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RT-RAA-CRISPR/Cas12a试纸条法快速检测苹果坏死花叶病毒方法的建立
1
作者
王思元
侯雨萌
+4 位作者
董铮
赵振兴
王金国
周涛
张永江
《西南农业学报》
北大核心
2025年第5期920-926,共7页
【目的】苹果花叶病是苹果最重要的病害之一,苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus, ApNMV)是引起我国苹果花叶病的主要病原物。针对苹果坏死花叶病毒建立快速、灵敏的检测技术,旨在实现该病毒的早期鉴定和防控。【方法】将反...
【目的】苹果花叶病是苹果最重要的病害之一,苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus, ApNMV)是引起我国苹果花叶病的主要病原物。针对苹果坏死花叶病毒建立快速、灵敏的检测技术,旨在实现该病毒的早期鉴定和防控。【方法】将反转录重组酶等温扩增(Reverse transcription-recombinase aided amplification, RT-RAA)技术与CRISPR/Cas系统相结合,基于CRISPR/Cas12a系统的设计原则,设计特异性识别ApNMV RT-RAA扩增产物的crRNA,通过优化反应体系的报告分子浓度、反应温度和反应时间,获得最佳反应体系和反应条件,并利用侧流层析试纸条展示检测结果。【结果】RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的检测灵敏度是实时荧光定量RT-PCR方法的10倍,对苹果样品RNA的检测极限达到500 fg/μL,并且对其他常见苹果病毒没有交叉反应。使用该方法检测田间采集样品的阳性率高于普通RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR方法。【结论】基于RT-RAA-CRISPR/Cas12a建立的苹果坏死花叶病毒试纸条检测方法具有强特异性、高灵敏度。本研究为苹果坏死花叶病毒的田间现场诊断提供了新手段。
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关键词
苹果坏死花叶病毒
反转录重组酶等温扩增
CRISPR/Cas12a
现场检测
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职称材料
ED-Stacking:一种基于集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型构建方法
2
作者
李汉强
陈谊
+3 位作者
高宇飞
侯堃
宋丽萍
李静
《食品工业科技》
北大核心
2025年第6期43-55,共13页
当前技术条件下,微生物检测操作复杂、耗时长,导致了检测结果滞后且其样本数量有限的问题。本文提出了一种基于时间序列分解和集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型ED-Stacking构建方法,以便提前预警食品中的微生物风险。首先应用经...
当前技术条件下,微生物检测操作复杂、耗时长,导致了检测结果滞后且其样本数量有限的问题。本文提出了一种基于时间序列分解和集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型ED-Stacking构建方法,以便提前预警食品中的微生物风险。首先应用经验模态分解(EMD)、离散傅里叶变换(DFT)和加法模型构建时间序列分解方法(EMD-DFT),提取微生物生长时间序列中的趋势、周期和残差特征,为后续预测模型提供训练数据;然后利用这些特征数据对单层线性神经网络(SLN)、极端梯度提升树(XGBoost)和梯度提升回归树(GBRT)进行训练;最后,采用集成学习中的堆叠(Stacking)方法对训练好的三个模型进行融合,形成预测效果更优的微生物生长预测模型ED-Stacking。对比实验结果显示ED-Stacking在MAE和MSE两个指标上分别达到了0.229和0.147,预测误差低于SLN、XGBoost、GBRT、GRU和Transformer五个基线模型,即预测准确性更高。基于该模型对食品品质进行分类,分类的加权平均精准率Weighted-Precision达到98.80%。进而,还构建了一个食品微生物生长预测可视分析系统FMPvis,可以展示预测结果和食品品质分类结果,帮助用户分析各环境因子随时间的变化趋势及其对预测结果的影响程度,从而实现风险分析和预警。本文方法为食品微生物风险预警提供了一种新的思路和方法。
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关键词
食品安全
微生物生长预测
时间序列分解
集成学习
可视分析
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职称材料
论失信信息公开的制度内容、问题检视与制度完善
3
作者
闫小良
崔琦
《征信》
北大核心
2025年第3期1-9,共9页
失信信息公开具有声誉惩戒和公共警告的双重功能,并具有声誉罚、公共警告和行政强制三种公开目的。实践中,失信信息公开方式分为主动公开和被动公开。对于失信信息公开的法律性质,应认定为混合行政行为,即同时属于声誉罚、行政强制和事...
失信信息公开具有声誉惩戒和公共警告的双重功能,并具有声誉罚、公共警告和行政强制三种公开目的。实践中,失信信息公开方式分为主动公开和被动公开。对于失信信息公开的法律性质,应认定为混合行政行为,即同时属于声誉罚、行政强制和事实行为。当前,失信信息公开存在合法性不足、公开滥用、公开内容过于简略、公开程序不规范、修复机制不完善等问题,需要健全法律制度,补齐程序漏洞,明确失信信息的公开方式及内容,并健全失信信息公开的修复机制。
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关键词
失信信息公开
制度
信用规制
声誉惩戒
公共警告
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职称材料
题名
RT-RAA-CRISPR/Cas12a试纸条法快速检测苹果坏死花叶病毒方法的建立
1
作者
王思元
侯雨萌
董铮
赵振兴
王金国
周涛
张永江
机构
中国
检验检疫科学研究院
中国
农业大学
中国网络安全审查认证和市场监管大数据中心
出处
《西南农业学报》
北大核心
2025年第5期920-926,共7页
基金
国家重点研发计划资助项目(2023YFF0614400,2023YFF0614402)。
文摘
【目的】苹果花叶病是苹果最重要的病害之一,苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus, ApNMV)是引起我国苹果花叶病的主要病原物。针对苹果坏死花叶病毒建立快速、灵敏的检测技术,旨在实现该病毒的早期鉴定和防控。【方法】将反转录重组酶等温扩增(Reverse transcription-recombinase aided amplification, RT-RAA)技术与CRISPR/Cas系统相结合,基于CRISPR/Cas12a系统的设计原则,设计特异性识别ApNMV RT-RAA扩增产物的crRNA,通过优化反应体系的报告分子浓度、反应温度和反应时间,获得最佳反应体系和反应条件,并利用侧流层析试纸条展示检测结果。【结果】RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的检测灵敏度是实时荧光定量RT-PCR方法的10倍,对苹果样品RNA的检测极限达到500 fg/μL,并且对其他常见苹果病毒没有交叉反应。使用该方法检测田间采集样品的阳性率高于普通RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR方法。【结论】基于RT-RAA-CRISPR/Cas12a建立的苹果坏死花叶病毒试纸条检测方法具有强特异性、高灵敏度。本研究为苹果坏死花叶病毒的田间现场诊断提供了新手段。
关键词
苹果坏死花叶病毒
反转录重组酶等温扩增
CRISPR/Cas12a
现场检测
Keywords
Apple necrotic mosaic virus
Reverse transcription-recombinase aided amplification
CRISPR/Cas12a
On-site detection
分类号
S436.611.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
ED-Stacking:一种基于集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型构建方法
2
作者
李汉强
陈谊
高宇飞
侯堃
宋丽萍
李静
机构
北京工商大学计算机与人工智能学院
北京市食品检验研究院(北京市食品
安全
监控和风险评估
中心
)
中国网络安全审查认证和市场监管大数据中心
出处
《食品工业科技》
北大核心
2025年第6期43-55,共13页
基金
国家重点研发计划(2022YFF1100905)
国家自然科学基金项目(U23B2009)。
文摘
当前技术条件下,微生物检测操作复杂、耗时长,导致了检测结果滞后且其样本数量有限的问题。本文提出了一种基于时间序列分解和集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型ED-Stacking构建方法,以便提前预警食品中的微生物风险。首先应用经验模态分解(EMD)、离散傅里叶变换(DFT)和加法模型构建时间序列分解方法(EMD-DFT),提取微生物生长时间序列中的趋势、周期和残差特征,为后续预测模型提供训练数据;然后利用这些特征数据对单层线性神经网络(SLN)、极端梯度提升树(XGBoost)和梯度提升回归树(GBRT)进行训练;最后,采用集成学习中的堆叠(Stacking)方法对训练好的三个模型进行融合,形成预测效果更优的微生物生长预测模型ED-Stacking。对比实验结果显示ED-Stacking在MAE和MSE两个指标上分别达到了0.229和0.147,预测误差低于SLN、XGBoost、GBRT、GRU和Transformer五个基线模型,即预测准确性更高。基于该模型对食品品质进行分类,分类的加权平均精准率Weighted-Precision达到98.80%。进而,还构建了一个食品微生物生长预测可视分析系统FMPvis,可以展示预测结果和食品品质分类结果,帮助用户分析各环境因子随时间的变化趋势及其对预测结果的影响程度,从而实现风险分析和预警。本文方法为食品微生物风险预警提供了一种新的思路和方法。
关键词
食品安全
微生物生长预测
时间序列分解
集成学习
可视分析
Keywords
food safety
microbial growth prediction
time series decomposition
ensemble learning
visual analysis
分类号
TS207.7 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
论失信信息公开的制度内容、问题检视与制度完善
3
作者
闫小良
崔琦
机构
中国网络安全审查认证和市场监管大数据中心
出处
《征信》
北大核心
2025年第3期1-9,共9页
基金
国家重点研发计划“社会治理与智慧社会科技支撑(平安中国)”重点专项(2022YFC33024)。
文摘
失信信息公开具有声誉惩戒和公共警告的双重功能,并具有声誉罚、公共警告和行政强制三种公开目的。实践中,失信信息公开方式分为主动公开和被动公开。对于失信信息公开的法律性质,应认定为混合行政行为,即同时属于声誉罚、行政强制和事实行为。当前,失信信息公开存在合法性不足、公开滥用、公开内容过于简略、公开程序不规范、修复机制不完善等问题,需要健全法律制度,补齐程序漏洞,明确失信信息的公开方式及内容,并健全失信信息公开的修复机制。
关键词
失信信息公开
制度
信用规制
声誉惩戒
公共警告
Keywords
disclosure of dishonest information
system
credit regulation
defamation of reputation
public warning
分类号
F832.4 [经济管理—金融学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RT-RAA-CRISPR/Cas12a试纸条法快速检测苹果坏死花叶病毒方法的建立
王思元
侯雨萌
董铮
赵振兴
王金国
周涛
张永江
《西南农业学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
ED-Stacking:一种基于集成学习的小样本牛肉微生物生长预测模型构建方法
李汉强
陈谊
高宇飞
侯堃
宋丽萍
李静
《食品工业科技》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
论失信信息公开的制度内容、问题检视与制度完善
闫小良
崔琦
《征信》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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