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Bt基因和Bt蛋白检测技术研究进展 被引量:1
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作者 汪倩 向晓玲 +3 位作者 许耀心 倪晓强 姜佳燕 龚云飞 《安徽农学通报》 2012年第19期11-13,47,共4页
通过转基因技术将可表达杀虫特性蛋白的Bt基因转入大豆、水稻等农作物中,培育出优良的抗虫品种,从而在不使用农药等有害物质的前提下,对病虫害起到高效防治作用。然而动物试验及临床研究发现,Bt蛋白可能导致哺乳动物的免疫器官和免疫细... 通过转基因技术将可表达杀虫特性蛋白的Bt基因转入大豆、水稻等农作物中,培育出优良的抗虫品种,从而在不使用农药等有害物质的前提下,对病虫害起到高效防治作用。然而动物试验及临床研究发现,Bt蛋白可能导致哺乳动物的免疫器官和免疫细胞损伤,也可能影响基因库的遗传结构及群体遗传多样性,对土壤特异生物类群功能、土壤生物多样性以及土壤酶活性等也有不同程度的影响,且Bt蛋白有可能沿着食物链在人体内富集,对人体形成潜在的危害。因此,开展对Bt基因和Bt蛋白的监控研究是必要的,该文对Bt的相关研究现状作一简要综述。 展开更多
关键词 BT基因 BT蛋白 危害 检测技术 综述
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链霉素人工抗原及多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:4
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作者 奚茜 李沐洁 +4 位作者 龚云飞 陈宗伦 方结红 王唯芬 张明洲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期181-185,共5页
通过研究链霉素(SM)人工抗原的合成和多克隆抗体的制备,建立链霉素残留的免疫分析方法。以氧-缩甲基羟胺肟化链霉素的醛基,引入羧基,再用碳二亚胺法将半抗原与蛋白质载体连接,合成免疫原SM-cBSA。用戊二醛法合成包被原SM-OVA。用紫外扫... 通过研究链霉素(SM)人工抗原的合成和多克隆抗体的制备,建立链霉素残留的免疫分析方法。以氧-缩甲基羟胺肟化链霉素的醛基,引入羧基,再用碳二亚胺法将半抗原与蛋白质载体连接,合成免疫原SM-cBSA。用戊二醛法合成包被原SM-OVA。用紫外扫描、SDS-PAGE分析偶联情况,计算得链霉素与cBSA、OVA的分子偶联比分别为7.6:1与17.7:1。经动物免疫获得效价为1:40000的链霉素多克隆抗体,采用间接竞争ELISA测定IC50为3.32ng/mL,与双氢链霉素的交叉反应率为105.21%,与同类的其他药物均无交叉反应。 展开更多
关键词 链霉素 人工抗原 多克隆抗体 间接ELISA法
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恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体的制备 被引量:4
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作者 邹晓楠 龚云飞 +6 位作者 奚茜 李沐洁 张晓峰 方结红 陈宗伦 王唯芬 张明洲 《安徽农业科学》 CAS 2012年第27期13415-13417,共3页
[目的]制备恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体。[方法]采用活性酯法合成恩诺沙星的人工抗原,并通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳对其进行鉴定。利用免疫原(ENR-BSA)免疫新西兰大白兔,制备抗恩诺沙星的高亲和力和高特异性的多克隆抗体。[结果... [目的]制备恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体。[方法]采用活性酯法合成恩诺沙星的人工抗原,并通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳对其进行鉴定。利用免疫原(ENR-BSA)免疫新西兰大白兔,制备抗恩诺沙星的高亲和力和高特异性的多克隆抗体。[结果]恩诺沙星成功地偶联到载体蛋白上。通过动物免疫,获得了高效价的抗血清,最高效价达到1∶100 000,说明人工抗原成功地诱导机体产生免疫应答。[结论]恩诺沙星的人工抗原合成路线简单易行,可为进一步建立恩诺沙星的免疫检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 恩诺沙星 人工抗原 鉴定 多克隆抗体
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食物种类与饥饿胁迫对福寿螺生长发育的影响 被引量:6
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作者 董胜张 俞晓平 《生物安全学报》 2011年第3期213-219,共7页
【背景】福寿螺是一种危害极其严重的外来生物,可对不同的农作物造成不同程度的危害。目前,国内外关于食物来源和饥饿程度对福寿螺生长发育影响的研究较少,且主要集中在成螺。【方法】本试验研究8种食物(牛筋草、青菜、油麦菜、芹菜、... 【背景】福寿螺是一种危害极其严重的外来生物,可对不同的农作物造成不同程度的危害。目前,国内外关于食物来源和饥饿程度对福寿螺生长发育影响的研究较少,且主要集中在成螺。【方法】本试验研究8种食物(牛筋草、青菜、油麦菜、芹菜、大白菜、茭白、萝卜叶和杨梅叶)对Ⅲ级福寿螺生长发育的影响,以及不同的饥饿条件对不同发育级别福寿螺的螺长、螺宽、螺高和体重的影响。【结果】在相同条件下,福寿螺取食利用率和特定生长率最高的食物是大白菜,其次是油麦菜,而不取食杨梅叶。饥饿胁迫对不同发育级别福寿螺的影响程度表现为Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ,持续喂食Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级福寿螺100d,其体重分别增加9.65、1.57和3.03倍。而Ⅳ级福寿螺无论饥饿与否其体重变化均不明显。【结论与意义】福寿螺可取食大部分绿色植物,但食物种类可显著影响福寿螺的生长发育,且福寿螺的耐饥性随着温度的增加而减弱。这些结果进一步明确了福寿螺的取食特性,为福寿螺的综合防治提供了理论基础。 展开更多
关键词 福寿螺 食物 饥饿胁迫 特定生长率
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茭白愈伤组织诱导及基因组多态性分析 被引量:2
5
作者 李帅 崔海峰 +2 位作者 金晔 康璐瑶 叶子弘 《长江蔬菜》 2015年第22期84-88,共5页
诱导获得了双季茭白龙茭2号的愈伤组织,采用RAPD和ISSR分子标记技术对4个茭白品种和诱导获得的2种茭白愈伤组织进行了基因组多态性分析。筛选获得的12条ISSR和7条RAPD引物共扩增出121条清晰条带、20条多态性条带,其中茭白品种材料与愈... 诱导获得了双季茭白龙茭2号的愈伤组织,采用RAPD和ISSR分子标记技术对4个茭白品种和诱导获得的2种茭白愈伤组织进行了基因组多态性分析。筛选获得的12条ISSR和7条RAPD引物共扩增出121条清晰条带、20条多态性条带,其中茭白品种材料与愈伤组织的多态性位点比率分别为3.30%和13.22%。正常茭白的3个品种之间未检测到多态性;正常茭白与野茭间多态性位点比率为3.31%;但愈伤组织与茭白之间的基因组多态性为11.57%。表明组培过程中产生的基因组多态性明显高于正常田间无性繁殖产生的变异,茭白组织培养体系的建立将有助于茭白的品种选育。 展开更多
关键词 茭白 愈伤组织 遗传多样性 分子标记
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灰飞虱体内类酵母共生菌异常毕赤酵母的分离培养及其对杀菌剂的敏感性 被引量:4
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作者 曹伟 马正 俞晓平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期271-280,共10页
【目的】随着杀虫剂等化学农药的大规模使用,灰飞虱Laodelphax striatellus的抗药性不断增强,防治效果下降,因此寻找新的防治方法尤为重要。本研究探索使用杀菌剂来减少灰飞虱体内共生菌的数量,以降低灰飞虱的活力,为"抑菌防虫&qu... 【目的】随着杀虫剂等化学农药的大规模使用,灰飞虱Laodelphax striatellus的抗药性不断增强,防治效果下降,因此寻找新的防治方法尤为重要。本研究探索使用杀菌剂来减少灰飞虱体内共生菌的数量,以降低灰飞虱的活力,为"抑菌防虫"提供理论依据。【方法】对灰飞虱体内的类酵母共生菌(yeast-like symbiotes,YLS)进行离体培养并鉴定,测定离体培养YLS对不同浓度不同种类杀菌剂的敏感性,将对其抑制作用明显的杀菌剂喷施于麦苗,待灰飞虱取食后统计灰飞虱死亡率、体重,并通过荧光定量PCR检测体内共生菌的数量变化。【结果】离体培养得到1株YLS,经碳源同化实验和18S r DNA分子鉴定,将该菌株归为异常毕赤酵母Pichia anomala,以变性梯度凝胶电泳(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)技术验证了该菌株在灰飞虱体内的存在。对杀菌剂敏感性的测定结果显示,70%丙森锌和50%戊唑醇+25%肟菌酯对P.anomala抑制效果明显,而氟吡菌胺+霜霉威盐酸盐(687.5 g a.i./L)与40%嘧霉胺对P.anomala的抑制效果较差。用对P.anomala抑制效果明显的两种杀菌剂(70%丙森锌和50%戊唑醇+25%肟菌酯)以800 mg/L浓度喷施麦苗,灰飞虱取食喷施麦苗后的死亡率分别达到46.7%与63.3%,显著高于对照,而体重比对照组显著低。荧光定量检测结果表明,灰飞虱体内3种共生菌(Noda菌、季也蒙毕赤酵母和异常毕赤酵母)的数量在使用了各种杀菌剂后均显著降低。【结论】结果说明,体外喷施杀菌剂对灰飞虱体内共生菌有抑制作用,进而对灰飞虱的生长存活产生影响,这为杀菌剂与杀虫剂的协同使用防治灰飞虱奠定基础。 展开更多
关键词 灰飞虱 异常毕赤酵母 离体培养 杀菌剂 生物防治 变性梯度凝胶电泳
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三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定 被引量:5
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作者 王旻子 应永飞 +3 位作者 龚云飞 方结红 陈宗伦 张明洲 《安徽农业科学》 CAS 2012年第5期2574-2576,共3页
[目的]制备抗三聚氰胺单克隆抗体,并对其效价、敏感性与特异性进行测定。[方法]通过三聚氰胺人工抗原MEL-BSA免疫BALB/c小鼠以及细胞融合等方法,获得分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并利用小鼠体内腹水诱生法制备抗三聚氰胺单... [目的]制备抗三聚氰胺单克隆抗体,并对其效价、敏感性与特异性进行测定。[方法]通过三聚氰胺人工抗原MEL-BSA免疫BALB/c小鼠以及细胞融合等方法,获得分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并利用小鼠体内腹水诱生法制备抗三聚氰胺单克隆抗体;采用间接竞争ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、敏感性与特异性。[结果]经小鼠免疫、细胞融合与亚克隆后获得了2株分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1B12和2H9;间接ELISA检测结果显示,杂交瘤细胞1B12和2H9腹水型单抗的效价分别为1∶25 600与1∶12 800,IC50分别为8.0 ng/ml与8.3 ng/ml,且该2种单抗只与三聚氰胺有反应,与三聚氰胺类似物无交叉反应。[结论]该研究获得了高效价、高灵敏度的三聚氰胺特异性单克隆抗体,为后续研究提供了良好基础。 展开更多
关键词 三聚氰胺 单克隆抗体
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双季茭白品种浙茭7号的选育 被引量:9
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作者 邢阿宝 崔海峰 +3 位作者 俞晓平 张尚发 郑寨生 叶子弘 《长江蔬菜》 2015年第22期53-54,共2页
浙茭7号是从梭子茭优良变异品种中筛选出来的双季茭白新品种,其植株较梭子茭矮小,适宜在浙江省中部以北平原地区种植;孕茭适温18-28℃;秋季9月下旬到10月中旬采收秋季茭白,比梭子茭早4-5 d;春季4月初到6月初采收夏季茭白,比梭子茭早6-7... 浙茭7号是从梭子茭优良变异品种中筛选出来的双季茭白新品种,其植株较梭子茭矮小,适宜在浙江省中部以北平原地区种植;孕茭适温18-28℃;秋季9月下旬到10月中旬采收秋季茭白,比梭子茭早4-5 d;春季4月初到6月初采收夏季茭白,比梭子茭早6-7 d;秋茭产量约1 368.0 kg/667 m^2,分别较浙茭911和梭子茭增加8.45%和10.44%,夏茭产量约2 718.8kg/667 m^2,分别较浙茭911和梭子茭增加8.54%和12.83%。 展开更多
关键词 浙茭7号 茭白 新品种 选育
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龙茭2号不同发育阶段茎部活性氧的检测分析 被引量:2
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作者 康璐瑶 崔海峰 +2 位作者 邢阿宝 李帅 叶子弘 《长江蔬菜》 2015年第22期92-94,共3页
基于龙茭2号茎部不同发育阶段及不同部位相关保护酶活性变化,比较分析了茭白茎部发育过程中活性氧的变化。龙茭2号茎部横切面及纵切面的NBT染色观察发现:超氧化物歧化酶(SOD)主要分布在茭白茎部维管束周围,发育早期茎部尖端染色较深。SO... 基于龙茭2号茎部不同发育阶段及不同部位相关保护酶活性变化,比较分析了茭白茎部发育过程中活性氧的变化。龙茭2号茎部横切面及纵切面的NBT染色观察发现:超氧化物歧化酶(SOD)主要分布在茭白茎部维管束周围,发育早期茎部尖端染色较深。SOD和过氧化物酶(POD)的活性检测分析发现,龙茭2号3个不同部位中SOD及POD的活性变化趋势一致,发育早期和后期保护酶活性较高,中期活性较低。 展开更多
关键词 茭白 活性氧 超氧化物歧化酶 过氧化物酶
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三聚氰胺人工抗原合成与鉴定 被引量:1
10
作者 王旻子 应永飞 +3 位作者 龚云飞 方结红 陈宗伦 张明洲 《安徽农学通报》 2011年第23期43-45,共3页
采用戊二醛法与甲醛树脂法分别将三聚氰胺(Melamine,Mel)偶联到牛血清白蛋白(BSA)与鸡卵清蛋白上,合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白(Mel-BSA)与包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白(Mel-OVA)。通过快速凝胶液相层析(FPLC)纯化后,合成抗原进行紫... 采用戊二醛法与甲醛树脂法分别将三聚氰胺(Melamine,Mel)偶联到牛血清白蛋白(BSA)与鸡卵清蛋白上,合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白(Mel-BSA)与包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白(Mel-OVA)。通过快速凝胶液相层析(FPLC)纯化后,合成抗原进行紫外扫描、红外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定。结果表明三聚氰胺已偶联到载体蛋白,为进一步制备三聚氰胺的特异性抗体与建立三聚氰胺免疫检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 三聚氰胺 人工抗原 合成 鉴定
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