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腺病毒对内皮及成纤维细胞和血管环转染及基因表达的研究
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作者 穆军升 郑家豪 +3 位作者 朱洪生 山朝晖 许德华 刘新垣 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第3期221-224,共4页
目的 比较腺病毒对不同血管内皮及成纤维细胞的转染和对人冠状动脉搭桥动脉静脉血管的转导,为携带目的基因的腺病毒治疗血管狭窄提供更好的转染途径。方法 腺病毒Ad5CMVLacZ体外转染血管内皮细胞(HUVEC)和成纤维细胞(PA317)并间接... 目的 比较腺病毒对不同血管内皮及成纤维细胞的转染和对人冠状动脉搭桥动脉静脉血管的转导,为携带目的基因的腺病毒治疗血管狭窄提供更好的转染途径。方法 腺病毒Ad5CMVLacZ体外转染血管内皮细胞(HUVEC)和成纤维细胞(PA317)并间接转导入胸廓内动脉和大隐静脉血管环,运用β-半乳糖苷酶活性X-gal组织化学染色,观察转染情况,并进行动态分析。结果 腺病毒载体能使外源性基因有效地转入HUVEC、PA317及两种血管环并获得蛋白表达;两种血管环在转染10d后仍有β-半乳糖苷酶蛋白的表达,且大隐静脉有新内膜形成和中膜的增厚。结论 从细胞水平上证明腺病毒载体能将治疗性目的基因导入各种血管细胞及动静脉血管并获得表达,提示血管内膜和外膜都是腺病毒有效转染的途径;临床上无论动脉或静脉的血管狭窄都可能通过用腺病毒作为载体进行基因治疗和预防。 展开更多
关键词 腺病毒 内皮 成纤维细胞 血管环转染 基因表达 研究
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乙肝病毒核心抗原DNA疫苗诱导小鼠抗原特异性CD8^+T细胞动态变化和动态分布
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作者 张炜 董生福 +3 位作者 孙淑惠 汪垣 李光地 瞿涤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期379-383,共5页
目的 :研究乙肝病毒核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗诱导的细胞免疫应答。方法 :用表达乙肝病毒核心抗原N端1 4 4个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc1 4 4 ) 1 0 0 μg免疫C5 7BL 6小鼠 ,用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠体内抗原特异性CD8+ T细... 目的 :研究乙肝病毒核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗诱导的细胞免疫应答。方法 :用表达乙肝病毒核心抗原N端1 4 4个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc1 4 4 ) 1 0 0 μg免疫C5 7BL 6小鼠 ,用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠体内抗原特异性CD8+ T细胞的动态变化。结果 :pHBc1 4 4免疫后抗原特异性CD8+ T细胞逐渐增多 ,在初次免疫的第 1 4天出现第一个免疫应答高峰 ,此后抗原特异性CD8+ T细胞数量逐渐下降进入免疫记忆期并在 1年内维持在稳定水平。加强免疫后在第 1 0天抗原特异性CD8+ T细胞数量达到高峰 ,约是初次免疫应答高峰的 2倍 ,此后抗原特异性CD8+ T细胞数量逐渐下降 ,但下降的速度比初次免疫应答减缓。结论 :pHBc1 4 展开更多
关键词 乙肝病毒核心抗原 DNA疫苗
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波尔山羊的超数排卵研究 被引量:4
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作者 贾敏 吴建军 郭家友 《畜禽业》 2002年第11期10-12,共3页
在不同季节、应用不同FSH剂量对不同年龄、是否经产、不同体重以及不同利用次数的55头次波尔山羊进行超数排卵处理(其中10头波尔山羊为重复使用)。结果表明:在繁殖季节,应用FSH总剂量为200~300IU,年龄为2~5岁,经产的波尔山羊超排效果... 在不同季节、应用不同FSH剂量对不同年龄、是否经产、不同体重以及不同利用次数的55头次波尔山羊进行超数排卵处理(其中10头波尔山羊为重复使用)。结果表明:在繁殖季节,应用FSH总剂量为200~300IU,年龄为2~5岁,经产的波尔山羊超排效果好。每头平均获卵20.75枚。重复超数排卵的波尔山羊也具有较好的超排效果:第一次平均获卵21.9枚,第二次平均获卵17.8枚。 展开更多
关键词 波尔山羊 超数排卵 胚胎移植
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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 宋慧 张学荣 +2 位作者 周元聪 江涛 舒雨雁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期265-270,共6页
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL... 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。 展开更多
关键词 眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达
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波尔山羊批量胚胎移植 被引量:2
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作者 贾敏 吴建军 郭家友 《畜禽业》 2002年第10期Y002-Y003,共2页
波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率,本试验采用激素处理经产母波尔山羊,超数排卵,经与纯种公波尔山羊配种,手术从输卵管中冲出发育至2~8细胞的胚胎,再经手术移回同步发情的受体山东奶山羊输卵管内,妊娠产仔... 波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率,本试验采用激素处理经产母波尔山羊,超数排卵,经与纯种公波尔山羊配种,手术从输卵管中冲出发育至2~8细胞的胚胎,再经手术移回同步发情的受体山东奶山羊输卵管内,妊娠产仔。结果:(1)超排50头次波尔山羊(其中12头重复使用),获1179枚早期胚胎,其中2细胞以上的胚胎占84.8%(1000/1179);(2)移植480头受体;受体羊最终怀孕率56.25%(270/480),共产仔334头,其中产双胎的受体有64只,占妊娠羊数的23.7%(64/270);(3)羔羊出生重平均为(3.8±0.86)kg,最重达7.2kg。以上结果表明,每头次波尔山羊经过超数排卵、胚胎移植,平均可产6.68(344/50)头羔羊,若1年内1头波尔羊重复2次可获得13.4头羊羔,与常规育种相比极大地提高了纯种波尔山羊的繁殖速度。 展开更多
关键词 波尔山羊 胚胎移植 超数排卵 同步发情 快繁技术
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