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题名伊枯草菌素A发酵过程中游离氨基酸的HPLC分析
被引量：2
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作者
赵杰
岳华
苟学磊
周金燕
谭红
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机构
中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与微生物重点实验室
中国科学院大学
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期151-158,共8页
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基金
国家重点研发计划(2017YFD0200900)
四川省科技支撑计划项目(2016NZ0032)
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文摘
建立一种快速、高效测定游离氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,并利用此方法分析检测iturin A发酵过程中游离氨基酸的动态变化。以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Venusil-AA(4.6 mm×250 mm,5μm)氨基酸分析专用柱,并优化HPLC检测色谱条件。结果表明:梯度洗脱程序、流动相pH值、色谱柱温对分析时间、色谱峰分离及峰型具有重要影响。当最优色谱条件为:流动相A为0.1 mol/L无水乙酸钠缓冲溶液(pH6.4±0.1)-乙腈(66∶5),流动相B为乙腈-水(4∶1),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,色谱柱温40℃,梯度程序洗脱,35 min内可完全分离16种氨基酸,且各氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9986),加标回收率在83.84%-108.02%之间,RSD值均小于2.77%。该方法耗时短、操作简便、准确可靠,具有良好的精密度和稳定性。通过此方法研究分析伊枯草菌素A发酵过程中各游离氨基酸含量变化规律,发现其氨基酸浓度变化规律大致分为三类。
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关键词
异硫氰酸苯酯
高效液相色谱法
游离氨基酸
伊枯草菌素A
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Keywords
phenylisothiocyanate
high performance liquid chromatography
free Amino acids
iturin A
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分类号
TQ920.1
[轻工技术与工程—发酵工程]
O657.72
[理学—分析化学]
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