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基于液相PNA-FISH技术的单增李斯特菌检测方法研究
被引量:
4
1
作者
杨彤
李可
+3 位作者
叶子弘
吴姗
张晓峰
帅江冰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1255-1261,共7页
为了提高单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的检测效率和检测通量,本研究在前期初步建立的液相肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)检测方法基础上,分别采用50%酒精加4%多聚甲醛和80%酒精加PBS两种杂交前处理方式进行细菌固定试...
为了提高单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的检测效率和检测通量,本研究在前期初步建立的液相肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)检测方法基础上,分别采用50%酒精加4%多聚甲醛和80%酒精加PBS两种杂交前处理方式进行细菌固定试验。结果显示,两种方法在95%的置信区间内无显著性差异,PBS可代替多聚甲醛使用。本研究进一步利用特异性探针Lm-16S-2初步建立单增李斯特菌液相PNA-FISH方法,特异性试验结果显示,该方法与17株常见单增李斯特菌杂交的荧光值明显高于阴性对照,而8株非单增李斯特菌和14株非李斯特菌杂交的荧光值与阴性对照无差别,表明该方法特异性强;将单增李斯特菌菌液10倍倍比稀释(101 cfu/mL^108 cfu/mL)后同时利用该方法及传统细菌生化鉴定法检测,进行敏感性试验。结果显示,该方法与传统细菌生化鉴定法敏感性相同,对单增李斯特菌的检测限均为104 cfu/mL,敏感性较高。对8个批次不同种单增李斯特菌进行重复性试验,结果显示批内和批间荧光值变异系数均小于5%,重复性好;经更换不同实验室及操作人员后检测同一批次不同浓度的单增李斯特菌,结果显示试验结果可以重复再现,稳定性好。对28份家禽组织样品经国标法增菌培养后采用液相PNA-FISH方法检测,结果显示该方法与传统细菌生化鉴定法检测单增李斯特菌的符合率达到100%,并大大缩减检测时间。本研究建立的单增李斯特菌液相PNA-FISH方法能够高效、快速、准确的检测单增李斯特菌,为该菌的检测提供了一种可行技术手段。
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关键词
肽核酸
荧光原位杂交
单增李斯特菌
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职称材料
肽核酸在微生物检测中的应用
2
作者
杨彤
叶子弘
+3 位作者
吴姗
李可
张晓峰
帅江冰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期450-455,共6页
核酸是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一,在遗传信息传递中发挥着重要的作用,核酸序列分析对阐释生命活动具有重要意义。寡核苷酸探针可用于微生物等的核酸序列检测和分析,但应用寡核苷酸探针检测核酸...
核酸是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一,在遗传信息传递中发挥着重要的作用,核酸序列分析对阐释生命活动具有重要意义。寡核苷酸探针可用于微生物等的核酸序列检测和分析,但应用寡核苷酸探针检测核酸序列时存在一些不足与缺陷,如其抵御核酸酶降解的能力较弱、杂交分子的解链温度低.
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关键词
核酸序列分析
寡核苷酸探针
遗传信息传递
微生物检测
杂交分子
单体聚合
解链温度
肽核酸
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职称材料
冬季遮阳网茶园昆虫趋色性及其群落结构分析
3
作者
曹原
李捷
+3 位作者
兰建军
郭春伟
徐伟众
韩宝瑜
《茶叶通讯》
2024年第1期54-59,共6页
茶园建设固定遮阳网可助力干旱时节抗旱和冬季防冻,但茶园病虫害也常发。目前,有关固定遮阳网茶园昆虫群落缺乏研究。以浙江松阳县建有的固定遮阳网茶园为对象,冬季采用13种颜色的诱虫色板每隔10 d依次对5块遮阳网茶园内昆虫进行诱捕,统...
茶园建设固定遮阳网可助力干旱时节抗旱和冬季防冻,但茶园病虫害也常发。目前,有关固定遮阳网茶园昆虫群落缺乏研究。以浙江松阳县建有的固定遮阳网茶园为对象,冬季采用13种颜色的诱虫色板每隔10 d依次对5块遮阳网茶园内昆虫进行诱捕,统计24 h内捕获的种数和个体数。结果共捕获6个目37个科的2940个昆虫(蜘蛛);诱捕量最多的为双翅目,种数、个体数分别占总物种数、总个体数的29.7%和69.5%;聚类分析将13种色板中的荧光绿、芽绿、米黄、土黄、橘黄、草绿、荧光黄和素馨黄色板聚为一类,每种色彩的每块板平均诱捕的物种数和个体数分别是(19.4±2.4)种和(286.9±55.4)个;墨绿、大红、天蓝、土褐和纯白5种色板聚为一类,每种色彩的每块板平均诱捕的物种数和个体数分别是(11.8±3.3)种和(129.0±36.4)个;主要害虫有茶小绿叶蝉、茶蚜和黑刺粉虱等,主要天敌是尺蠖原绒茧蜂和单白绵副绒茧蜂。研究认为遮阳网茶园成为主要害虫和重要天敌的越冬庇护场所;芽绿、素馨黄、荧光绿和荧光黄等色板可作为监测茶园虫情的手段之一。
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关键词
茶园
昆虫
趋色性
群落结构
遮阳网
冬季
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职称材料
灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素的鉴定
被引量:
13
4
作者
范培珍
韩善捷
韩宝瑜
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2020年第1期65-71,共7页
为鉴定灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素,遂以SDE法提取灰茶尺蠖为害茶梢和正常茶梢挥发物,经GC-MS检测,分别鉴定出31和25种组分,二者总含量相对于等剂量内标的含量分别是1863.8%和1124.6%。与正常茶梢相比,灰茶尺蠖为害茶梢挥发物中...
为鉴定灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素,遂以SDE法提取灰茶尺蠖为害茶梢和正常茶梢挥发物,经GC-MS检测,分别鉴定出31和25种组分,二者总含量相对于等剂量内标的含量分别是1863.8%和1124.6%。与正常茶梢相比,灰茶尺蠖为害茶梢挥发物中苯甲醛、反-2-癸烯醛、吲哚、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛含量显著增加。将灰茶尺蠖为害茶梢挥发物的18种主要组分分别溶于液体石蜡制成10^-4 g/m L味源,以Y形嗅觉仪检测茶尺蠖绒茧峰对味源的趋性;与液体石蜡相比,苯甲醛、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛诱效显著,反-2癸烯醛、4-庚烯醛和吲哚的诱效明显,其他11组分无明显诱效。再将前7种组分配成10^-2g/mL引诱剂,分别载于橡皮头制成诱芯,附于芽绿粘板上,在茶园茶尺蠖绒茧蜂盛发期实施诱捕,携带前4种诱芯的芽绿粘板诱捕的蜂数明显多于后3种、且显著多于无诱芯的芽绿粘板,而且携带10^-2 g/mL苯甲醛、水杨酸和反-2-己烯醛等量混合物诱芯的诱效最强。认为苯甲醛、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛是灰茶尺蠖取食诱导的茶树互利素。
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关键词
灰茶尺蠖
茶树互利素
引诱
茶尺蠖绒茧峰
诱芯
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职称材料
题名
基于液相PNA-FISH技术的单增李斯特菌检测方法研究
被引量:
4
1
作者
杨彤
李可
叶子弘
吴姗
张晓峰
帅江冰
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室
浙江省
检验
检疫
科学
技术
研究院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1255-1261,共7页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFF0210203)
海关总署科研项目(2019HK097)
浙江省科技计划项目(2018C37015)。
文摘
为了提高单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的检测效率和检测通量,本研究在前期初步建立的液相肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)检测方法基础上,分别采用50%酒精加4%多聚甲醛和80%酒精加PBS两种杂交前处理方式进行细菌固定试验。结果显示,两种方法在95%的置信区间内无显著性差异,PBS可代替多聚甲醛使用。本研究进一步利用特异性探针Lm-16S-2初步建立单增李斯特菌液相PNA-FISH方法,特异性试验结果显示,该方法与17株常见单增李斯特菌杂交的荧光值明显高于阴性对照,而8株非单增李斯特菌和14株非李斯特菌杂交的荧光值与阴性对照无差别,表明该方法特异性强;将单增李斯特菌菌液10倍倍比稀释(101 cfu/mL^108 cfu/mL)后同时利用该方法及传统细菌生化鉴定法检测,进行敏感性试验。结果显示,该方法与传统细菌生化鉴定法敏感性相同,对单增李斯特菌的检测限均为104 cfu/mL,敏感性较高。对8个批次不同种单增李斯特菌进行重复性试验,结果显示批内和批间荧光值变异系数均小于5%,重复性好;经更换不同实验室及操作人员后检测同一批次不同浓度的单增李斯特菌,结果显示试验结果可以重复再现,稳定性好。对28份家禽组织样品经国标法增菌培养后采用液相PNA-FISH方法检测,结果显示该方法与传统细菌生化鉴定法检测单增李斯特菌的符合率达到100%,并大大缩减检测时间。本研究建立的单增李斯特菌液相PNA-FISH方法能够高效、快速、准确的检测单增李斯特菌,为该菌的检测提供了一种可行技术手段。
关键词
肽核酸
荧光原位杂交
单增李斯特菌
Keywords
peptide nucleic acid
fluorescence in situ hybridization
Listeria monocytogenes
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
肽核酸在微生物检测中的应用
2
作者
杨彤
叶子弘
吴姗
李可
张晓峰
帅江冰
机构
浙江省
检验
检疫
科学
技术
研究院
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期450-455,共6页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFF0210203、2017YFF0210304)。
文摘
核酸是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一,在遗传信息传递中发挥着重要的作用,核酸序列分析对阐释生命活动具有重要意义。寡核苷酸探针可用于微生物等的核酸序列检测和分析,但应用寡核苷酸探针检测核酸序列时存在一些不足与缺陷,如其抵御核酸酶降解的能力较弱、杂交分子的解链温度低.
关键词
核酸序列分析
寡核苷酸探针
遗传信息传递
微生物检测
杂交分子
单体聚合
解链温度
肽核酸
分类号
S854.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
冬季遮阳网茶园昆虫趋色性及其群落结构分析
3
作者
曹原
李捷
兰建军
郭春伟
徐伟众
韩宝瑜
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室
杭州茶菊科技有限公司
松阳县农业农村局
松阳县臻琳家庭农场
松阳县伟众家庭农场
出处
《茶叶通讯》
2024年第1期54-59,共6页
基金
浙江省重点研发计划项目(2020C02026)。
文摘
茶园建设固定遮阳网可助力干旱时节抗旱和冬季防冻,但茶园病虫害也常发。目前,有关固定遮阳网茶园昆虫群落缺乏研究。以浙江松阳县建有的固定遮阳网茶园为对象,冬季采用13种颜色的诱虫色板每隔10 d依次对5块遮阳网茶园内昆虫进行诱捕,统计24 h内捕获的种数和个体数。结果共捕获6个目37个科的2940个昆虫(蜘蛛);诱捕量最多的为双翅目,种数、个体数分别占总物种数、总个体数的29.7%和69.5%;聚类分析将13种色板中的荧光绿、芽绿、米黄、土黄、橘黄、草绿、荧光黄和素馨黄色板聚为一类,每种色彩的每块板平均诱捕的物种数和个体数分别是(19.4±2.4)种和(286.9±55.4)个;墨绿、大红、天蓝、土褐和纯白5种色板聚为一类,每种色彩的每块板平均诱捕的物种数和个体数分别是(11.8±3.3)种和(129.0±36.4)个;主要害虫有茶小绿叶蝉、茶蚜和黑刺粉虱等,主要天敌是尺蠖原绒茧蜂和单白绵副绒茧蜂。研究认为遮阳网茶园成为主要害虫和重要天敌的越冬庇护场所;芽绿、素馨黄、荧光绿和荧光黄等色板可作为监测茶园虫情的手段之一。
关键词
茶园
昆虫
趋色性
群落结构
遮阳网
冬季
Keywords
Tea plantation
Insects
Chromatotaxis
Community structure
Shading net
Winter
分类号
S571.1 [农业科学—茶叶生产加工]
S435.711 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素的鉴定
被引量:
13
4
作者
范培珍
韩善捷
韩宝瑜
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室
六安职业
技术
学院
出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2020年第1期65-71,共7页
基金
国家重点研发计划(2018YFC1604402)
荷兰Solidaridad基金会项目(SOL 2010/714)
文摘
为鉴定灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素,遂以SDE法提取灰茶尺蠖为害茶梢和正常茶梢挥发物,经GC-MS检测,分别鉴定出31和25种组分,二者总含量相对于等剂量内标的含量分别是1863.8%和1124.6%。与正常茶梢相比,灰茶尺蠖为害茶梢挥发物中苯甲醛、反-2-癸烯醛、吲哚、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛含量显著增加。将灰茶尺蠖为害茶梢挥发物的18种主要组分分别溶于液体石蜡制成10^-4 g/m L味源,以Y形嗅觉仪检测茶尺蠖绒茧峰对味源的趋性;与液体石蜡相比,苯甲醛、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛诱效显著,反-2癸烯醛、4-庚烯醛和吲哚的诱效明显,其他11组分无明显诱效。再将前7种组分配成10^-2g/mL引诱剂,分别载于橡皮头制成诱芯,附于芽绿粘板上,在茶园茶尺蠖绒茧蜂盛发期实施诱捕,携带前4种诱芯的芽绿粘板诱捕的蜂数明显多于后3种、且显著多于无诱芯的芽绿粘板,而且携带10^-2 g/mL苯甲醛、水杨酸和反-2-己烯醛等量混合物诱芯的诱效最强。认为苯甲醛、水杨酸、反-2-己烯醛和己醛是灰茶尺蠖取食诱导的茶树互利素。
关键词
灰茶尺蠖
茶树互利素
引诱
茶尺蠖绒茧峰
诱芯
Keywords
Ectropis grisescens
synomone of tea plant
attraction
Apanteles sp.
lure
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于液相PNA-FISH技术的单增李斯特菌检测方法研究
杨彤
李可
叶子弘
吴姗
张晓峰
帅江冰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
4
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职称材料
2
肽核酸在微生物检测中的应用
杨彤
叶子弘
吴姗
李可
张晓峰
帅江冰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
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职称材料
3
冬季遮阳网茶园昆虫趋色性及其群落结构分析
曹原
李捷
兰建军
郭春伟
徐伟众
韩宝瑜
《茶叶通讯》
2024
0
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职称材料
4
灰茶尺蠖为害诱导茶树释放的互利素的鉴定
范培珍
韩善捷
韩宝瑜
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2020
13
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