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家蚕近等基因系感染浓核病毒(BmDNV-Z)前后中肠组织蛋白的差异表达分析
被引量：
1
1
作者
赵云坡
李木旺
+1 位作者
黄勇平
苗雪霞
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期495-506,共12页
家蚕浓核病毒(BmDNV)是危害家蚕的主要病毒之一。为鉴定与家蚕抗病毒相关的蛋白质,以对BmDNV完全不感染的家蚕品种兰10(L10)为供体亲本,将其抗性基因导入家蚕敏感品种菁松(JS)中,构建抗性近等基因系NIL(BC6F2)。对JS及其近等基因系NIL...
家蚕浓核病毒(BmDNV)是危害家蚕的主要病毒之一。为鉴定与家蚕抗病毒相关的蛋白质,以对BmDNV完全不感染的家蚕品种兰10(L10)为供体亲本,将其抗性基因导入家蚕敏感品种菁松(JS)中,构建抗性近等基因系NIL(BC6F2)。对JS及其近等基因系NIL分别用家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)添毒,二者分别表现为高度敏感和完全不感染。对JS和NIL在病毒感染前后中肠组织蛋白双向电泳(2D-PAGE)图谱中的差异蛋白点进行串联质谱(MALDI-TOF-TOF)分析,共鉴定了41个差异表达的蛋白点,其中有35个蛋白点可能与病毒的诱导相关,有6个蛋白点可能与家蚕的组成抗性相关。鉴定的差异表达蛋白包括糖酵解酶类、能量代谢酶类、参与基因表达的蛋白质以及参与其它细胞功能的蛋白质等。选取10个差异表达蛋白点进行基因表达定量PCR分析,进一步确证了这些蛋白质在JS及其近等基因系NIL之间以及在病毒诱导前后的差异表达。例如:精氨酸激酶在NIL和JS中均可被诱导表达;V-ATP合成酶及热激蛋白HSP70只在NIL中被特异性诱导表达;烯醇化酶在NIL中的表达水平显著高于JS,且不能被病毒感染所诱导,是一个典型的组成抗性相关蛋白。鉴定出的41个差异表达蛋白点有可能参与了家蚕对BmDNV-Z的抗性。
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关键词
家蚕
近等基因系
差异表达蛋白
家蚕浓核病毒
抗性
双向电泳
串联质谱
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职称材料
哺乳动物N-糖基化途径中关键酶唾液酸合酶和CMP-唾液酸合成酶基因在转基因家蚕中的表达
2
作者
汪泰初
李瑞雪
+1 位作者
郭秋红
谭安江
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期853-858,共6页
对昆虫的N-糖基化途径进行修饰改变是扩展昆虫蛋白表达系统应用范围的重要途径。本研究利用基于piggyBac转座子的家蚕Bombyx mori转基因技术表达昆虫所缺乏的哺乳类糖基化途径中的关键基因,构建了可以同时表达小鼠Mus musculus唾液酸合...
对昆虫的N-糖基化途径进行修饰改变是扩展昆虫蛋白表达系统应用范围的重要途径。本研究利用基于piggyBac转座子的家蚕Bombyx mori转基因技术表达昆虫所缺乏的哺乳类糖基化途径中的关键基因,构建了可以同时表达小鼠Mus musculus唾液酸合酶和小鼠CMP-唾液酸合成酶两个基因的piggyBac表达载体,选用家蚕肌动蛋白A3启动子控制基因的表达,并导入3×P3启动子控制下的增强绿色荧光蛋白EGFP作为分子标记。在得到的G1代转基因家蚕中对转入的基因进行了分子水平的鉴定和分析,为在家蚕这种模式昆虫中模拟哺乳类糖基化途径奠定了基础。
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关键词
糖蛋白
N-糖基化途径
家蚕
转基因
唾液酸合酶
CMP-唾液酸合成酶
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职称材料
亚洲玉米螟piggyBac类似因子的克隆及序列分析
3
作者
刘丹
严善春
谭安江
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期35-43,共9页
为了深入了解piggyBac转座子家族的生物学特性及分子进化特点,采用简并PCR、反向PCR、RT-PCR和RACE等方法在农业害虫亚洲玉米螟中克隆到2个piggyBac类似因子,分别命名为OfPLE1和OfPLE2。利用生物信息学软件分析Of-PLE基因编码区序列结...
为了深入了解piggyBac转座子家族的生物学特性及分子进化特点,采用简并PCR、反向PCR、RT-PCR和RACE等方法在农业害虫亚洲玉米螟中克隆到2个piggyBac类似因子,分别命名为OfPLE1和OfPLE2。利用生物信息学软件分析Of-PLE基因编码区序列结构以及与其他物种的系统发育关系,结果表明,OfPLE1全长1 866 bp,编码607个氨基酸;OfPLE2全长1 724 bp,编码434个氨基酸。两者同源性高达70%,与粉纹夜蛾piggyBac同源性分别为32%和26%,亲缘关系较远。
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关键词
亚洲玉米螟
PIGGYBAC
克隆
序列分析
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职称材料
题名
家蚕近等基因系感染浓核病毒(BmDNV-Z)前后中肠组织蛋白的差异表达分析
被引量：
1
1
作者
赵云坡
李木旺
黄勇平
苗雪霞
机构
中国科学院昆虫发育与进化生物学重点实验室
中国科学院
研究生院
中国
农业
科学院
蚕业研究所
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期495-506,共12页
基金
国家自然科学基金项目(No.30870336)
文摘
家蚕浓核病毒(BmDNV)是危害家蚕的主要病毒之一。为鉴定与家蚕抗病毒相关的蛋白质,以对BmDNV完全不感染的家蚕品种兰10(L10)为供体亲本,将其抗性基因导入家蚕敏感品种菁松(JS)中,构建抗性近等基因系NIL(BC6F2)。对JS及其近等基因系NIL分别用家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)添毒,二者分别表现为高度敏感和完全不感染。对JS和NIL在病毒感染前后中肠组织蛋白双向电泳(2D-PAGE)图谱中的差异蛋白点进行串联质谱(MALDI-TOF-TOF)分析,共鉴定了41个差异表达的蛋白点,其中有35个蛋白点可能与病毒的诱导相关,有6个蛋白点可能与家蚕的组成抗性相关。鉴定的差异表达蛋白包括糖酵解酶类、能量代谢酶类、参与基因表达的蛋白质以及参与其它细胞功能的蛋白质等。选取10个差异表达蛋白点进行基因表达定量PCR分析,进一步确证了这些蛋白质在JS及其近等基因系NIL之间以及在病毒诱导前后的差异表达。例如:精氨酸激酶在NIL和JS中均可被诱导表达;V-ATP合成酶及热激蛋白HSP70只在NIL中被特异性诱导表达;烯醇化酶在NIL中的表达水平显著高于JS,且不能被病毒感染所诱导,是一个典型的组成抗性相关蛋白。鉴定出的41个差异表达蛋白点有可能参与了家蚕对BmDNV-Z的抗性。
关键词
家蚕
近等基因系
差异表达蛋白
家蚕浓核病毒
抗性
双向电泳
串联质谱
Keywords
Bombyx mori
Near-isogenic line
Differentially expressed protein
Bombyx mori densovirus
Resistance
Two-dimensional electrophoresis
Tandem mass spectrometry
分类号
S884 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
哺乳动物N-糖基化途径中关键酶唾液酸合酶和CMP-唾液酸合成酶基因在转基因家蚕中的表达
2
作者
汪泰初
李瑞雪
郭秋红
谭安江
机构
安徽省农业
科学院
蚕桑研究所
中国科学院
上海生命
科学
研究院植物生理生态研究所
昆虫
科学
研究中心
中国科学院昆虫发育与进化生物学重点实验室
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期853-858,共6页
基金
国家自然科学基金杰出青年项目(30825007)
国家自然科学基金重点项目(31030060)
+1 种基金
国家蚕桑产业技术体系合肥综合试验站(CARS-18)
安徽省蚕桑产业技术体系(ahnycytx-16)
文摘
对昆虫的N-糖基化途径进行修饰改变是扩展昆虫蛋白表达系统应用范围的重要途径。本研究利用基于piggyBac转座子的家蚕Bombyx mori转基因技术表达昆虫所缺乏的哺乳类糖基化途径中的关键基因,构建了可以同时表达小鼠Mus musculus唾液酸合酶和小鼠CMP-唾液酸合成酶两个基因的piggyBac表达载体,选用家蚕肌动蛋白A3启动子控制基因的表达,并导入3×P3启动子控制下的增强绿色荧光蛋白EGFP作为分子标记。在得到的G1代转基因家蚕中对转入的基因进行了分子水平的鉴定和分析,为在家蚕这种模式昆虫中模拟哺乳类糖基化途径奠定了基础。
关键词
糖蛋白
N-糖基化途径
家蚕
转基因
唾液酸合酶
CMP-唾液酸合成酶
Keywords
Glycoprotein
N-glycosylation
Bombyx mori
germline transformation
sialic acid synthase
CMP-sialic acid synthetase
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
亚洲玉米螟piggyBac类似因子的克隆及序列分析
3
作者
刘丹
严善春
谭安江
机构
东北林业大学林木遗传育种国家
重点
实验室
中国科学院
上海生命
科学
研究院植物生理生态研究所
昆虫
科学
研究中心
中国科学院昆虫发育与进化生物学重点实验室
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期35-43,共9页
基金
国家自然科学基金重点项目(31030060)
文摘
为了深入了解piggyBac转座子家族的生物学特性及分子进化特点,采用简并PCR、反向PCR、RT-PCR和RACE等方法在农业害虫亚洲玉米螟中克隆到2个piggyBac类似因子,分别命名为OfPLE1和OfPLE2。利用生物信息学软件分析Of-PLE基因编码区序列结构以及与其他物种的系统发育关系,结果表明,OfPLE1全长1 866 bp,编码607个氨基酸;OfPLE2全长1 724 bp,编码434个氨基酸。两者同源性高达70%,与粉纹夜蛾piggyBac同源性分别为32%和26%,亲缘关系较远。
关键词
亚洲玉米螟
PIGGYBAC
克隆
序列分析
Keywords
Ostrinia furnacalis
piggyBac
cloning
sequence analysis
分类号
S435.132 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家蚕近等基因系感染浓核病毒(BmDNV-Z)前后中肠组织蛋白的差异表达分析
赵云坡
李木旺
黄勇平
苗雪霞
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
哺乳动物N-糖基化途径中关键酶唾液酸合酶和CMP-唾液酸合成酶基因在转基因家蚕中的表达
汪泰初
李瑞雪
郭秋红
谭安江
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
亚洲玉米螟piggyBac类似因子的克隆及序列分析
刘丹
严善春
谭安江
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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