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人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建
被引量:
1
1
作者
陈紫千
汤耀卿
+4 位作者
张奕
张轶
张圣道
刘新垣
邹卫国
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第9期720-722,共3页
目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA...
目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。
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关键词
IL—10
缺陷型
IL-10
重组腺病毒
体外感染
表达
DNA
阳性克隆
质粒
基因重组
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职称材料
题名
人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建
被引量:
1
1
作者
陈紫千
汤耀卿
张奕
张轶
张圣道
刘新垣
邹卫国
机构
上海
第二医科大学瑞金医院消化外科
中国科学院上海生命科学院细胞生化所
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第9期720-722,共3页
基金
上海市科委基金(00419019)资助项目.
文摘
目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。
关键词
IL—10
缺陷型
IL-10
重组腺病毒
体外感染
表达
DNA
阳性克隆
质粒
基因重组
Keywords
adenovirus vector
interleukin-10
gene expression
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建
陈紫千
汤耀卿
张奕
张轶
张圣道
刘新垣
邹卫国
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004
1
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