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题名一种高活性乙烯合成酶的鉴定和性质研究
被引量：1
- 1
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作者
苏宾宾
张佟佟
刘海萍
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机构
天津科技大学生物工程学院
中国科学院天津工业生物技术研究所化学生物学中心
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出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期54-58,共5页
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基金
中国科学院青年创新促进会课题基金项目(2015137,to H.L.)
天津市合成生物技术创新能力提升行动专项(TSBICIP-KJGG-002-02)。
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文摘
通过对不同微生物中乙烯合成酶(EFE)同源基因的筛选,成功获得了一种Neofusicoccum parvum(Np EFE)来源的高活性乙烯合成酶。以pET28a为载体成功实现了这种高活性efe基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的异源表达,并且对其纯酶酶学性质进行了研究分析。结果显示,该种属乙烯合成酶的酶比活力为(730.7±56.9)U/mg,催化反应最适pH值为7.5。酶动力学研究表明,对底物α-酮戊二酸,其K_(m)为155.7μmol/L,k_(cat)为51.4/min,对底物L-精氨酸,其K_(m)为139.7μmol/L,k_(cat)为53.4/min。与目前研究较为广泛的来源于Pseudomonas syringae(Ps EFE)的乙烯合成酶相比,在较高浓度的底物条件下,Np EFE酶活性约是Ps EFE的2倍,并且表现出较弱的底物抑制作用,这在未来生物乙烯生产的工业化应用中具有很大的潜力。
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关键词
乙烯合成酶
乙烯
底物抑制
α-酮戊二酸依赖酶
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Keywords
ethylene forming enzyme
ethylene
substrate inhibition
2-oxoglutarate dependent protein
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分类号
TQ221.211
[化学工程—有机化工]
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题名高活性和高热稳定性乙烯合成酶的筛选和鉴定
被引量：1
- 2
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作者
张晨
张佟佟
刘海萍
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机构
天津科技大学生物工程学院
中国科学院天津工业生物技术研究所化学生物学中心
国家合成生物技术创新中心
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期269-276,共8页
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基金
国家重点研发计划(2021YFA0910200)
基金委大科学装置联合基金(U1732264)
天津市合成生物技术创新能力提升行动专项(TSBICIP-KJGG-002)。
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文摘
乙烯合成酶(ethylene-forming enzyme,EFE)是潜在的乙烯生物合成关键酶,酶的高活性和高热稳定性是工业化应用的必要基础。根据进化树选取了6种乙烯合成酶候选基因,成功地进行了表达纯化并测定其活性和热稳定性。最终筛选到来源于Streptomyces bottropensis和 Streptomyces turgidiscabies的乙烯合成酶SbEFE和StEFE具有较高活性和热稳定性,酶比活分别是已报道的乙烯合成酶PsEFE的3.23和4.23倍。35℃水浴30 min后,酶活性仍可保留95.73%和88.22%,而PsEFE在相同条件下完全失活。酶动力学分析表明,SbEFE和StEFE催化反应的副产物也明显低于PsEFE。因此,SbEFE和StEFE是目前已发现的具有最高活性和热稳定性的乙烯合成酶,为深入研究乙烯合成酶的催化机制和应用工艺提供了新的基础。
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关键词
乙烯合成酶
催化活性
热稳定性
乙烯
动力学参数
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Keywords
ethylene-forming enzyme
catalytic activity
thermostability
ethylene
kinetic parameters
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
Q78
[生物学—分子生物学]
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