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维生素C混菌发酵中地衣芽胞杆菌对氧化葡萄糖酸杆菌伴生活性的研究 被引量:1
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作者 陈建华 张君丽 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期160-163,共4页
对维生素C混菌发酵中地衣芽胞杆菌的伴生活性进行了研究。分别对单独培养、混合培养条件下地衣芽胞杆菌的生长特性进行分析,并以氧化葡萄糖酸杆菌的生长密度、产酸量为指标,考察地衣芽胞杆菌胞外液的伴生活性以及蛋白酶抑制剂对活性的... 对维生素C混菌发酵中地衣芽胞杆菌的伴生活性进行了研究。分别对单独培养、混合培养条件下地衣芽胞杆菌的生长特性进行分析,并以氧化葡萄糖酸杆菌的生长密度、产酸量为指标,考察地衣芽胞杆菌胞外液的伴生活性以及蛋白酶抑制剂对活性的影响。结果表明,活性物质在地衣芽胞杆菌对数生长期阶段合成并释放至胞外,使胞外液上清对氧化葡萄糖酸杆菌的生长和产酸产生促进作用。随着伴生菌培养时间的延长,其胞外上清活性也逐渐提高,18 h胞外液活性达到最高。蛋白酶抑制剂(苯甲基磺酰氟,PMSF)对胞外液活性并没有表现出抑制作用,可能没有参与伴生过程。 展开更多
关键词 混菌发酵 地衣芽胞杆菌 氧化葡萄糖酸杆菌 2-酮基-L-古龙酸 蛋白酶
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可溶性重组人IL23R-CHR在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性研究
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作者 郭薇 王辰 +1 位作者 王宇恒 高向东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期583-588,共6页
利用人白细胞cDNA文库体外扩增获得hIL23R-CHR目的基因,克隆至原核表达载体pET22b/pET28a/pET32a,转化BL21(DE3)宿主菌,并对工程菌的表达方式(直接表达、可溶性标签融合表达、分泌表达及包涵体表达)及表达量进行比较,确立pET 32a为表达... 利用人白细胞cDNA文库体外扩增获得hIL23R-CHR目的基因,克隆至原核表达载体pET22b/pET28a/pET32a,转化BL21(DE3)宿主菌,并对工程菌的表达方式(直接表达、可溶性标签融合表达、分泌表达及包涵体表达)及表达量进行比较,确立pET 32a为表达载体,经IPTG诱导表达后通过镍亲和柱分离纯化融合蛋白Trx-IL23R-CHR,肠激酶4℃酶切Trx-IL23R-CHR分子24 h,上镍柱进行二次纯化,获得纯度达90%以上的rhIL23R-CHR分子。亲和力实验证实:原核重组表达的hIL23R-CHR与hIL23在物质的量比为1∶1时可以有效结合,小脑HE病理切片提示rhIL23R-CHR分子对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型鼠有一定的保护作用。 展开更多
关键词 IL-23 hIL23R-CHR 原核表达 分离纯化
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间充质干细胞在肿瘤靶向递药系统中的应用
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作者 赵月葵 唐珊珊 +2 位作者 张艳峰 宗莉 金亮 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期134-139,共6页
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层,属于多能干细胞,由于其具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低、肿瘤部位趋向性、取材方便、易于工业化制备等特征,有可能成为最... 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层,属于多能干细胞,由于其具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低、肿瘤部位趋向性、取材方便、易于工业化制备等特征,有可能成为最具临床应用前景的多能干细胞。本文介绍间充质干细胞的基本特性以及其在肿瘤靶向递药系统中的研究进展、临床应用现状,为间充质干细胞在肿瘤靶向递药系统中的进一步研究提供依据。 展开更多
关键词 间充质干细胞 靶向递送系统 抗肿瘤 应用
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稳定表达叶酸受体α的C26细胞株的建立
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作者 邱郑 邢黎军 +3 位作者 刘欣欣 张梅 张芳 王旻 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期644-647,共4页
目的建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究。方法采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pc DNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单... 目的建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究。方法采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pc DNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单克隆细胞株。利用反转录PCR及免疫荧光细胞化学染色检测稳定转染细胞中叶酸受体α基因的表达情况,并利用反转录PCR检测传代细胞中FRα基因表达的稳定性。结果经转染、G418筛选以及单克隆化操作,得到单克隆FRα基因稳定转染细胞株,所得单克隆稳定转染细胞株可表达FRαmRNA及蛋白,并能够在多次传代后保持表达的稳定性。结论成功构建了FRα稳定转染细胞株。 展开更多
关键词 叶酸受体Α 稳定转染 细胞株 表达鉴定
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HPLC法测定猪尿酸酶活性 被引量:3
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作者 陈思 李辉 +2 位作者 马娇颖 谢光蓉 陈建华 《化学与生物工程》 CAS 2012年第6期88-91,共4页
建立了一种测定重组猪尿酸酶活性的高效液相色谱方法。将重组猪尿酸酶基因工程菌的粗酶液与尿酸溶液反应5min,加入高氯酸溶液终止,经超滤后以体系中尿酸浓度的降低值为指标,采用HPLC法[色谱条件:AgilentZorbax 300SB-C18色谱柱、流动相... 建立了一种测定重组猪尿酸酶活性的高效液相色谱方法。将重组猪尿酸酶基因工程菌的粗酶液与尿酸溶液反应5min,加入高氯酸溶液终止,经超滤后以体系中尿酸浓度的降低值为指标,采用HPLC法[色谱条件:AgilentZorbax 300SB-C18色谱柱、流动相为磷酸-甲醇-双蒸水(3∶25∶472,体积比)、流速1.0mL·min-1、波长292nm]测定粗酶液活性。结果表明,尿酸在10~500μmol·L-1范围内线性关系良好,样品回收率在99%~104%之间。该方法不受杂质干扰、稳定、灵敏度高,适用于尿酸酶粗酶液活性的检测。 展开更多
关键词 基因工程菌 尿酸酶 酶活性 高效液相色谱
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1,3-二羟基丙酮的合成与应用研究进展 被引量:1
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作者 裴承强 陈建华 《化学与生物工程》 CAS 2014年第8期10-13,共4页
1,3-二羟基丙酮作为重要的化工医药中间体,广泛应用于化工、医药、化妆品和食品领域。主要综述了1,3-二羟基丙酮的合成方法,包括化学合成法和微生物合成法,并介绍了其在化工与医药领域的最新应用进展。
关键词 1 3-二羟基丙酮 化学合成 微生物合成 应用
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人Tfh细胞体外诱导分化条件的研究 被引量:2
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作者 陈语聪 郭薇 +4 位作者 雷雯 葛瑶瑶 薛文瑶 李倩文 高向东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期733-737,共5页
为深入研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)的分化调控机制,比较并建立了人Tfh细胞体外诱导分化的模型:分别采用外周血淋巴细胞直接分离以及磁珠分选后的细胞诱导分化,比较不同来源Na6ve T细胞的分化结果,同时探究了TCR刺激信号anti-h CD3e的固相... 为深入研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)的分化调控机制,比较并建立了人Tfh细胞体外诱导分化的模型:分别采用外周血淋巴细胞直接分离以及磁珠分选后的细胞诱导分化,比较不同来源Na6ve T细胞的分化结果,同时探究了TCR刺激信号anti-h CD3e的固相包被与可溶性刺激对分化效率的影响,并考察极化因子IL-12不同浓度诱导Tfh细胞分化效果,利用流式细胞术检测Tfh分化效率(CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+),结合ELISA法检测Tfh标志细胞因子IL-21的表达水平,最终确定了5μg/m L anti-h CD3e抗体预包被4℃过夜,磁珠分选后的T细胞在IL-12终浓度为1 ng/m L时与其他极化因子诱导分化6 d后,分化水平可达20.4%,初步建立了人Tfh细胞体外诱导分化最佳条件,为探讨人Tfh细胞分化机制及相关的靶向Tfh的分子药效、毒性与细胞水平的代谢实验提供了有效的检测平台。 展开更多
关键词 Tfh细胞 TCR信号 体外分化
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