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利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究 被引量:7
1
作者 杨瑞丽 金勇丰 +2 位作者 吴玉澄 张耀洲 吴祥甫 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-178,共6页
就家蚕 / Bm NPV表达系统的原理及生产流程、外源基因在该系统中的表达及表达产物的药物开发作了较为详细的阐述 ,介绍了利用家蚕大量生产有用蛋白的技术开发状况 。
关键词 家蚕 BmNPV表达系统 生物反应器 蛋白质 技术开发
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宫颈癌固有荧光及其分子基础探讨研究 被引量:9
2
作者 连少辉 杨士珍 +5 位作者 林威 丁爱华 钮经义 王振亚 邓玉妹 戎春华 《量子电子学》 CSCD 1995年第2期174-177,共4页
在光作用下,宫颈癌组织发光特征峰主要在630nm和420nm附近。其发光与蛋白-卟啉结合物的敏化荧光特性基本相类同。
关键词 卟啉 癌固有荧光 敏化荧光 宫颈癌 子宫肿瘤
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“保01”防治橡胶树褐皮病及其作用机理的研究 被引量:13
3
作者 陈慕容 黄庆春 +3 位作者 叶沙冰 郑冠标 陈作义 沈菊英 《热带作物研究》 1992年第1期30-37,共8页
在橡胶树割线下方全树围环状刮皮,刮皮带宽约1厘米,并在其上涂施浓度为500μg/ml的“保01”药剂,施药间隔期为3个月1次。另一方法为割线涂药法,间隔期为1.5个月1次。这两种方法对橡胶树褐皮病均有良好的防治效果。在新开割幼树上施用“... 在橡胶树割线下方全树围环状刮皮,刮皮带宽约1厘米,并在其上涂施浓度为500μg/ml的“保01”药剂,施药间隔期为3个月1次。另一方法为割线涂药法,间隔期为1.5个月1次。这两种方法对橡胶树褐皮病均有良好的防治效果。在新开割幼树上施用“保01”,对褐皮病有更显著的预防效果。此药对中、轻病树有明显的控制和治疗作用。对因病停割树可在不同程度上恢复产胶能力。在预防性施用中,年度干胶增产5%以上,经济效益明显。品系反应以RRIM600、PB86、GT1等较好。PR107反应有时有地区性差异。“保01”防治褐皮病机理主要是通过抑制病原菌繁殖和生长,以致破坏菌体,使菌体崩解,从而达到防病增产的效果。 展开更多
关键词 橡胶树 褐皮病 农药 防治
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赤子爱胜蚓降血压成分的研究 被引量:4
4
作者 朱长连 冯红旗 +4 位作者 李伟 周元聪 朱洪 林南琴 张欣欣 《河南医学研究》 CAS 1993年第3期221-223,共3页
赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)组织匀浆抽提液,经过Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换、Sephadex G-10凝胶过滤及透析,得到具有强烈而持久的降血压组分B-I-b,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,B-I-b有二个分子量分别为... 赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)组织匀浆抽提液,经过Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换、Sephadex G-10凝胶过滤及透析,得到具有强烈而持久的降血压组分B-I-b,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,B-I-b有二个分子量分别为23 000和25 000的组分组成,其降血压作用的机理还需进一步探讨。 展开更多
关键词 蚯蚓 药物作用 降压作用 大鼠
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用计算机模拟研究人肿瘤坏死因子的结构功能 被引量:1
5
作者 陈建军 孙苗 +1 位作者 陈常庆 王德宝 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第2期6-12,5,共8页
人肿瘤坏死因子(humantumornecrosisfactor,hTNFα)的生物学活性是由两种不同受体(TNFR1/R55和TNFR2/R75)介导的。为了了解hTNFα与这两种受体相互作用的异同之处,以便指导hTNFα的蛋白质工程改造,根据LT与R55受体胞外区复合物的晶体结... 人肿瘤坏死因子(humantumornecrosisfactor,hTNFα)的生物学活性是由两种不同受体(TNFR1/R55和TNFR2/R75)介导的。为了了解hTNFα与这两种受体相互作用的异同之处,以便指导hTNFα的蛋白质工程改造,根据LT与R55受体胞外区复合物的晶体结构及hTNFα和LT与两种受体结合的相似性,预测了hTNFα与其两种受体胞外区形成复合物的三维结构模型。并根据所得的计算机模型,分析了hTNFα和受体结合前后的溶剂可及表面积的变化,以及受体与hTNFα之间可能形成的氢键、明显的静电作用和疏水作用。然后根据模型对hTNFα的结构-功能关系进行了分析,并以此为基础设计了几个新的hTNFα突变体。 展开更多
关键词 人肿瘤坏死因子 计算机模拟 结构功能关系
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高温DNA聚合酶I的Klenow片段在乙醇中变性的AFM研究 被引量:1
6
作者 陈圣福 徐磊 +3 位作者 欧阳振乾 张益 李民乾 洪国藩 《电子显微学报》 CAS CSCD 1997年第6期703-705,共3页
本文利用原子力显微镜(AFM),对高温DNA聚合酶I和普通E.coli的DNA聚合酶I的Klenow片段在乙醇中变性的对比研究,发现在两种DNA聚合酶中都存在结构较紧密的“核”。通过对吸附在云母上的两种酶进行1—10... 本文利用原子力显微镜(AFM),对高温DNA聚合酶I和普通E.coli的DNA聚合酶I的Klenow片段在乙醇中变性的对比研究,发现在两种DNA聚合酶中都存在结构较紧密的“核”。通过对吸附在云母上的两种酶进行1—10个小时的处理发现高温聚合酶大多由3块“核”组成,而普通的DNA聚合酶由2块“核”组成。这些“核”可能与蛋白的折叠过程中存在的相对稳定的结构区域有关,这对直观了解蛋白折叠过程有一定意义。 展开更多
关键词 AFM 乙醇 蛋白变性 DNA聚合酶I Klenow片断
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中华绒螯蟹颤抖病的一种病原特性初步研究 被引量:12
7
作者 薛仁宇 贡成良 +6 位作者 曹广力 魏育红 朱越雄 陈飞英 张唯 陈辉 吴祥甫 《水利渔业》 2000年第6期46-48,共3页
病毒球状、无囊膜 ,大小为 5 5nm左右 ,病毒核酸有 12个基因组片段 ,为 3/3/6型 ,总分子量 2 0kb左右。推测病毒核酸为RNA ,初步确定为呼肠孤病毒样病毒 (Reovirus -likeVirus)。
关键词 中华绒螯蟹 颤抖病 呼肠孤病毒样病毒 病原特性
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核糖核酸和焦炭酸二乙酯修饰影响ribozyme切割活性的初步研究
8
作者 黄扬中 任秀容 +2 位作者 祁国荣 王昌才 陆长德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第6期1-4,共4页
以抗HPV16E7-ribozyme作为研究模型,对影响ribozrme切割活性的一些因素进行了初步探讨。结果发现,核糖核酸(RNA)可以明显影响ribozyme的体外切割活性,且其活性随着加入反应的RNA量和RNA种类的不同而异,细胞内的RNA可能会明显影响... 以抗HPV16E7-ribozyme作为研究模型,对影响ribozrme切割活性的一些因素进行了初步探讨。结果发现,核糖核酸(RNA)可以明显影响ribozyme的体外切割活性,且其活性随着加入反应的RNA量和RNA种类的不同而异,细胞内的RNA可能会明显影响ribozyme的体内切割活性。另外,ribozyme的焦炭酸二乙酯修饰也可明显影响ribozyme的切割活性,说明ribozyme保守序列中的腺苷酸(A)对其活性的维持是重要的。 展开更多
关键词 RIBOZYME 修饰 核糖酸酸 焦炭酸二乙酯 切割活性
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单一粒度法研究固定化酶内扩散限制的酶应动力学
9
作者 邹文樵 冯仰婕 李冰 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期16-19,共4页
本文提出了用一种粒度的固定化酶,利用在高底物浓度与低底物浓度时分别表现为零级反应与一级反应的特点,研究在连续式反应器中内扩散限制下酶反应动力学的方法。通过在棒条状异构化酶上葡萄糖转化为果糖的反应,测求了酶反应的本征参数... 本文提出了用一种粒度的固定化酶,利用在高底物浓度与低底物浓度时分别表现为零级反应与一级反应的特点,研究在连续式反应器中内扩散限制下酶反应动力学的方法。通过在棒条状异构化酶上葡萄糖转化为果糖的反应,测求了酶反应的本征参数以及一级反应速度常数、表观米氏常数、底物扩散系数、效率因子等动力学参数。 展开更多
关键词 固定化酶 反应动力学
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壳聚糖固定化血红蛋白氧载体的制备和性能研究
10
作者 孟文芳 蔡谨 袁中一 《科技通报》 北大核心 2002年第5期355-359,共5页
以固定化血红蛋白为核心的氧载体研究 ,有望为航空航天、水下作业以及好氧生物发酵工业等领域提供有效的供氧体系 .以猪血红蛋白 (p Hb)和壳聚糖微粒为氧载体制备的基本原料 ,采用戊二醛活化法将 p Hb共价固定在壳聚糖微粒上 ,构成 p H... 以固定化血红蛋白为核心的氧载体研究 ,有望为航空航天、水下作业以及好氧生物发酵工业等领域提供有效的供氧体系 .以猪血红蛋白 (p Hb)和壳聚糖微粒为氧载体制备的基本原料 ,采用戊二醛活化法将 p Hb共价固定在壳聚糖微粒上 ,构成 p Hb氧载体 .研究了活化条件与载体表面醛基形成量及蛋白固定量之间的相互关系 ,对固定化反应条件进行了优化 .在 5%戊二醛浓度下活化反应 8h,获得 p Hb最大固定量约 80 0 mg/ g,即每克截体固定 80 0 mg p Hb.从 p Hb氧载体的氧释放曲线可知 ,氧释放效率可达 40 %左右 .该氧载体的结合稳定性较好 . 展开更多
关键词 制备 血红蛋白 壳聚糖 固定化 氧载体 供氧体系 氧释放能力 戊二醛活化法 载氧性能
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真核细胞DNA复制研究进展
11
作者 陆长德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第4期36-39,共4页
最近十年来真核细胞DNA复制研究取得了突破性的进展。首先,猿猴病毒40(SV40)体外DNA复制体系的建立促进了对参与DNA复制的酶及蛋白质因子的研究;其次,一些DNA复制的酶和蛋白质因子的cDNA及基因已克隆成功,这也为其功能和调控研究创造了... 最近十年来真核细胞DNA复制研究取得了突破性的进展。首先,猿猴病毒40(SV40)体外DNA复制体系的建立促进了对参与DNA复制的酶及蛋白质因子的研究;其次,一些DNA复制的酶和蛋白质因子的cDNA及基因已克隆成功,这也为其功能和调控研究创造了条件。此外,染色体DNA复制的起始,端区重复顺序的合成等研究也取得了一些新的进展。 SV40 DNA复制时,除了需要病毒编码的T抗原外,其他则利用宿主细胞的酶和复制因子。用带SV40复制起始顺序的质粒作模型,已从人培养细胞中鉴定了三种必需的蛋白质因子:PCNA、RF-C以及RP-A。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸 真核细胞 复制 DNA
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ELISA方法研究多糖与人干扰素-γ相互作用 被引量:6
12
作者 冯伟云 赵鲁杭 王克夷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第4期315-319,325,共6页
目的 :建立一种体外研究多糖与干扰素 - γ(Interferon- γ,IFN- γ)相互作用的 EL ISA方法。方法 :在硼氰氢化钠作用下合成肝素 -牛血清白蛋白复合物 (Heparin- BSA Complex,HBC) ,Sepharose4 B凝胶过滤系统分离纯化 HBC,并用 SDS- PAG... 目的 :建立一种体外研究多糖与干扰素 - γ(Interferon- γ,IFN- γ)相互作用的 EL ISA方法。方法 :在硼氰氢化钠作用下合成肝素 -牛血清白蛋白复合物 (Heparin- BSA Complex,HBC) ,Sepharose4 B凝胶过滤系统分离纯化 HBC,并用 SDS- PAGE鉴定。将 HBC(相当于 0 .5 μg蛋白含量 )包被在酶标板上 ,EL ISA方法检测 HBC与 IFN- γ的相互作用 ,并探讨游离肝素、低分子量肝素、硫酸软骨素 A、硫酸软骨素 C和透明质酸 ,以及卡拉胶等多糖对这种结合的影响。结果 :IFN- γ与 HBC的结合呈 IFN- γ剂量依赖性 ,2 ng左右达到饱和。游离肝素和低分子量肝素以及其他多糖均不同程度地抑制了 IFN- γ与 HBC的结合 ,肝素和低分子肝素的 IC50 分别为 2 .4 μg/ ml和 18.6 μg/ml。结论 :IFN- γ与肝素、卡拉胶高亲和力结合 ,而与硫酸软骨素 A、硫酸软骨素 C、透明质酸结合力极弱。EL ISA是一个简单。 展开更多
关键词 多糖类 干扰素Ⅰ型 肝素 药物相互作用 肝素一BSA复合物 干扰素-Γ 酶联免疫吸附测定
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正交晶型江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2初步结晶学研究 被引量:2
13
作者 孟五一 牛秀田 +4 位作者 桂璐璐 林政炯 朱洪 周元聪 李根培 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第10期946-949,共4页
The basic phospholipase A2 from the venom of Agkistrodon halys pallas possesses the ability to cause hemolysis in contrast to the other two phospholipase A2 from the same venom. A new form of crystals of this enzyme w... The basic phospholipase A2 from the venom of Agkistrodon halys pallas possesses the ability to cause hemolysis in contrast to the other two phospholipase A2 from the same venom. A new form of crystals of this enzyme was grown. The crystals belong to space group of P212121 with unit cell parameters of a=9. 175nm, b=10.080nm , c=2.287nm.The crystals diffract to high resolution, and are suitable for detailed structural studies. The data were collected up to 0.25nm resolutiorl using synchrotron radiation-imaging plate-Weissenberg camera system. Preliminary analysis reveals the presence of two molecules in the asymmetric uint and the molecule may pack with the smallest dimension approximately parallel to the c axis. The new crystal form is more attractive than the monoclinic one previously reported for crystallographic structure determination as it contains fewermolecules in the asymmetric unit. 展开更多
关键词 碱性磷脂酶A2 江浙蝮蛇毒 溶血作用 结晶学
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循环流液相等电聚焦方法及应用研究 被引量:1
14
作者 顾增旺 邵晓霞 +2 位作者 张丽华 屠红旻 夏其昌 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1994年第2期30-32,共3页
利用循环流液相等电聚焦技术,对Hb、Cyt.C和BSA混合物进行分离,对RNaseA粗制品进行精制。该方法上样量大,活性回收好。对聚焦过程中扩散、对流和电渗的影响进行了讨论。
关键词 循环流 液相 等电聚焦 分离 蛋白质
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赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究 被引量:5
15
作者 严民宏 王二力 +2 位作者 周元聪 陈远聪 陶宗晋 《华东化工学院学报》 CSCD 1991年第1期82-86,共5页
将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。
关键词 蚯蚓 纤维素酶 C1酶 CX酶 纯化
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高效液相色谱法分离和纯化促黄体素释放激素的研究
16
作者 陈小芬 魏远安 +1 位作者 金承德 方积年 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期101-103,共3页
促黄体素释放激素(LH-RH)能激发垂体前叶分泌促黄体素(LH)与促卵泡素(FSH),它在生物医学中有重要的理论意义和应用价值。建立快速的分析及纯化方法。
关键词 高效液相色谱 LHRH 分离 纯化
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乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因在酵母中的表达 被引量:10
17
作者 袁汉英 潘辉 +5 位作者 刘 婷 胡宝龙 李育阳 惠静毅 李光地 汪垣 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第10期35-39,共5页
利用基因工程技术,先将乙肝病毒表面抗原S-preSI融合基因SA-28置于酵母杂合启动子ADH2-SUC2的控制下,然后将SA-28基因的表达单元插入高稳定质粒PHCll的BamHI位点,构建成表达质粒YFD150和YFD150-o,并将其转化酿酒酵母Y19。对转... 利用基因工程技术,先将乙肝病毒表面抗原S-preSI融合基因SA-28置于酵母杂合启动子ADH2-SUC2的控制下,然后将SA-28基因的表达单元插入高稳定质粒PHCll的BamHI位点,构建成表达质粒YFD150和YFD150-o,并将其转化酿酒酵母Y19。对转化子表达SA-28基因的研究表明:表达受葡萄糖浓度调控;表达产物具有S和preS1双重抗原性,并形成密度为1.20—1.229/ml的颗粒。 展开更多
关键词 酵母 融合启动子 乙肝病毒 融合表面抗原
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人Cu,Zn-SOD在酵母系统中的表达 被引量:7
18
作者 施惠娟 陈哲宇 +3 位作者 李明峰 魏东芝 吴祥甫 袁勤生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期601-603,共3页
甲醇酵母 (Pichia pastoris)是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人 Cu,Zn- SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体 p PIC3.5K,经转化 his4缺陷型酵母 GS1 1 5,用 MD培养基及 PCR方法筛选阳性转化子 ,并用含 G41 8的 YPD培养基筛选多拷... 甲醇酵母 (Pichia pastoris)是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人 Cu,Zn- SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体 p PIC3.5K,经转化 his4缺陷型酵母 GS1 1 5,用 MD培养基及 PCR方法筛选阳性转化子 ,并用含 G41 8的 YPD培养基筛选多拷贝转化子 ,经甲醇诱导表达。 SDS-PAGE和蛋白质印迹杂交结果证实了表达产物为重组的人 Cu,Zn- SOD,经计算机扫描分析 ,表达量占酵母可溶性蛋白的 1 4% ,所表达的人 Cu,Zn- SOD比活可达每毫克蛋白质 77U。 展开更多
关键词 人Cu Zn-SOD 甲醇酵母 基因表达 蛋白质印迹
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棉花DNA导入苎麻的RAPD验证 被引量:8
19
作者 蒋建雄 张福泉 +2 位作者 李宗道 李贵成 周光宇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第1期34-36,共3页
为了寻找通过超干胚浸泡法已经将湘棉 12号 DNA导入苎麻湘苎 3号基因组中的分子证据 ,对所产生的变异后代进行了 RAPD验证 .所用 80个随机引物中 ,有 6个引物检测出变异材料 97- 2 4与受体的 DNA多态性 ,3个引物检测出变异材料 97- 2 8... 为了寻找通过超干胚浸泡法已经将湘棉 12号 DNA导入苎麻湘苎 3号基因组中的分子证据 ,对所产生的变异后代进行了 RAPD验证 .所用 80个随机引物中 ,有 6个引物检测出变异材料 97- 2 4与受体的 DNA多态性 ,3个引物检测出变异材料 97- 2 8与受体的多态性 ,4个引物检测出变异材料 97- 4与受体的多态性 ,并且有 2个引物在变异后代中扩增出供体特异带 .这些结果说明棉花 DNA导入苎麻后引起了后代基因组的变异 . 展开更多
关键词 苎麻 棉花 外源DNA RAPD技术 遗传变异
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毛细管电泳技术分析水稻中的总核糖核酸 被引量:5
20
作者 樊兴君 江舸 +1 位作者 金由辛 王德宝 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期167-169,共3页
通过高温干烤和焦碳酸二乙酯 (DEPC)两种技术除去核糖核酸 (RNA)酶 ,在保证RNA的稳定性的情况下 ,在1.0 %T ,0 %C的线性聚丙烯酰胺 (即丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量分数是 1.0 % ,交联度为 0 % )筛分介质中 ,利用无胶筛分毛细管电泳技... 通过高温干烤和焦碳酸二乙酯 (DEPC)两种技术除去核糖核酸 (RNA)酶 ,在保证RNA的稳定性的情况下 ,在1.0 %T ,0 %C的线性聚丙烯酰胺 (即丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量分数是 1.0 % ,交联度为 0 % )筛分介质中 ,利用无胶筛分毛细管电泳技术对水稻中的总RNA进行了分析 ,整个分析过程在 15min内完成。利用 5 .0 %T ,0 %C线性聚丙烯酰胺筛分介质 ,对水稻中的转移RNA(tRNA)进行了较为详细的分析 ,在 30min内可将tRNA分为两组共 9个峰。该方法可用于植物中RNA的分析 ,具有快速、准确的特点。 展开更多
关键词 毛细管电泳 水稻 总RNA 转移RNA 分析 生物化学
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