中蜂嗅觉发育和触角感器功能密切相关。 展开更多

关键词 中华蜜蜂 气味受体 表达谱分析 触角感器 免疫荧光定位

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茶互利素和蚜性信息素及其组合调控大草蛉行为的效应 被引量：10

8

作者 崔林 张新亭 +4 位作者 周宁宁 叶火香 余继忠 祝愿 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1537-1546,共10页

茶蚜群聚于茶梢上刺吸,而茶梢是加工名优茶的原料,不便施药治蚜。大草蛉虽是茶蚜主要天敌之一,但在自然情况下不足以控制茶蚜。遂探讨以茶梢互利素、蚜虫性信息素及其组合引诱大草蛉制约茶蚜的技术。使用顶空吸附法采集蚜害茶梢和健康... 茶蚜群聚于茶梢上刺吸,而茶梢是加工名优茶的原料,不便施药治蚜。大草蛉虽是茶蚜主要天敌之一,但在自然情况下不足以控制茶蚜。遂探讨以茶梢互利素、蚜虫性信息素及其组合引诱大草蛉制约茶蚜的技术。使用顶空吸附法采集蚜害茶梢和健康茶梢挥发物,经GC-MS分析发现蚜害茶梢(E)-2-戊烯醛、苯甲醛和α-法尼烯的含量丰富。将蚜害茶梢挥发物中16种主要成分、蚜虫性信息素荆芥内酯和荆芥醇、以及α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇的2∶2∶6比例混合物分别制成味源,这19种味源的剂量都是200!g。经检测发现荆芥醇、荆芥内酯、α-法尼烯、(E)-2-戊烯醛和苯甲醛引起大草蛉的EAG值明显大于其它13种单组分引起的EAG值,而小于α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇混合物引起的EAG值。再将荆芥内酯和荆芥醇分别按7种比例配成7种味源,还把α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇的2∶2∶6比例混合物、以及(Z)-3-己烯-1-醇、(E)-2-戊烯醛、(E)-2-己烯醛、苯甲醛和α-法尼烯分别作为味源,用这13种味源分别制成的诱芯于秋季茶园中诱集大草蛉,每个诱芯含有信息物质总量是10 mg,结果表明:α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇混合物的诱效最强,称为大草蛉诱集剂;荆芥内酯和荆芥醇1∶9或0∶10比例的混合物诱效次之。深秋置大草蛉诱集剂诱芯于蚜群中,可诱来许多大草蛉成虫捕食茶蚜,并产卵于茶园中而增加大草蛉幼虫越冬基数,翌年春季就近捕食越冬蚜卵孵化的茶蚜。该诱集剂及其使用技术可作为一种治理茶蚜手段。 展开更多

关键词 茶树互利素 蚜虫性信息素 茶蚜 大草蛉 行为调控 草蛉诱集剂 荆芥醇 Α-法尼烯 苯甲醛

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3个不同地域龙井茶香气组成异同的解析 被引量：32

9

作者 张新亭 王梦馨 韩宝瑜 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期344-354,共11页

选西湖产区、钱塘产区和越州产区12个龙井茶,以SDE法提取茶叶香气,用GC-MS配合标准样品定性和定量分析,再以聚类分析探讨产区之间茶叶香气组成及含量的差异。分析结果表明:西湖产区龙井茶香气组分的数量较多、香气含量较高,尤其是芳樟... 选西湖产区、钱塘产区和越州产区12个龙井茶,以SDE法提取茶叶香气,用GC-MS配合标准样品定性和定量分析,再以聚类分析探讨产区之间茶叶香气组成及含量的差异。分析结果表明:西湖产区龙井茶香气组分的数量较多、香气含量较高,尤其是芳樟醇、己酸叶醇酯、β-紫罗兰酮、橙花叔醇、苯甲醛、壬醛、香叶醇、雪松醇和反式呋喃型芳樟醇氧化物9种重要香气组分的含量较高。以这9种组分的含量为变量,以茶样为实体,作聚类分析。将13个茶样分为两组,来自西湖产区的6个龙井茶样和来自钱塘产区、越州产区的茶样各1个茶样聚为一组;其余5个茶样聚为一组。双浦镇虽属于西湖产区,但该地龙井茶香气和西湖产区的龙井茶样有一定差异;敬亭绿雪不能和西湖产区龙井茶聚为一类。据此认为:(1)原产地的西湖龙井茶香气的成分多、含量丰富;钱塘产区和越州产区龙井茶香型比较接近,各有一个优质茶样与西湖产区龙井茶聚为一类;敬亭绿雪距离原产地远,其香气组成与西湖产区龙井茶差别大。(2)可以选用合适参数,再以多元分析方法明确揭示几个茶区龙井茶香气的差异。 展开更多

关键词 西湖龙井茶 钱塘龙井茶 越州龙井茶 香气差异 聚类分析

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茶尺蠖普通气味结合蛋白EoblGOBP2与茶树挥发物的结合功能研究 被引量：11

10

作者 赵磊 崔宏春 +3 位作者 张林雅 陈玲 余继忠 李红亮 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期165-171,共7页

茶尺蠖是茶园中一种重要的鳞翅目害虫,主要以幼虫取食危害茶树叶片,给茶叶生产带来了严重威胁。茶尺蠖在寻找配偶、产卵地以及觅食活动中其嗅觉系统发挥了非常重要的作用。本研究以茶尺蠖Ectropis obliqua Prout嗅觉系统中的一个普通气... 茶尺蠖是茶园中一种重要的鳞翅目害虫,主要以幼虫取食危害茶树叶片,给茶叶生产带来了严重威胁。茶尺蠖在寻找配偶、产卵地以及觅食活动中其嗅觉系统发挥了非常重要的作用。本研究以茶尺蠖Ectropis obliqua Prout嗅觉系统中的一个普通气味结合蛋白——EoblGOBP2为研究对象,在克隆得到的EoblGOBP2基因基础上,通过对EoblGOBP2进行原核表达、分离纯化后,利用1-NPN的荧光竞争结合法研究了体外重组EoblGOBP2与茶树挥发物的结合生理功能。Scatchard方程显示EoblGOBP2与1-NPN的解离常数KD为2.310μmol·L-1。在荧光竞争结合实验中,7种待测配基均能使1-NPN的相对荧光强度降低到50%以下,表明与EoblGOBP2均有较强的结合能力,而其中邻苯二甲酸二丁酯结合能力最强,KD值达到4.353μmol·L-1。本研究7种配基均为茶树叶片挥发物,表明EoblGOBP2在茶尺蠖嗅觉系统对茶树挥发物的信息识别结合功能中发挥了重要作用。 展开更多

关键词 茶尺蠖 普通气味结合蛋白(GOBP) 原核表达 纯化 茶树挥发物 结合特性

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基于COI基因全长序列的假眼小绿叶蝉地理种群遗传分化研究 被引量：13

11

作者 周宁宁 王梦馨 +3 位作者 崔林 潘铖 张新亭 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期6879-6889,共11页

假眼小绿叶蝉Empoasca vitis(Gthe)是我国大陆茶区分布最广、为害最重的茶树害虫,其种群世代重叠严重,数量大。从我国13个主要产茶省份各选出一个重点产茶县(市),采集假眼小绿叶蝉标本,首次扩增得到其线粒体CO I基因全长序列,并以此... 假眼小绿叶蝉Empoasca vitis(Gthe)是我国大陆茶区分布最广、为害最重的茶树害虫,其种群世代重叠严重,数量大。从我国13个主要产茶省份各选出一个重点产茶县(市),采集假眼小绿叶蝉标本,首次扩增得到其线粒体CO I基因全长序列,并以此探讨了假眼小绿叶蝉13个地理种群间的遗传多样性、分子变异、遗传分化程度及基因流水平。在13个地理种群中共得到了176条CO I基因序列,发现了113个变异位点,形成了105个CO I单倍型。总群体单倍型多样性Hd为0.9720,种群内单倍型多样性在0.804—1.000范围内,总群体和各种群的Tajima's D检验结果均不显著,说明茶园假眼小绿叶蝉的进化符合中性模型,种群数量较为稳定。AMOVA分子变异分析结果表明,茶园假眼小绿叶蝉的遗传分化主要来自于种群内部。Mantel检验显示各地理种群的遗传距离与地理距离之间不具有显著的相关性。总群体的遗传分化系数Gst为0.03652,固定系数Fst为0.10876,基因流Nm为4.097,表明地理种群间存在较频繁的基因交流,遗传差异较小。推测,20世纪90年代以来的省际之间频繁的茶树鲜叶贩运、异地茶苗的大批量调拨等因素促进了假眼小绿叶蝉的长距离迁移,加强了不同种群间的基因交流。 展开更多

关键词 假眼小绿叶蝉 线粒体COI 遗传分化 基因流

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灰飞虱体内一种酵母类共生菌的分子鉴定 被引量：6

12

作者 白旭 董胜张 +2 位作者 庞琨 边亚琳 俞晓平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期640-646,共7页

为明确稻飞虱体内酵母类共生菌(yeast-like symbiont,YLS)的种类,采用超速离心的方法分离纯化灰飞虱Laodelphax striatellus(Falln)体内YLS,用真菌的通用引物对其18SrDNA、5.8S-ITSrDNA全长序列进行扩增。结果得到一条分子量约为2340b... 为明确稻飞虱体内酵母类共生菌(yeast-like symbiont,YLS)的种类,采用超速离心的方法分离纯化灰飞虱Laodelphax striatellus(Falln)体内YLS,用真菌的通用引物对其18SrDNA、5.8S-ITSrDNA全长序列进行扩增。结果得到一条分子量约为2340bp的序列。序列同源性分析表明,该菌与Noda等所报道的类酵母菌的18SrDNA序列差异较大(同源性只有89.6%),而与季也蒙毕赤酵母Pichia guilliermondii有99.8%的同源性。原位杂交(ISH)和巢氏PCR均证明该菌存在于灰飞虱脂肪体和卵内,但数量较少。因此,灰飞虱体内YLS除了Noda等报道的类酵母菌外,尚存在另外一种季也蒙毕赤酵母菌。 展开更多

关键词 灰飞虱 类酵母共生菌 季也蒙毕赤酵母 分子鉴定 巢氏PCR 原位杂交

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茶梢信息物引诱叶蝉三棒缨小蜂效应的检测 被引量：18

13

作者 潘铖 林金丽 韩宝瑜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3785-3795,共11页

为确定引诱假眼小绿叶蝉卵寄生蜂叶蝉三棒缨小蜂的茶梢信息物并检测其活性,遂于室内用Y管嗅觉仪进行行为测定,结果表明:1假眼小绿叶蝉口针刺吸和产卵管刺伤茶梢嫩茎、口针刺吸的茶树芽叶、以及口针刺吸芽叶近邻的健康茶叶的气味皆强烈... 为确定引诱假眼小绿叶蝉卵寄生蜂叶蝉三棒缨小蜂的茶梢信息物并检测其活性,遂于室内用Y管嗅觉仪进行行为测定,结果表明:1假眼小绿叶蝉口针刺吸和产卵管刺伤茶梢嫩茎、口针刺吸的茶树芽叶、以及口针刺吸芽叶近邻的健康茶叶的气味皆强烈引诱该蜂;2以健康茶梢、叶蝉为害茶梢挥发物中27种主要成分的3个剂量即10^(-6)、10^(-4)g/m L和10^(-2)g/m L正己烷溶液为味源,进行嗅觉反应测定,发现顺-茉莉酮、芳樟醇、橙花醇、正戊醇、正己醇、1-戊烯-3-醇、α-松油烯、α-松油醇和蒈烯的1或2个剂量显著引诱该蜂。茶园中:110^(-4)g/m L顺-茉莉酮、10^(-4)g/m L芳樟醇和10^(-4)g/m L 1-戊烯-3-醇三组分的等量混合物显著诱集叶蝉三棒缨小蜂;10-2g/m L橙花醇、10-2g/m L正戊醇、10-2g/m Lα-松油烯、10^(-6)g/m L正己醇、10^(-6)g/m Lα-松油醇和10^(-6)g/m L蒈烯六组分等量混合物的诱效更强;2加入液体石蜡作为缓释剂,可将该6组分诱集剂的半衰期延长0.7d;36:00—10:00缨小蜂比较活跃,这一时段诱捕的缨小蜂数占总诱捕数!50%。认为:假眼小绿叶蝉为害的茶梢上受害和未受害芽叶含有的顺-茉莉酮等部分挥发性化合物强烈地引诱叶蝉三棒缨小蜂,当它们按恰当比例组成诱集剂之后,则诱效显著增强,再与素馨黄色彩组合,诱效更强。 展开更多

关键词 茶梢挥发性化合物 叶蝉三棒缨小蜂 顺-茉莉酮 寄生蜂诱集剂

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microRNA在植物生长发育中的作用 被引量：8

14

作者 刘海丽 丁艳菲 +3 位作者 潘家荣 江琼 王光钺 朱诚 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期904-912,共9页

microRNA(miRNA)是一类长度约为21-27核苷酸的小分子非编码RNA,广泛存在于真核生物中。它在转录后水平负调控靶基因的表达,因而在植物生长发育过程中发挥重要作用。miRNA的靶基因通常是调控植物生长发育和信号转导通路中的转录因子,表明... microRNA(miRNA)是一类长度约为21-27核苷酸的小分子非编码RNA,广泛存在于真核生物中。它在转录后水平负调控靶基因的表达,因而在植物生长发育过程中发挥重要作用。miRNA的靶基因通常是调控植物生长发育和信号转导通路中的转录因子,表明miRNA处于基因表达调控网络的核心位置。本文综述近年来miRNA在植物生长发育方面的调控作用,探讨在各植物器官中发挥主要作用的miRNA以及有关miRNA的长途运输作用方式。 展开更多

关键词 MICRORNA 靶基因 转录因子 发育 调控

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褐飞虱表皮蛋白基因NlICP的克隆及功能研究 被引量：9

15

作者 马艳 郝培应 +1 位作者 陆潮峰 俞晓平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1244-1251,共8页

表皮蛋白与几丁质结合构成抵御外界不良环境的昆虫角质层,在昆虫的生长发育及蜕皮硬化中具有重要的作用。为了探讨表皮蛋白基因在褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育中的功能,本研究根据褐飞虱转录组测序信息,对其中1个预测为编码表皮蛋... 表皮蛋白与几丁质结合构成抵御外界不良环境的昆虫角质层,在昆虫的生长发育及蜕皮硬化中具有重要的作用。为了探讨表皮蛋白基因在褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育中的功能,本研究根据褐飞虱转录组测序信息,对其中1个预测为编码表皮蛋白的Unigene36450序列进行了克隆,并应用荧光定量PCR和RNA干扰(RNAi)技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。结果表明:克隆的Unigene36450全长cDNA开放阅读框长585bp,编码的蛋白含194个氨基酸,具有典型的表皮蛋白R&R保守结构域,命名为NlICP。转录水平的时序表达分析发现,NlICP仅在褐飞虱若虫期表达,且在3龄若虫体内表达量最高,提示该基因编码的蛋白属于幼虫表皮蛋白。RNA干扰结果显示,取食dsNlICP的1龄末2龄初(孵化后第3天)若虫在干扰6 d和8 d时,NlICP基因的表达量分别较取食dsGFP的对照组下降58.8%和45.6%,差异极显著(P<0.01);干扰后部分褐飞虱若虫因蜕皮不完全死亡,干扰5 d的存活率较对照下降26.7%。本研究结果提示,NlICP与褐飞虱若虫的生长发育及蜕皮相关,可以作为褐飞虱防治的潜在靶标基因。 展开更多

关键词 褐飞虱 表皮蛋白 基因克隆 表达谱 RNA干扰 荧光定量PCR

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饥饿对扶桑绵粉蚧存活率和产卵量的影响 被引量：15

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作者 郑婷 崔旭红 +3 位作者 汪婷 徐显皓 徐栋超 商晗武 《生物安全学报》 2011年第3期239-242,共4页

【背景】扶桑绵粉蚧是近年来入侵我国的重要害虫,食物是影响其生长发育及种群发展的重要因素。【方法】在室内条件下研究了饥饿对扶桑绵粉蚧不同龄期若虫和初羽化雌成虫存活率和雌成虫产卵量的影响。【结果】扶桑绵粉蚧不同虫态在饥饿... 【背景】扶桑绵粉蚧是近年来入侵我国的重要害虫,食物是影响其生长发育及种群发展的重要因素。【方法】在室内条件下研究了饥饿对扶桑绵粉蚧不同龄期若虫和初羽化雌成虫存活率和雌成虫产卵量的影响。【结果】扶桑绵粉蚧不同虫态在饥饿条件下存活的时间存在显著差异,表现为雌成虫>2龄若虫=3龄若虫>1龄若虫。扶桑绵粉蚧各龄若虫和雌成虫随着饥饿时间的延长,存活率逐渐下降。其中,雌成虫存活率下降速度较慢,完全饥饿8d后存活率仍有50%左右;2、3龄若虫50%个体死亡需要饥饿的时间约为6d,1龄若虫约需5.5d。饥饿会显著降低1龄若虫存活率,但对2、3龄若虫没有显著影响。扶桑绵粉蚧雌成虫饥饿4d对其产卵前期、平均每头雌虫一生的产卵量没有显著影响,但寿命显著低于对照。【结论与意义】扶桑绵粉蚧耐饥力较强,这有助于它在野外建立种群。该结果为进一步评价扶桑绵粉蚧的入侵潜能提供了依据。 展开更多

关键词 扶桑绵粉蚧 存活 繁殖 寿命 入侵潜能

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武陵山区蛇足石杉遗传多样性的AFLP分析 被引量：5

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作者 黄骥 陈浙 +1 位作者 李菁 商晗武 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期83-92,共10页

采用AFLP分子标记对武陵山区蛇足石杉(Huperzia serrata)4个居群进行遗传多样性的研究,结果表明:(1)7对引物组合共扩增出条带615条,其中549条为多态性条带;在物种水平上,多态性条带百分率PPB=89.27%,有效等位基因数Ne=1.257,Nei’s基因... 采用AFLP分子标记对武陵山区蛇足石杉(Huperzia serrata)4个居群进行遗传多样性的研究,结果表明:(1)7对引物组合共扩增出条带615条,其中549条为多态性条带;在物种水平上,多态性条带百分率PPB=89.27%,有效等位基因数Ne=1.257,Nei’s基因多样度指数H=0.178,Shannon多样性信息指数Isp=0.298;在居群水平上,PPB=71.42%,Ne=1.235,H=0.154,Shannon多样性信息指数Ipop=0.251;遗传多样性在居群间有明显的差别,其中坪坝营(PBY)居群最高(PPB=81.95%),而铁峰山(TFS)居群最低(PPB=64.55%)。(2)居群间的遗传分化较低,基于Nei’s基因多样性分析结果显示,居群间遗传分化系数GST=0.159;Shannon’s居群分化系数[(Isp-Ipop)/Isp]为0.16;WINAMOVA分析显示,武陵山区蛇足石杉的遗传变异主要存在于居群内,居群内的遗传变异分量为65.057,占总变异的75.77%,而居群间的遗传变异分量为20.804,占总变异的24.23%;居群内存在极显著的遗传分化(ΦST=0.242,P<0.001)。(3)由遗传分化系数(GST)估计,武陵山区蛇足石杉居群间的基因流Nm=2.647,表明蛇足石杉属于异交种。(4)两两居群间的Nei’s遗传一致度(IN)范围为0.031 0~0.969 4;Mantel检测结果显示,居群间的遗传距离与地理距离之间不存在显著的正相关关系(r=0.269,P=0.887)。研究认为,遗传多样性与遗传结构主要决定于居群历史,较少干扰而稳定的居群偏向克隆生殖,遗传多样性较低,而新建居群的遗传多样性则较高;克隆生长、生态位选择、异交,以及有效的孢子风媒传播等可能是其维持较高遗传多样性水平的因素,而过度采挖等人类活动和生境片断化是导致蛇足石杉濒危的主要因素。 展开更多

关键词 武陵山区 蛇足石杉 AFI P 遗传多样性 遗传结构

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化学发光免疫法检测食品中恩诺沙星残留的研究 被引量：4

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作者 龚云飞 邹晓楠 +4 位作者 张露露 吴莹莹 戴明雁 陈宗伦 张明洲 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期66-69,75,共5页

建立了基于多克隆抗体的化学发光免疫检测技术，用于测定动物源性食品中恩诺沙星残留含量。反应条件优化结果为：抗体包被最佳稀释倍数为64000倍，最佳酶标抗原稀释倍数为256000倍。结果显示：该方法的回归曲线方程为y=-13．898x＋110... 建立了基于多克隆抗体的化学发光免疫检测技术，用于测定动物源性食品中恩诺沙星残留含量。反应条件优化结果为：抗体包被最佳稀释倍数为64000倍，最佳酶标抗原稀释倍数为256000倍。结果显示：该方法的回归曲线方程为y=-13．898x＋110．38（R。=0．9893），检测线性范围为3-810pg／mL，IC50为69．63pg／mL，ICm为1．41pg／mL；鸡肉、鱼肉、虾肉、蜂蜜、牛奶空白组织样品中恩诺沙星的最低检测限分别为3．76、4．59、2．85、2．65、4．20pg／mL，最低定量限分别为6．13、7.35、3．57、3．73和6．48pg／mL，回收率在88．28％-102．6％，板内和板间的平均变异系数分别为2．61％和4．71％。表明本研究建立的化学发光免疫检测方法满足动物源性食品恩诺沙星残留的检测要求。 展开更多

关键词 恩诺沙星 化学发光免疫检测技术 食品安全

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混料设计在优化橘小实蝇人工饲料中的应用 被引量：8

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作者 陈毅超 陈玲 商晗武 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期354-361,共8页

用混料设计的方法研究了橘小实蝇人工饲料中蔗糖、酵母和麦麸的优化配比,建立了化蛹率、幼虫历期、蛹重、雌雄性比、单雌产卵量和卵孵化率6个评价指标的回归模型,并考察了原料间的交互作用,结果得到化蛹率的最大预期值为100%,幼虫历期... 用混料设计的方法研究了橘小实蝇人工饲料中蔗糖、酵母和麦麸的优化配比,建立了化蛹率、幼虫历期、蛹重、雌雄性比、单雌产卵量和卵孵化率6个评价指标的回归模型,并考察了原料间的交互作用,结果得到化蛹率的最大预期值为100%,幼虫历期的最小预期值为7.73 d,蛹重的最大预期值为17.76 mg,雌雄性比的理想预期值为1.00,单雌产卵量的最大预期值为381.22粒,卵孵化率的最大预期值为78.25%,除单雌产卵量外,各评估指标均存在交互作用,通过对6个指标条件的设定,最终得到优化配方2个,其三者配比分别为11.04%、3.27%、25.69%和12.11%、3.00%、24.89%,经验证结果理想,本研究表明混料设计方法对于昆虫人工饲料的开发应用具备可行性。 展开更多

关键词 橘小实蝇 人工饲料 混料设计

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国产黄连属植物的染色体核型分析 被引量：3

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作者 黄骥 陈浙 +1 位作者 夏志华 商晗武 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期931-938,共8页

中国黄连属6种1变种分属叶掌状三全裂和叶掌状五全裂2个类群,前者包括三角叶黄连、峨眉黄连、云南黄连、黄连和其变种短萼黄连;而分布于滇东南的五裂黄连和产于台湾的五叶黄连则归于后者。采用根尖压片法和卡宝品红染色法,对除五叶黄连... 中国黄连属6种1变种分属叶掌状三全裂和叶掌状五全裂2个类群,前者包括三角叶黄连、峨眉黄连、云南黄连、黄连和其变种短萼黄连;而分布于滇东南的五裂黄连和产于台湾的五叶黄连则归于后者。采用根尖压片法和卡宝品红染色法,对除五叶黄连外的中国黄连属5种1变种,以及日本黄连进行染色体核型比较分析,从细胞学角度为探讨中国黄连属植物的系统分类提供新的线索和证据。结果表明:(1)五裂黄连(2n=2x=18=2M+16m)、短萼黄连(2n=2x=18=8m+10sm)和日本黄连(2n=2x=18=12m+6sm)的染色体数目和核型均为首次报道。(2)7个材料的染色体基数均为9,除三角叶黄连为三倍体外,其余均为二倍体。(3)叶为掌状三全裂的二倍体种核型一致,为2A型,染色体类型以及不对称系数均很相似;叶为掌状五全裂的五裂黄连与五叶黄连的核型更接近,为1A型,核型特征的共性表明了这2个类群的自然属性。(4)三倍体三角叶黄连的不对称程度较高,核型为3A型,其染色体大小与峨眉黄连最接近。(5)根据核型不对称程度和染色体大小,结合地理分布,推测叶掌状五全裂种为本属的原始类群。 展开更多

关键词 黄连属 核型 染色体 亲缘关系

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