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NGX6基因转染对鼻咽癌细胞基因表达谱的影响 被引量:6
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作者 马健 周洁 +6 位作者 李小玲 龚佳蕾 何显锋 唐珂 阳剑波 胡赓熙 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期416-422,共7页
鼻咽癌是我国南方的常见肿瘤 .NGX6是新近克隆的定位于 9p2 1 2 2 ,在鼻咽癌组织中表达下调的基因 .初步的研究结果显示 ,NGX6基因转染鼻咽癌细胞HNE1能够延缓其生长速度 ,使肿瘤细胞更多地停留在G0 G1期 .为探索NGX6基因在鼻咽癌发... 鼻咽癌是我国南方的常见肿瘤 .NGX6是新近克隆的定位于 9p2 1 2 2 ,在鼻咽癌组织中表达下调的基因 .初步的研究结果显示 ,NGX6基因转染鼻咽癌细胞HNE1能够延缓其生长速度 ,使肿瘤细胞更多地停留在G0 G1期 .为探索NGX6基因在鼻咽癌发病机制中的作用 ,建立了高表达NGX6的鼻咽癌细胞系 .利用包含 14 0 0 0个基因的cDNA微阵列分析了NGX6基因转染对HNE1细胞基因表达谱的影响 ,发现NGX6基因的转染能够上调p2 9、APC7、NEU1、RNasek6、αE catenin和TFⅡEα等基因的表达 ;同时也下调properdinP因子、G0S2、BAZ2B、ZHX1,OS4和PBX3等基因的表达 .研究结果提示 ,NGX6基因对鼻咽癌细胞的生物学行为的影响可能与它对一些细胞周期调控因子和转录调控因子的影响相关 .作为一种高通量的分析技术 。 展开更多
关键词 NGX6 基因转染 鼻咽癌细胞 基因表达谱 CDNA微阵列 细胞周期
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青蒿琥酯对乳腺癌MCF-7细胞抗失巢凋亡的影响 被引量:25
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作者 范钰 郑树 赵刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期748-751,共4页
目的:探讨青蒿琥酯对乳腺癌细胞抗失巢凋亡的影响。方法:采用不同浓度的青蒿琥酯处理乳腺癌MCF-7细胞,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)法检测乳腺癌细胞抗失巢凋亡,采用软琼脂集落形成试验检测细胞的生长增殖... 目的:探讨青蒿琥酯对乳腺癌细胞抗失巢凋亡的影响。方法:采用不同浓度的青蒿琥酯处理乳腺癌MCF-7细胞,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)法检测乳腺癌细胞抗失巢凋亡,采用软琼脂集落形成试验检测细胞的生长增殖。结果:青蒿琥酯能有效地抑制乳腺癌MCF-7细胞锚着不依赖性增殖,且呈浓度依赖性。乳腺癌细胞经青蒿琥酯处理后,可促进失巢凋亡,且与时间和浓度相关。结论:青蒿琥酯可有效地抑制乳腺癌细胞锚着不依赖性增殖,其机制可能与促进失巢凋亡有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 蒿属 凋亡 MCF-7细胞
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蟾蜍灵对结肠癌SW-480细胞polo-like kinase-1表达及细胞凋亡的影响 被引量:15
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作者 范钰 郑树 赵刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期491-494,共4页
目的:观察蟾蜍灵对人结肠癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机理。方法:采用不同浓度的蟾蜍灵作用结肠癌SW-480细胞后,采用MTT法检测细胞的恶性增殖,分别采用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡情况,分别采用Westernblotting、North... 目的:观察蟾蜍灵对人结肠癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机理。方法:采用不同浓度的蟾蜍灵作用结肠癌SW-480细胞后,采用MTT法检测细胞的恶性增殖,分别采用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡情况,分别采用Westernblotting、Northernblotting分别检测polo-likekinase-1(PLK1)蛋白、mRNA水平。结果:蟾蜍灵能抑制结肠癌细胞的恶性增殖,且与浓度相关。蟾蜍灵能诱导结肠癌细胞凋亡,且呈浓度依赖性。流式细胞仪检测发现,蟾蜍灵将细胞阻滞在G2/M期。蟾蜍灵能下调结肠癌PLK1蛋白、mRNA水平,且呈药物浓度和作用时间依赖性。结论:蟾蜍灵有效地抑制结肠癌SW-480细胞增殖,其机制可能与其下调PLK1表达,从而诱导凋亡有关。 展开更多
关键词 蟾蜍科 结直肠肿瘤 细胞凋亡 细胞周期 SW-480细胞
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RARΒ基因转染对胃癌细胞株MKN-45凋亡和存活素及半胱氨酸酶的影响 被引量:8
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作者 范钰 郑树 赵刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2396-2400,共5页
目的:研究RARΒ受体基因转染后,全反式维甲酸(ATRA)对低维甲酸反应性胃癌细胞系MKN-45 细胞凋亡的影响和可能机制。方法:脂质体介导真核表达载体PCMV-SCRIPT-RARΒ转染MKN一45细胞株,筛选得到阳性克隆,WESTERN BLOTTING鉴定转染成功后给... 目的:研究RARΒ受体基因转染后,全反式维甲酸(ATRA)对低维甲酸反应性胃癌细胞系MKN-45 细胞凋亡的影响和可能机制。方法:脂质体介导真核表达载体PCMV-SCRIPT-RARΒ转染MKN一45细胞株,筛选得到阳性克隆,WESTERN BLOTTING鉴定转染成功后给予RARΒ受体相应配体ATRA,MTT法测定细胞增殖水平,分别采用 NORTHERN BLOTTING、WESTERN BLOTTING检测存活素(SURVIVIN)MRNA和蛋白水平,用酶标仪比色法检测半胱氨酸酶(CASPASE)活性,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:ATRA可使RARΒ受体高表达的MKN-45细胞株增殖减慢,能下调SURVIVIN MRNA和蛋白水平,增强CASPASE酶活性,并诱导胃癌细胞凋亡,效果呈浓度和作用时间依赖性。结论:RARΒ受体转染并结合使用相应配体ATRA可诱导MKN-45胃癌细胞凋亡,可能与下调SURVIVIN表达与增强CASPASE酶活性有关。 展开更多
关键词 基因转染 受体 维甲酸 细胞凋亡 存活素 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 胃肿瘤
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癌胚抗原启动子控制胞嘧啶脱氨酶基因体外对结肠癌细胞专一性杀伤 被引量:2
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作者 吴文溪 沈历宗 +3 位作者 刘新垣 许德华 丁强 华一兵 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第1期5-8,共4页
目的 :研究癌胚抗原 (CEA)启动子是否能控制大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (EC CD)基因在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤结肠癌细胞。方法 :构建由CEA启动子驱动的含EC CD基因的重组腺病毒载体AdCEACD与由巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的含EC... 目的 :研究癌胚抗原 (CEA)启动子是否能控制大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (EC CD)基因在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤结肠癌细胞。方法 :构建由CEA启动子驱动的含EC CD基因的重组腺病毒载体AdCEACD与由巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的含EC CD基因的腺病毒载体AdCMVCD ,分别感染CEA阳性的人结肠癌细胞株Lovo细胞和CEA阴性的Hela细胞 ,用RT PCR法检测受染细胞中EC CD基因的表达 ,并用MTT法检测感染后细胞对 5 氟胞嘧啶 (5 FC)的敏感性。结果 :Lovo细胞在AdCMVCD及AdCEACD感染后均有EC CDmRNA表达 ,且对 5 FC的敏感性明显增强 ,Hela细胞在AdCMVCD感染后有EC CDmRNA表达 ,对 5 FC的敏感性增强 ,而在AdCEACD感染后则没有EC CDmRNA表达 ,5 FC对其亦无杀伤作用。结论 :CEA启动子能够控制EC CD基因专一性地在CEA阳性的结肠癌细胞中表达 ,从而实现EC 展开更多
关键词 癌胚抗原 胞嘧啶脱氨酶 自杀基因 基因治疗 结肠癌
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鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定 被引量:2
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作者 张必成 周洁 +7 位作者 朱诗国 龚佳蕾 聂新民 吕红斌 何显锋 李小玲 胡赓熙 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期743-750,共8页
为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上... 为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为驱赶子 ,分别通过抑制性扣除杂交 ,构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1表达下调和表达上调的两个扣除cDNA文库 .从鼻咽癌相关的扣除cDNA文库中随机挑取 1 2 0 0个克隆 ,采用菌落PCR扩增其插入cDNA片段 ,自动点膜制备成cDNA微阵列膜 ,分别用鼻咽癌上皮细胞株HNE1、人胚鼻咽上皮mRNA经逆转录标记cDNA探针 ,分别与cDNA微阵列膜杂交 ,通过杂交信号的自动扫描分析 ,对杂交信号存在 5倍差异的克隆进行测序 ,获得了 1 0个鼻咽癌差异表达基因的cDNA片段 ,其中 3个为新基因序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 1 0 1 88、AF5 1 0 1 89和AF5 1 0 1 90 ,7个代表已知基因序列 .采用RT PCR证实S1 0 0A8,CK1 9和RBP1基因在人胚鼻咽上皮中高表达而在鼻咽癌细胞株HNE1中低表达 . 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞株HNEl 抑制性扣除杂交 CDNA微阵列 差异表达基因
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胞嘧啶脱氨酶基因联合干扰素-酌基因治疗大肠癌的实验研究 被引量:1
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作者 沈历宗 华一兵 +5 位作者 吴文溪 许德华 丁强 陈国玉 郑仲承 刘新垣 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期618-620,共3页
目的:研究胞嘧啶脱氨酶基因(EC鄄CD)联合干扰素-酌(INF鄄酌)基因对大肠癌的治疗作用。方法:以重组腺病毒载体AdCMVCD转导EC鄄CD基因;AdCMVINF鄄γ转导鼠INF鄄γ基因。采用体外培养和小鼠移植瘤实验,研究EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因对CT2... 目的:研究胞嘧啶脱氨酶基因(EC鄄CD)联合干扰素-酌(INF鄄酌)基因对大肠癌的治疗作用。方法:以重组腺病毒载体AdCMVCD转导EC鄄CD基因;AdCMVINF鄄γ转导鼠INF鄄γ基因。采用体外培养和小鼠移植瘤实验,研究EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因对CT26大肠癌细胞的杀伤作用。结果:AdCMVIFN鄄γ感染对CT26细胞生长有明显的抑制作用。AdCMVCD/5鄄FC联合AdCMVINF鄄γ可以增强对CT26细胞的杀伤作用,IC50明显变小(P<0.01),肿瘤生长明显抑制(P<0.01)。组织学检查显示,EC鄄CD基因与INF鄄γ基因联合治疗后肿瘤内有大量淋巴细胞浸润。结论:EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因可以明显增强抗肿瘤效应,局部淋巴细胞浸润增加可能起到一定作用。 展开更多
关键词 Γ基因 联合 CD基因 胞嘧啶脱氨酶基因 干扰素—γ 治疗 大肠癌 EC 增加 目的
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癌胚抗原启动子驱动的含大肠杆菌嘧啶脱氨酶自杀基因腺病毒载体的构建及初步鉴定 被引量:1
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作者 吴文溪 沈历宗 +4 位作者 丁强 许德华 郑仲承 刘新垣 姚堃 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期356-357,共2页
关键词 癌胚抗原 自杀基因 腺病毒载体 结肠肿瘤
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天花粉蛋白基因的克隆、表达和活性鉴定 被引量:1
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作者 蔡煊 胡拥军 +2 位作者 徐洪 俞吉安 孙兵 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1503-1505,共3页
用 PCR( Polymerase Chain Reaction)扩增出天花粉蛋白 ( Trichosanthin,TCS)基因全长序列 ,插入表达载体 .经双酶切鉴定及测序分析 ,表明阅读框正确 .表达 His- TCS活性融合蛋白并纯化天花粉蛋白 ,鉴定出其具有 RNA
关键词 天花粉蛋白 基因克隆 分离纯化 生物活性 基因表达 RNA N-糖苷酶活性 抗原抗体结合活性
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