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人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究
1
作者 邹新乐 李想 +1 位作者 陈巧林 曾令文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期544-547,共4页
目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血... 目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应最强的抗原表位多肽。进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平。结果:筛选到一条与RA患者血清反应最强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P<0.01)。抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%。而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义。结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 人内质网分子伴侣BiP蛋白 抗原表位 类风湿性关节炎 多肽抗体
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重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义 被引量：2
2
作者 陈巧林 李晶 +2 位作者 张翠华 何菁 栗占国 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1146-1149,共4页
目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转... 目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。 展开更多
关键词 Α-胞衬蛋白 干燥综合征 抗Α-胞衬蛋白抗体
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α-胞衬蛋白抗原多肽的筛选及其在干燥综合征临床诊断中的意义 被引量：1
3
作者 陈巧林 李想 +3 位作者 何文智 雷静 邹新乐 曾令文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1022-1025,共4页
目的:筛选鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白抗原多肽,进一步研究该抗原多肽在干燥综合征(SS)疾病临床诊断中的意义。方法:采用固相法合成α-胞衬蛋白第1～59位氨基酸区域的5条多肽,利用酶联免疫吸附法(ELISA)比较合成多肽与干燥综合征... 目的:筛选鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白抗原多肽,进一步研究该抗原多肽在干燥综合征(SS)疾病临床诊断中的意义。方法:采用固相法合成α-胞衬蛋白第1～59位氨基酸区域的5条多肽,利用酶联免疫吸附法(ELISA)比较合成多肽与干燥综合征患者血清IgG的反应强弱,确定最佳α-胞衬蛋白抗原多肽;以筛选出的最佳α-胞衬蛋白抗原多肽作为包被抗原,检测原发性SS患者135例,继发性SS患者25例,系统性红斑狼疮(SLE)患者48例,类风湿关节炎(RA)患者88例和正常人83例血清中的抗α-胞衬蛋白抗原多肽IgG抗体。结果:合成的5条多肽中有一条(F5)与SS血清IgG反应最强,抗F5多肽抗体(α-F5-PA)在原发性SS患者中的阳性率(78.5%)明显高于SLE(10.4%)、RA(21.6%)患者及正常人(6%)(P<0.01)。抗F5多肽抗体在原发性SS诊断中的敏感性为78.5%,特异性为86.8%,而且该抗体的检测对于SSA抗体、SSB抗体或ANA阴性的原发性SS患者的诊断具有补充作用。结论:F5多肽作为最佳α-胞衬蛋白抗原多肽。 展开更多
关键词 干燥综合征 α-胞衬蛋白抗原多肽 酶联免疫吸附法 SS患者
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