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一种用于贴壁培养细胞感染病毒检测的简易光镜-电镜联用技术 被引量:2
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作者 冯红丽 彭宇宁 宋敬东 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期86-93,共8页
目的:建立一种简单易行的适用于病毒检测的光镜-电镜联用技术。方法:使用Lab-Tek腔室玻片培养细胞并接种不同类型病毒,通过光学显微镜选取目标病变细胞或通过荧光蛋白、免疫细胞化学标记、免疫荧光标记、量子点标记确定目标细胞并在腔... 目的:建立一种简单易行的适用于病毒检测的光镜-电镜联用技术。方法:使用Lab-Tek腔室玻片培养细胞并接种不同类型病毒,通过光学显微镜选取目标病变细胞或通过荧光蛋白、免疫细胞化学标记、免疫荧光标记、量子点标记确定目标细胞并在腔室玻片上标记其部位。随后将腔室玻片改造为包埋模具,最后钻取目标细胞及其包埋树脂,并对目标细胞进行靶向性超薄切片及透射电子显微镜观察。结果:光镜下选取的目标细胞在透射电子显微镜下可顺利定位并进行观察。结论:建立了一种基于腔室玻片包埋模具的可用于病毒检测的光镜-电镜联用技术。 展开更多
关键词 透射电子显微镜 光镜-电镜联用技术 病毒 检测
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H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法的建立 被引量:5
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作者 董志珍 郑文杰 +7 位作者 王乃福 赵祥平 吴冬雪 王玉玲 马晶 贾润清 王建华 张晓光 《中国动物检疫》 CAS 2013年第7期72-77,共6页
目的建立H7N9禽流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法从GISAID数据库中获得H7N9禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引... 目的建立H7N9禽流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法从GISAID数据库中获得H7N9禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物,同时以所克隆的阳性质粒为模板,建立H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法。结果LAMP检测方法对H7N9禽流感病毒的灵敏度达到10个拷贝,所用引物对于H1、H3、H5亚型禽流感病毒和新城疫病毒无非特异性扩增,表现出良好特异性。结论建立的H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强,为快速检测禽流感病毒提供了新方法。 展开更多
关键词 H7N9 禽流感病毒 等温扩增
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医学病毒形态识别中的假象
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作者 宋敬东 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期386-399,共14页
基于透射电子显微镜负染技术和超薄切片技术的病毒形态识别是病毒鉴定的重要手段,病毒的形态识别在病毒相关的科研工作及重大疫情、生物恐怖事件的病原体鉴定中均发挥重要的作用。但是,无论负染样本中还是超薄切片上有时存在类似病毒结... 基于透射电子显微镜负染技术和超薄切片技术的病毒形态识别是病毒鉴定的重要手段,病毒的形态识别在病毒相关的科研工作及重大疫情、生物恐怖事件的病原体鉴定中均发挥重要的作用。但是,无论负染样本中还是超薄切片上有时存在类似病毒结构的假象,往往导致误判。本文对负染样本、超薄切片样本中常见的医学病毒类似结构的假象结构进行列举,包括噬菌体、球形杂质颗粒、线粒体成分、支原体、网格蛋白及非网格蛋白包被囊泡、多泡体、高尔基体运输囊泡、糖原颗粒、微管、染色质周围颗粒、核孔、微绒毛、分泌泡和胶原原纤维等结构,期望为医学病毒形态判定提供一定的思路。 展开更多
关键词 透射电子显微镜技术 医学病毒 形态 假象 鉴别
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金荞麦HPLC条件优化及表儿茶素鉴定研究 被引量:3
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作者 吴海涛 陈玥 +1 位作者 杨微 吴灵玉 《黑龙江八一农垦大学学报》 2022年第4期80-86,133,共8页
采用薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)技术,对金荞麦药材醇提物中的黄烷醇类成分进行分析和鉴别,并对药典方法中的HPLC条件进行优化(如流动相种类、洗脱方式、检测波长)。色谱条件为:采用Symmetry C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱... 采用薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)技术,对金荞麦药材醇提物中的黄烷醇类成分进行分析和鉴别,并对药典方法中的HPLC条件进行优化(如流动相种类、洗脱方式、检测波长)。色谱条件为:采用Symmetry C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲酸水溶液(pH=3.0)等度洗脱,7.5∶92.5的比例,1.0 mL·min^(-1)的流速,280 nm的检测波长,35℃的柱温。结果表明,金荞麦提取物和表儿茶素标准品溶液在相同的保留时间下有相同的峰出现。方法准确可靠,重现性好,可用于金荞麦片的质量控制检测。 展开更多
关键词 金荞麦 薄层层析 高效液相色谱 表儿茶素
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人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用
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作者 徐琨 王新 +7 位作者 田婵 石崧 王桂荣 石琦 周瑞敏 姜惠英 楚雍烈 董小平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期32-35,46,共5页
目的体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白——截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较。方法通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞... 目的体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白——截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较。方法通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态。结果两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24 h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞AnnexinV/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低。结论瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 doppel蛋白 朊蛋白 细胞毒性作用 细胞凋亡
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朊蛋白的功能及研究进展
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作者 范志勇 武志敏 +7 位作者 胡海燕 刘恋 陈嘉 胡超 严普 夏影 陈志宝 陈操 《黑龙江八一农垦大学学报》 2018年第3期20-23,92,共5页
朊蛋白因在一类称为朊病毒病的神经退行性疾病中扮演着重要角色而得到了广泛研究。目前,虽然在病理和传播方面已对这类疾病开展了大量研究,但致病的分子机制仍未阐明。那么,如何理解朊病毒病中朊蛋白致病的分子机制呢?从朊蛋白的生理功... 朊蛋白因在一类称为朊病毒病的神经退行性疾病中扮演着重要角色而得到了广泛研究。目前,虽然在病理和传播方面已对这类疾病开展了大量研究,但致病的分子机制仍未阐明。那么,如何理解朊病毒病中朊蛋白致病的分子机制呢?从朊蛋白的生理功能中可以获得哪些启发呢?伴随着这些问题,相信深入了解朊蛋白的生理功能可揭示其参与朊病毒病的致病过程。朊蛋白已被证明参与了许多生物学过程,如神经突触生成、神经内稳态、细胞信号转导、细胞粘附和抗应激的保护性作用。朊蛋白的这种多能性使研究人员无法准确了解朊蛋白的分子功能。将努力阐明朊蛋白在中枢神经系统和外周神经系统中的生理作用。 展开更多
关键词 朊蛋白 朊病毒 功能 小鼠模型 受体
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