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蔗糖合成结构可控的功能性淀粉研究进展
1
作者
张学文
孙媛霞
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期37-48,共12页
功能性淀粉的开发和应用是食品和医药工业的研究热点之一,越来越受到消费者的青睐。酶法合成是获得功能性淀粉的有效途径,因其具有绿色环保、安全健康等特点受到多个领域学者的广泛关注。作者概述了蔗糖人工合成直链淀粉和高支化淀粉的...
功能性淀粉的开发和应用是食品和医药工业的研究热点之一,越来越受到消费者的青睐。酶法合成是获得功能性淀粉的有效途径,因其具有绿色环保、安全健康等特点受到多个领域学者的广泛关注。作者概述了蔗糖人工合成直链淀粉和高支化淀粉的结构调控原理,总结了淀粉蔗糖酶和糖原分支酶在功能性淀粉结构合成中的研究进展,阐述了直链淀粉和高支化淀粉在功能食品和医药领域中研究动态及应用前景,为功能性淀粉的进一步开发提供借鉴和参考。
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关键词
功能性淀粉
淀粉蔗糖酶
糖原分支酶
结构调控
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职称材料
C端非催化结构域对嗜热α-葡聚糖磷酸化酶TsGP酶学性质的影响
2
作者
陈亚利
王倩
+4 位作者
刘涵
宗志友
满淑丽
孙媛霞
陈朋
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2024年第22期131-140,共10页
为获得异源表达水平与酶学性质良好的α-葡聚糖磷酸化酶并考察结构域对酶的影响,研究通过数据库挖掘和序列分析,获得了来源于超级嗜热古菌Thermococcus sp.EP1的新型α-葡聚糖磷酸化酶TsGP。利用AlphaFold2预测三维结构确定TsGP的C端为...
为获得异源表达水平与酶学性质良好的α-葡聚糖磷酸化酶并考察结构域对酶的影响,研究通过数据库挖掘和序列分析,获得了来源于超级嗜热古菌Thermococcus sp.EP1的新型α-葡聚糖磷酸化酶TsGP。利用AlphaFold2预测三维结构确定TsGP的C端为非催化结构域后,构建了C端截短的突变体ΔTsGP。在E.coli BL21(DE3)中对TsGP与ΔTsGP进行异源重组表达,并对其酶学性质进行了表征。结果表明,ΔTsGP在大肠杆菌中的表达水平较TsGP提高了3.76倍。在最适反应温度为70℃时,ΔTsGP的比酶活为23.87 U/mg,较TsGP提高1.3倍。在50~65℃的工业酶催化条件下,ΔTsGP的热稳定性与TsGP相当,且酶活力更高。此外,ΔTsGP与TsGP具有相同的底物特异性,最小底物为麦芽三糖,且随着底物链长的增加,比酶活逐渐提升。以麦芽七糖为底物,ΔTsGP的kcat值为37.09 s^(−1),比TsGP提高了1.21倍,但底物亲和力(K_(m)=3.30 mmol/L)降低了2.77倍。研究通过结构分析与非催化结构域截短策略成功提高了TsGP在大肠杆菌中的表达水平和工业酶催化条件下的比酶活。这为αGP酶蛋白的高效表达与应用提供了借鉴,并为进一步通过工程改造优化其性能奠定了基础。
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关键词
嗜热
α-葡聚糖磷酸化酶
葡萄糖-1-磷酸
非催化结构域
蛋白截短
酶学性质
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职称材料
题名
蔗糖合成结构可控的功能性淀粉研究进展
1
作者
张学文
孙媛霞
机构
中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程研究中心
国家
合成
生物技术
创新
中心
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期37-48,共12页
基金
天津市合成生物学创新能力提升项目(TSBICIP-CXRC-012)
中科院-广西STS项目(KFJ-STS-QYZD-200)。
文摘
功能性淀粉的开发和应用是食品和医药工业的研究热点之一,越来越受到消费者的青睐。酶法合成是获得功能性淀粉的有效途径,因其具有绿色环保、安全健康等特点受到多个领域学者的广泛关注。作者概述了蔗糖人工合成直链淀粉和高支化淀粉的结构调控原理,总结了淀粉蔗糖酶和糖原分支酶在功能性淀粉结构合成中的研究进展,阐述了直链淀粉和高支化淀粉在功能食品和医药领域中研究动态及应用前景,为功能性淀粉的进一步开发提供借鉴和参考。
关键词
功能性淀粉
淀粉蔗糖酶
糖原分支酶
结构调控
Keywords
functional starch
amylosucrase
glycogen branching enzyme
structural regulation
分类号
Q814.9 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
C端非催化结构域对嗜热α-葡聚糖磷酸化酶TsGP酶学性质的影响
2
作者
陈亚利
王倩
刘涵
宗志友
满淑丽
孙媛霞
陈朋
机构
天津
科技大学
生物
工程
学院
中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程研究中心
出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2024年第22期131-140,共10页
基金
国家重点研发计划(2022YFC2104901)
国家自然科学基金(42106124)
天津市合成生物技术创新能力提升行动(TSBICIP-CXRC-077)。
文摘
为获得异源表达水平与酶学性质良好的α-葡聚糖磷酸化酶并考察结构域对酶的影响,研究通过数据库挖掘和序列分析,获得了来源于超级嗜热古菌Thermococcus sp.EP1的新型α-葡聚糖磷酸化酶TsGP。利用AlphaFold2预测三维结构确定TsGP的C端为非催化结构域后,构建了C端截短的突变体ΔTsGP。在E.coli BL21(DE3)中对TsGP与ΔTsGP进行异源重组表达,并对其酶学性质进行了表征。结果表明,ΔTsGP在大肠杆菌中的表达水平较TsGP提高了3.76倍。在最适反应温度为70℃时,ΔTsGP的比酶活为23.87 U/mg,较TsGP提高1.3倍。在50~65℃的工业酶催化条件下,ΔTsGP的热稳定性与TsGP相当,且酶活力更高。此外,ΔTsGP与TsGP具有相同的底物特异性,最小底物为麦芽三糖,且随着底物链长的增加,比酶活逐渐提升。以麦芽七糖为底物,ΔTsGP的kcat值为37.09 s^(−1),比TsGP提高了1.21倍,但底物亲和力(K_(m)=3.30 mmol/L)降低了2.77倍。研究通过结构分析与非催化结构域截短策略成功提高了TsGP在大肠杆菌中的表达水平和工业酶催化条件下的比酶活。这为αGP酶蛋白的高效表达与应用提供了借鉴,并为进一步通过工程改造优化其性能奠定了基础。
关键词
嗜热
α-葡聚糖磷酸化酶
葡萄糖-1-磷酸
非催化结构域
蛋白截短
酶学性质
Keywords
thermophilic alpha-glucan phosphorylase
glucose-1-phosphate
non-catalytic domain
protein truncation
enzy-matic properties
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蔗糖合成结构可控的功能性淀粉研究进展
张学文
孙媛霞
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
在线阅读
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职称材料
2
C端非催化结构域对嗜热α-葡聚糖磷酸化酶TsGP酶学性质的影响
陈亚利
王倩
刘涵
宗志友
满淑丽
孙媛霞
陈朋
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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