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HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力
1
作者
刘帅
伊梦楠
+3 位作者
焦博
王燚灿
陈圆圆
戴宇飞
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期2163-2167,共5页
目的:建立弱酸处理后细胞表面HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力,并评估其实用性。方法:采用不同pH的柠檬酸缓冲液处理高表达HLA-B*1301的C1R细胞不同时间,中和pH后用含β2m蛋白、布雷非德菌素A的培养液重悬细胞,加入多肽(多肽...
目的:建立弱酸处理后细胞表面HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力,并评估其实用性。方法:采用不同pH的柠檬酸缓冲液处理高表达HLA-B*1301的C1R细胞不同时间,中和pH后用含β2m蛋白、布雷非德菌素A的培养液重悬细胞,加入多肽(多肽组)或不加多肽(空白对照)37℃孵育,加入抗HLA抗体后采用流式细胞术检测,以多肽组与空白对照组荧光强度的比值作为衡量HLA分子重构水平强弱的指标,进而代表多肽与HLA-B*1301分子的结合力。结果:pH3.0的缓冲液处理1 min的条件下,HLA-多肽复合物变性解离,细胞表面只保留HLA重链分子,添加具有结合力的多肽可显著提升HLA分子重构水平,可以此评价多肽与HLA-B*1301的结合力。结论:HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力操作简便,结果可靠,也可为研究其他低频HLA分子抗原递呈模式提供参考。
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关键词
HLA
多肽
分子重构
结合力
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题名
HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力
1
作者
刘帅
伊梦楠
焦博
王燚灿
陈圆圆
戴宇飞
机构
中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染物与健康重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期2163-2167,共5页
基金
国家自然科学基金(82073595)。
文摘
目的:建立弱酸处理后细胞表面HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力,并评估其实用性。方法:采用不同pH的柠檬酸缓冲液处理高表达HLA-B*1301的C1R细胞不同时间,中和pH后用含β2m蛋白、布雷非德菌素A的培养液重悬细胞,加入多肽(多肽组)或不加多肽(空白对照)37℃孵育,加入抗HLA抗体后采用流式细胞术检测,以多肽组与空白对照组荧光强度的比值作为衡量HLA分子重构水平强弱的指标,进而代表多肽与HLA-B*1301分子的结合力。结果:pH3.0的缓冲液处理1 min的条件下,HLA-多肽复合物变性解离,细胞表面只保留HLA重链分子,添加具有结合力的多肽可显著提升HLA分子重构水平,可以此评价多肽与HLA-B*1301的结合力。结论:HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力操作简便,结果可靠,也可为研究其他低频HLA分子抗原递呈模式提供参考。
关键词
HLA
多肽
分子重构
结合力
Keywords
HLA
Peptides
Molecular reconstruction
Binding affinity
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力
刘帅
伊梦楠
焦博
王燚灿
陈圆圆
戴宇飞
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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