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Eg5基因在神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡中的作用 被引量:1
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作者 朱凯 何晶晶 +5 位作者 章枭 王亮 孙华 徐兵 王忠荣 苏义林 《安徽医学》 2019年第12期1310-1314,共5页
目的探讨Eg5基因对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖和凋亡的影响。方法取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA(siRNA),分为细胞对照组(用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞)、siRNA对照组(转染siRNA对照)和s... 目的探讨Eg5基因对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖和凋亡的影响。方法取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA(siRNA),分为细胞对照组(用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞)、siRNA对照组(转染siRNA对照)和siRNA干扰组(转染Eg5 siRNA),每组6孔,每孔1×10^6个细胞。使用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测Eg5 mRNA表达水平的变化;使用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)掺入实验和克隆形成实验检测下调Eg5表达对NB细胞增殖的影响;使用流式细胞术检测下调Eg5表达对NB细胞凋亡和细胞周期的影响。结果荧光定量PCR检测结果显示,siRNA干扰组Eg5 mRNA表达水平与细胞对照组和siRNA对照组相比显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);EdU掺入实验和克隆形成结果表明,siRNA干扰组细胞中DNA的合成量和细胞克隆数量低于细胞对照和siRNA对照组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞的凋亡比率低于siRNA干扰组细胞的凋亡比率,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期的检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞中G0/G1期所占比率<50%,而siRNA干扰组细胞中G0/G1期所占比率>70%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在NB细胞中使用siRNA下调Eg5表达,能够抑制NB细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 小干扰RNA 增殖 Eg5 凋亡
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经脐腹腔镜手术治疗小儿肠套叠的疗效分析 被引量:15
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作者 余溪洋 苏义林 徐兵 《安徽医学》 2019年第11期1235-1237,共3页
目的研究应用腹腔镜治疗小儿急性肠套叠的价值。方法回顾性分析2015年6月到2018年6月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)50例肠套叠手术患儿的病例资料,其中25例行腹腔镜复位术(腹腔镜组),25例行传统开腹复位术(开腹组),比较... 目的研究应用腹腔镜治疗小儿急性肠套叠的价值。方法回顾性分析2015年6月到2018年6月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)50例肠套叠手术患儿的病例资料,其中25例行腹腔镜复位术(腹腔镜组),25例行传统开腹复位术(开腹组),比较两组患儿性别、体质量、年龄、发病时间、术前及术后血清C反应蛋白(CRP)水平、手术出血量、手术所需时间、术后下床活动时间、术后肛门通气时间以及并发症情况和住院时间的差异。结果腹腔镜组患儿手术所需时间、手术出血量及术后24小时CRP水平均低于传统手术组患儿,差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组患儿术后下床活动时间、术后肛门通气时间及住院时间均短于开腹组患儿,术后并发症发生例数少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后两组患儿均随访12个月,腹腔镜组患儿未有复发病例,开腹组有1例患儿因过敏性紫癜导致肠套叠复发。结论相比于传统的开腹手术,经脐腹腔镜手术治疗小儿急性肠套叠的效果较好。 展开更多
关键词 肠套叠 小儿 腹腔镜 复位术
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miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响 被引量:5
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作者 何晶晶 朱凯 《安徽医学》 2019年第9期961-965,共5页
目的探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细... 目的探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3'端非编码区(3'-UTR)的野生型(WT)和突变型(mut)荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Westernblot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义(P<0.05),选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3'-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3'-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-125a-5p 增殖 迁移 侵袭
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肿瘤干细胞标志物CD133和CD44在肾母细胞瘤中的表达及意义 被引量:4
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作者 陈天拓 何晶晶 +1 位作者 苏义林 朱凯 《安徽医学》 2018年第10期1194-1198,共5页
目的探讨肿瘤干细胞标志物CD133和CD44在肾母细胞瘤中的表达及其意义。方法收集2010年1月至2017年10月在安徽省立医院未行放化疗而直接进行手术治疗的肾母细胞瘤患者手术切除组织标本,病理诊断同步进行免疫组织化学方法检测组织中CD133... 目的探讨肿瘤干细胞标志物CD133和CD44在肾母细胞瘤中的表达及其意义。方法收集2010年1月至2017年10月在安徽省立医院未行放化疗而直接进行手术治疗的肾母细胞瘤患者手术切除组织标本,病理诊断同步进行免疫组织化学方法检测组织中CD133和CD44阳性信号强度和阳性细胞数目,计算免疫组织化学评分。同时收集临床病理参数,分析免疫组织化学评分与临床病理参数之间是否存在相关性。结果共收集肾母细胞瘤患儿64例,其中男性30例,女性34例。年龄中位数为36个月,其中46例年龄≤36个月,18例年龄> 36个月。肿瘤大小(最大直径) 2~19 cm,中位数为6. 5 cm,其中32例≤6. 5 cm,另外32例> 6. 5 cm。58例表现为预后好的病理特征,6例表现为预后差的病理特征。根据NWTS的分期,24例为1期,26例为2期,4例为3期,8例为4期,2例为5期。免疫组织化学评分结果显示,44%(28/64)的标本为CD133阳性,13%(8/64)的标本为CD44阳性。CD133的免疫组织化学评分与肾母细胞瘤NWTS分期有正相关性(r=0. 813,P <0. 05);在女童中CD133评分高于男童(P <0. 05);CD133评分与患者的年龄、肿瘤的大小及病理特征无相关性(P> 0. 05)。结论 CD133在肾母细胞瘤中高表达,其表达水平与肾母细胞瘤的发生及恶性程度存在关系。 展开更多
关键词 肾母细胞瘤 肿瘤干细胞 分化抗原簇蛋白133 分化抗原簇蛋白44
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腹腔镜与开放手术治疗肥厚性幽门狭窄的效果比较 被引量:3
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作者 吕文强 苏义林 王亮 《安徽医学》 2021年第4期374-377,共4页
目的比较腹腔镜幽门环肌切开术和开放手术治疗肥厚性幽门狭窄(HPS)的效果。方法回顾性分析2015年7月至2019年12月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)儿外科收拾的65例HPS患儿的临床资料,根据手术方式的不同,分为腹腔镜组(n=37... 目的比较腹腔镜幽门环肌切开术和开放手术治疗肥厚性幽门狭窄(HPS)的效果。方法回顾性分析2015年7月至2019年12月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)儿外科收拾的65例HPS患儿的临床资料,根据手术方式的不同,分为腹腔镜组(n=37)与开放手术组(n=28)。评估两组患儿手术效果及预后,并比较两组患儿术中出血、手术时间、总住院时间、术后住院时间及并发症情况的差异;根据患儿术前是否输液治疗,分为输液组(n=14)与未输液组(n=50),分析比较两组患儿实验室指标的差异。结果65例患儿均获得成功,无复发病例,2例腹腔镜患者中转开腹手术(1例因黏膜破损,1例因腹腔肠管胀气操作空间不足)。腹腔镜组患儿总住院时间为(9.73±3.24)d,手术后住院时间为(5.81±1.97)d,均低于开放组,差异有统计学意义(P<0.05);输液组患儿血清钠水平为(137.54±2.67)mmol/L,氯为(98.76±5.39)mmol/L,渗透压为(271.67±5.33)mmol/L,均高于未输液组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论2种手术方式治疗HPS均安全有效,而腹腔镜幽门环肌切开术能减少总住院时间,术后康复更快;对HPS患者尽早进行液体复苏有利于纠正电解质紊乱。 展开更多
关键词 腹腔镜 肥厚性幽门狭窄 幽门环肌切开术
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转染IGF2BP3基因siRNA和真核表达质粒的神经母细胞瘤细胞侵袭凋亡变化观察
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作者 朱凯 王志茹 +1 位作者 高婷婷 吕志宝 《山东医药》 CAS 2023年第27期1-6,共6页
目的观察转染胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)基因siRNA和真核表达质粒的神经母细胞瘤(NB)细胞侵袭凋亡变化,以探讨IGF2BP3基因对NB细胞侵袭和凋亡的影响。方法选取NB细胞株IMR-32、SK-N-BE(2)、BE(2)-C、SH-SY-5Y,采用qRT-PC... 目的观察转染胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)基因siRNA和真核表达质粒的神经母细胞瘤(NB)细胞侵袭凋亡变化,以探讨IGF2BP3基因对NB细胞侵袭和凋亡的影响。方法选取NB细胞株IMR-32、SK-N-BE(2)、BE(2)-C、SH-SY-5Y,采用qRT-PCR检测IGF2BP3 mRNA、Western blotting法检测IGF2BP3蛋白、Transwell实验观察NB细胞的体外侵袭能力。根据上述实验结果,选择IGF2BP3表达水平最高的SK-N-BE(2)细胞及IGF2BP3表达水平最低的IMR-32细胞作为后续实验细胞。SK-N-BE(2)细胞转染针对IGF2BP3基因的小干扰RNA(siRNA)(SK-siIGF2BP3组),并设立细胞对照组(SK-Control组,只含有脂质体)和siRNA对照组(SK-siNC组,转染阴性对照序列)。IMR-32细胞转染IGF2BP3真核表达质粒(IMR-IGF2BP3组),并设立细胞对照组(IMR-Control组,只含有脂质体)和空载体对照组(IMR-Vector组,转染空载体)。转染成功后,采用qRT-PCR、Western blotting法和细胞免疫荧光染色法检测各组IGF2BP3 mRNA及蛋白,Transwell实验观察各组细胞侵袭能力,流式细胞术测算各组NB细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞侵袭相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin。结果与SKControl组和SK-siNC组相比,SK-siIGF2BP3组IGF2BP3 mRNA、蛋白相对表达量降低,穿越Transwell小室膜细胞数减少,凋亡率升高(P均<0.05);与IMR-Control组和IMR-Vector组相比,IMR-IGF2BP3组IGF2BP3 mRNA、蛋白相对表达量升高,穿越Transwell小室膜细胞数增加,凋亡率降低(P均<0.05)。在SK-N-BE(2)细胞中,与SK-siNC组及SK-Control组比较,SK-siIGF2BP3组中N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量下降,E-cadherin蛋白相对表达量上升(P均<0.05);在IMR-32细胞中,与IMR-Vector组、IMR-Control组比较,IMR-IGF2BP3组N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量升高,E-cadherin蛋白相对表达量下降(P均<0.05)。结论转染IGF2BP3基因siRNA的NB细胞侵袭能力减弱、凋亡率增加,转染IGF2BP3真核表达质粒的NB细胞侵袭能力增强、凋亡率降低。 展开更多
关键词 核糖核酸m6A甲基化读取器 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白家族 神经母细胞瘤 小干扰核糖核酸 细胞侵袭 细胞凋亡
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