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利用荧光指示分子IeGFP比较vip3A和cry1Ia基因启动子活性
被引量:
1
1
作者
高建华
欧阳春平
+7 位作者
钱红梅
刘小琼
郭俊佩
赵雄伟
王兴春
韩渊怀
李旭凯
侯思宇
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期617-626,共10页
苏云金芽孢杆菌(Bt)的Vip3A和Cry1Ia蛋白质序列无同源性,但具有其他相似的特征,例如在孢子形成早期合成,然后跨膜转运至胞外。本研究以新型融合荧光蛋白IeGFP为报告分子,比较vip3A(Pv)和cry1Ia基因(Pi)启动子的调控模式和活性。结果表明...
苏云金芽孢杆菌(Bt)的Vip3A和Cry1Ia蛋白质序列无同源性,但具有其他相似的特征,例如在孢子形成早期合成,然后跨膜转运至胞外。本研究以新型融合荧光蛋白IeGFP为报告分子,比较vip3A(Pv)和cry1Ia基因(Pi)启动子的调控模式和活性。结果表明,在大肠杆菌中,两者均为组成型启动子。通过荧光信号强度的比较发现,在大肠杆菌中,Pi活性显著强于乳糖操纵子调节基因启动子(PlacI,P<0.01),但比PlacI增强型突变体(PlacIq,P<0.01)和cry1Ac基因启动子(Pac,P<0.01)弱。在3个Bt启动子中,Pv活性最弱,接菌12 h后,与PlacI接近(P>0.05)。在Bt菌株中,Pv对IeGFP的表达调控与之前报道的Pi相似。启动子的Shine-Dalgarno(SD)序列与目的基因起始密码子(AUG)之间的间隔区域在调节细菌的蛋白质翻译效率方面发挥重要作用。本研究中构建的大部分Pv与Iegfp基因的间隔区域突变,均导致相应大肠杆菌和Bt细胞的荧光强度显著降低(P<0.05),说明融合荧光蛋白IeGFP具有较好的灵敏度。该研究不仅确定了2种启动子在Bt和大肠杆菌中的活性,而且验证了IeGFP指示弱启动子活性的可行性。
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关键词
苏云金芽孢杆菌
vip3A
cry1Ia
启动子活性
荧光强度
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职称材料
题名
利用荧光指示分子IeGFP比较vip3A和cry1Ia基因启动子活性
被引量:
1
1
作者
高建华
欧阳春平
钱红梅
刘小琼
郭俊佩
赵雄伟
王兴春
韩渊怀
李旭凯
侯思宇
机构
山西农业
大学
生命
科
学
学院
中国药科大学中药学院天然药物国家重点实验室
山西农业
大学
农
学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期617-626,共10页
基金
国家自然科学基金(No.31601690)
山西省应用基础研究面上青年基金项目(No.201901D211362)
山西农业大学科技创新基金项目(No.2017YJ27)资助。
文摘
苏云金芽孢杆菌(Bt)的Vip3A和Cry1Ia蛋白质序列无同源性,但具有其他相似的特征,例如在孢子形成早期合成,然后跨膜转运至胞外。本研究以新型融合荧光蛋白IeGFP为报告分子,比较vip3A(Pv)和cry1Ia基因(Pi)启动子的调控模式和活性。结果表明,在大肠杆菌中,两者均为组成型启动子。通过荧光信号强度的比较发现,在大肠杆菌中,Pi活性显著强于乳糖操纵子调节基因启动子(PlacI,P<0.01),但比PlacI增强型突变体(PlacIq,P<0.01)和cry1Ac基因启动子(Pac,P<0.01)弱。在3个Bt启动子中,Pv活性最弱,接菌12 h后,与PlacI接近(P>0.05)。在Bt菌株中,Pv对IeGFP的表达调控与之前报道的Pi相似。启动子的Shine-Dalgarno(SD)序列与目的基因起始密码子(AUG)之间的间隔区域在调节细菌的蛋白质翻译效率方面发挥重要作用。本研究中构建的大部分Pv与Iegfp基因的间隔区域突变,均导致相应大肠杆菌和Bt细胞的荧光强度显著降低(P<0.05),说明融合荧光蛋白IeGFP具有较好的灵敏度。该研究不仅确定了2种启动子在Bt和大肠杆菌中的活性,而且验证了IeGFP指示弱启动子活性的可行性。
关键词
苏云金芽孢杆菌
vip3A
cry1Ia
启动子活性
荧光强度
Keywords
Bacillus thuringiensis
vip3A
cry1Ia
promoter activity
fluorescent intensity
分类号
S182 [农业科学—农业基础科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用荧光指示分子IeGFP比较vip3A和cry1Ia基因启动子活性
高建华
欧阳春平
钱红梅
刘小琼
郭俊佩
赵雄伟
王兴春
韩渊怀
李旭凯
侯思宇
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
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