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循环血miR-21在空间辐射监测中的应用潜力 被引量：3
1
作者 危文俊 华君瑞 +1 位作者 林素兰 王菊芳 《载人航天》 CSCD 2016年第6期714-719,731,共7页
深空探测中如何在辐射暴露早期用快速、简便的方法进行辐射损伤及风险评估问题，对传统的辐射剂量计提出巨大的挑战。循环血microRNA(miRNA)具有很好的特异性和稳定性，且积极响应外界环境变化，因此，筛选循环血中辐射敏感的miRNA,对... 深空探测中如何在辐射暴露早期用快速、简便的方法进行辐射损伤及风险评估问题，对传统的辐射剂量计提出巨大的挑战。循环血microRNA(miRNA)具有很好的特异性和稳定性，且积极响应外界环境变化，因此，筛选循环血中辐射敏感的miRNA,对开发基于血液的微创生物辐射标志物具有较大的研究意义和应用价值。本文利用X射线对昆明小鼠进行全身照射，24小时后取血，利用miRNAPCRarray的方法检测了21种候选miRNA的表达谱水平，发现多种miRNA对辐射有响应，其中miR-21具有较大的变化幅度。利用实时定量PCR分别验证了miR-21在不同射线（X射线、碳离子束、铁离子束）条件下的剂量效应和时间效应。检测了miR-21在相同和不同鼠龄小鼠个体间的本底表达水平。结果表明，miR-21在不同类型射线照射下表达水平都有升高的趋势，特别是对低剂量辐射也具有显著的响应，具有较强的剂量效应关系。在6.72小时内，其表达水平维持在一个稳定的阈值内。miR-21在相同和不同鼠龄小鼠个体间的本底表达水平不具有差异性,在血清样本的保存及RNA的提取过程中具有较强的稳定性。以上特征说明miR-21具有作为生物辐射剂量计并应用于辐射损伤检测的潜力。 展开更多
关键词 循环血 MIR-21 辐射 生物标志物 风险评估
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循环血microRNA对辐射和辐射防护药物的敏感性研究 被引量：2
2
作者 危文俊 李朋飞 +1 位作者 林素兰 王菊芳 《载人航天》 CSCD 2016年第2期246-253,共8页
循环血microRNA(miRNA)具有很好的特异性和稳定性,并且参与多种生物过程。通过表达谱筛选循环血中对辐射及辐射防护药物敏感的mi RNA,可以为循环血mi RNA作为辐射标志物及辐射防护药靶提供依据和参考。利用X射线和碳离子束对昆明小鼠进... 循环血microRNA(miRNA)具有很好的特异性和稳定性,并且参与多种生物过程。通过表达谱筛选循环血中对辐射及辐射防护药物敏感的mi RNA,可以为循环血mi RNA作为辐射标志物及辐射防护药靶提供依据和参考。利用X射线和碳离子束对昆明小鼠进行全身照射,采用实时定量PCR的方法研究了循环血中mi RNA对辐射的敏感性,发现循环血中多种mi RNA对辐射有响应,并且这些mi RNA大多与免疫系统和造血系统密切相关,其中的let-7a,mi R-223和mi R-574呈现出较强的辐射敏感性和较明显的剂量效应关系,具有作为辐射生物标志物的潜能;并利用当归多糖对小鼠进行灌胃,研究了其辐射防护特性,并且对给药组和未给药组小鼠在辐射处理后循环血中的mi RNA表达水平进行了比较。结果表明,当归多糖对辐射处理小鼠的免疫系统和造血系统具有显著的保护作用,给药组循环血中部分mi RNA表达变化趋势与未给药组明显不同,循环血中不同的mi RNA对辐射防护药物有不同的敏感性,或可作为辐射防护药物药靶使用。 展开更多
关键词 循环血microRNA 辐射 敏感性 药靶
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自噬调节电离辐射引起的神经胶质瘤细胞初级纤毛发生
3
作者 金亮亮 余斐斐 +2 位作者 张通珊 何进鹏 杨艳丽 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2024年第2期59-67,共9页
探讨自噬与电离辐射诱导人神经胶质瘤细胞初级纤毛发生的关系。神经胶质瘤细胞M059K和M059J进行10GyX射线照射或血清饥饿处理,免疫荧光法检测纤毛标志物Arl13b及基体结构蛋白γ-tubulin指示初级纤毛并统计纤毛发生率,免疫荧光法检测自... 探讨自噬与电离辐射诱导人神经胶质瘤细胞初级纤毛发生的关系。神经胶质瘤细胞M059K和M059J进行10GyX射线照射或血清饥饿处理,免疫荧光法检测纤毛标志物Arl13b及基体结构蛋白γ-tubulin指示初级纤毛并统计纤毛发生率,免疫荧光法检测自噬标志物LC3联合蛋白质免疫印迹法检测p62蛋白表达量评估细胞自噬水平,利用氯喹(CQ)或雷帕霉素(RAPA)抑制或激活自噬水平并检测对细胞纤毛发生的影响。结果显示:M059K细胞中具有纤毛的细胞比例约为40%,X射线照射处理后3d上升至75%以上(p<0.01),但M059J细胞中纤毛细胞的比例(约7%)在X射线处理后无明显变化,然而血清饥饿处理3 d时M059K和M059J中纤毛细胞的比例分别上升至约80%(p<0.01)和50%(p<0.01)。血清饥饿导致两种细胞的自噬水平均显著升高,但X射线照射仅引起M059K细胞自噬水平升高而对M059J细胞影响不明显。使用RAPA激活细胞自噬能够显著提高两种细胞中纤毛细胞的比例,而使用CQ抑制自噬能够降低X射线照射引起的M059K细胞纤毛发生或血清饥饿引起的M059J细胞纤毛发生。这些结果表明M059K和M059J细胞在X射线处理后自噬激活水平的差异可能是导致两种细胞在照射后纤毛发生情况不同的重要原因,提示自噬在电离辐射诱导神经胶质瘤细胞纤毛发生中发挥重要调节作用。 展开更多
关键词 自噬 电离辐射 初级纤毛 神经胶质瘤
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GANRA纳米药对淋巴母细胞的辐射防护作用及辐射敏感microRNA的影响 被引量：2
4
作者 林素兰 丁楠 +2 位作者 危文俊 何进鹏 王菊芳 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2017年第3期19-26,共8页
以淋巴母细胞(PENG-EBV)作为细胞模型,采用细胞增殖率检测、微核率检测以及胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量测定等方法检测GANRA纳米药对淋巴母细胞的毒性作用和辐射防护效果。同时,检测药物对淋巴母细胞中几种辐射敏感mic... 以淋巴母细胞(PENG-EBV)作为细胞模型,采用细胞增殖率检测、微核率检测以及胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量测定等方法检测GANRA纳米药对淋巴母细胞的毒性作用和辐射防护效果。同时,检测药物对淋巴母细胞中几种辐射敏感microRNA(miRNA)辐射的影响。实验结果表明:GANRA纳米药对淋巴母细胞没有毒性作用,且加药后对细胞增殖有促进作用;GANRA纳米药预处理可以缓解淋巴母细胞由X-射线产生的辐射损伤,提高辐照后细胞活性、细胞存活率以及降低细胞的微核形成率,并且对X-射线辐照产生的自由基具有良好的清除作用。此外,miR-150、miR-57、miR-223和miR-34a对GANRA纳米药具有敏感性,GANRA纳米药可能通过影响辐射敏感miRNA的表达发挥辐射防护作用。结果提示,改进后的GANRA纳米药物可以作为一种更有优势的辐射防护药物,并且给药后miRNA的差异性表达可能是GANRA纳米药物发挥作用的一种新机制。 展开更多
关键词 GANRA纳米药 X-射线 microRNA/miRNA 淋巴母细胞
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电离辐射促进神经胶质瘤细胞初级纤毛发生 被引量：3
5
作者 马伟 马青龙 +3 位作者 魏丽 华君瑞 何进鹏 王菊芳 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2021年第2期27-34,共8页
研究电离辐射对人类神经胶质瘤细胞初级纤毛发生及初级纤毛对细胞辐射敏感性的影响。对两种神经胶质瘤细胞系(M059K和M059J)进行不同剂量的X射线或碳离子束照射,通过免疫荧光法检测电离辐射后细胞初级纤毛的发生率和长度的变化,通过细... 研究电离辐射对人类神经胶质瘤细胞初级纤毛发生及初级纤毛对细胞辐射敏感性的影响。对两种神经胶质瘤细胞系(M059K和M059J)进行不同剂量的X射线或碳离子束照射,通过免疫荧光法检测电离辐射后细胞初级纤毛的发生率和长度的变化,通过细胞克隆存活实验检测siRNA(siIFT88)干扰IFT88基因抑制初级纤毛发生对细胞辐射敏感性的影响。结果表明:M059K和M059J细胞均具有初级纤毛,M059K细胞的初级纤毛发生率为(41.36±4.75)%,显著高于M059J细胞(8.07±1.58)%,两种细胞的纤毛平均长度均超过3μm,但M059J细胞对X射线和碳离子束的辐射敏感性更高;电离辐射能显著提高M059K细胞的初级纤毛发生率,10 Gy X射线照射时纤毛发生率接近60%,且X射线促进初级纤毛发生具有剂量和时间效应。通过转染siIFT88抑制初级纤毛能显著提高M059K细胞的辐射敏感性。因此,电离辐射能够促进人类神经胶质瘤细胞初级纤毛的发生,抑制初级纤毛发生能增强细胞的电离辐射敏感性。 展开更多
关键词 电离辐射 初级纤毛 神经胶质瘤 辐射敏感性
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碳离子诱发线粒体损伤抑制非小细胞肺癌细胞增殖机理
6
作者 张天意 杨鹏飞 +1 位作者 王菊芳 周珩 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2024年第4期64-74,共11页
以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,通过观察细胞的增殖抑制情况和线粒体的形态学变化、膜电位改变、膜相关蛋白释放以及线粒体自噬等现象,探讨碳离子通过影响线粒体功能抑制肺癌细胞A549增殖的机理。利用CCK-8细胞增殖检测法和细胞... 以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,通过观察细胞的增殖抑制情况和线粒体的形态学变化、膜电位改变、膜相关蛋白释放以及线粒体自噬等现象,探讨碳离子通过影响线粒体功能抑制肺癌细胞A549增殖的机理。利用CCK-8细胞增殖检测法和细胞克隆形成率检测法筛选得出半增殖抑制的碳离子照射剂量;通过线粒体膜特异性染料染色观察线粒体的形态学变化、分析膜电位的改变;利用蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR方法检测线粒体相关蛋白的表达量差异;通过流式细胞术检测细胞凋亡率;利用免疫荧光共定位与蛋白免疫印迹检测线粒体自噬;清除线粒体后再给予碳离子照射,观察细胞凋亡率的变化情况。结果表明:在4 Gy剂量照射下,A549细胞即可达到明显的增殖抑制。在此剂量照射下:线粒体形态皱缩;线粒体膜电位下降;线粒体膜孔蛋白Bax和Bak表达量上升,膜间蛋白Cyto-C和SMAC表达量上升,细胞凋亡率和线粒体自噬水平升高;当清除线粒体后,碳离子对A549细胞的凋亡水平无显著影响。碳离子能够抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖,在4 Gy剂量照射下即可达到半增殖抑制;当清除A549细胞的线粒体后,碳离子丧失其促细胞凋亡的作用。因此,碳离子通过引起线粒体膜电位的改变,释放促凋亡蛋白,抑制A549细胞的增殖。 展开更多
关键词 碳离子 线粒体损伤 线粒体自噬 线粒体依赖性细胞凋亡
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当归及当归多糖对X射线照射致SD大鼠免疫功能损伤的影响 被引量：26
7
作者 卢志伟 王磊 +5 位作者 许小敏 张利英 何进鹏 华君瑞 张艳辉 刘永琦 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第10期44-48,共5页
目的探讨当归及当归多糖对X射线照射致SD大鼠免疫功能损伤的防护作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、当归水煎液组、当归多糖组和阳性对照组。常规饲养14 d后,各给药组给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃... 目的探讨当归及当归多糖对X射线照射致SD大鼠免疫功能损伤的防护作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、当归水煎液组、当归多糖组和阳性对照组。常规饲养14 d后,各给药组给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续7 d。第8日除对照组外其余各组大鼠进行全身X射线照射,连续2 d,每日1次,每次3 Gy,总吸收剂量为6 Gy。辐射后第3日股动脉采血处死大鼠,血常规检测外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT),有核细胞计数法观察骨髓有核细胞数量,HE染色观察脾脏病理形态,ELISA检测血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4的含量。结果与对照组比较,模型组大鼠脾脏指数、血WBC、骨髓有核细胞数、血清IL-4和IFN-γ含量明显降低(P<0.05),RBC和HGB明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组血WBC、骨髓有核细胞数、血清IL-4和IFN-γ含量明显升高(P<0.05),RBC和HGB明显降低(P<0.05)。结论当归及当归多糖对X射线照射致SD大鼠免疫功能损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 当归 当归多糖 辐射 造血 免疫功能 大鼠
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基于数字图像处理的初级纤毛定量分析 被引量：1
8
作者 李金 杨鹏飞 +3 位作者 王菊芳 何进鹏 马伟 周珩 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期247-251,共5页
初级纤毛是一种由微管构成并突起于细胞表面的细胞器。初级纤毛的结构在某些疾病中会发生改变,特别对肿瘤的发生发展具有重要的影响。基于显微影响,分析初级纤毛的形态结构,有助于相关疾病的研究和诊断。传统分析方法主要采用Photoshop... 初级纤毛是一种由微管构成并突起于细胞表面的细胞器。初级纤毛的结构在某些疾病中会发生改变,特别对肿瘤的发生发展具有重要的影响。基于显微影响,分析初级纤毛的形态结构,有助于相关疾病的研究和诊断。传统分析方法主要采用Photoshop软件画线量取其长度指标,因此存在准确度低、重复性差、分析效率低等问题。本研究结合数字图像处理技术,应用色彩分离技术,将细胞与初级纤毛有效分离;并对比分析中值滤波、均值滤波、Sobel、Roberts、Prewitt、Log算子多种算法对初级纤毛形态边缘的保持效果,选取Prewitt、Log算子,改进并提升边界提取效果;再利用最大类间方差法去除杂质;最后通过连通域标记获得每个初级纤毛的周长与面积参数。与传统方法对比,本研究方法测量初级纤毛结构参数的时间由50~80 min减少为2 s,相对误差ω提高了19.08%以上,达到了快速精确测量的目的。 展开更多
关键词 初级纤毛 数字图像处理 滤波 连通域 特征提取
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