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缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
胡静
俞守义
+1 位作者
阚飙
刘志华
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第11期1352-1356,共5页
目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部...
目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85。以EAggECO42为出发菌株,构建缺失irp8￣irp5约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85。结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因。PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株。结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础。
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关键词
肠集聚性粘附大肠杆菌
HPI毒力岛
耶尔森菌
缺失
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职称材料
题名
缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
胡静
俞守义
阚飙
刘志华
机构
南方医科大学流行病学教研室
中国疾病预防控制中心传染病研究所
南方医科大学南方医院感染内科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第11期1352-1356,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划项目资助(G1999054101)~~
文摘
目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85。以EAggECO42为出发菌株,构建缺失irp8￣irp5约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85。结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因。PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株。结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础。
关键词
肠集聚性粘附大肠杆菌
HPI毒力岛
耶尔森菌
缺失
Keywords
enteroaggregative E.coli
high-pathogenicity island
Yersinia
deletion
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定
胡静
俞守义
阚飙
刘志华
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
1
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