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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达
被引量：
4
1
作者
宋慧
张学荣
+2 位作者
周元聪
江涛
舒雨雁
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期265-270,共6页
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL...
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。
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关键词
眼镜蛇
蛇毒
神经生长因子
蛋白表达
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职称材料
题名
广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达
被引量：
4
1
作者
宋慧
张学荣
周元聪
江涛
舒雨雁
机构
广西医科大学化学教研室
广西医科大学蛇毒
研究所
中国科学院上海生化与细胞研究所
中国科学院
生物物理
研究所
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期265-270,共6页
基金
国家自然科学基金(30270304)
广西省科学基金(桂科青0542043)
广西省科学基金(9811039)~~
文摘
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。
关键词
眼镜蛇
蛇毒
神经生长因子
蛋白表达
Keywords
Naja naja atra
cobra venom
nerve growth factor
protein expression
分类号
R99 [医药卫生—毒理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达
宋慧
张学荣
周元聪
江涛
舒雨雁
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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