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木薯MebZIP11基因克隆与原核表达分析
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作者 雷鑫芳 潘子墨 +4 位作者 林素妍 罗佳科 吴春来 曾坚 胡伟 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期299-308,共10页
【目的】研究木薯A类碱性亮氨酸拉链11(Manihot esculenta basic leucine zipper11,MebZIP11)基因的功能,为探讨其转录因子在逆境胁迫中的作用提供依据。【方法】利用RT-PCR技术克隆木薯中的MebZIP11基因,并进行生物信息学分析。通过荧... 【目的】研究木薯A类碱性亮氨酸拉链11(Manihot esculenta basic leucine zipper11,MebZIP11)基因的功能,为探讨其转录因子在逆境胁迫中的作用提供依据。【方法】利用RT-PCR技术克隆木薯中的MebZIP11基因,并进行生物信息学分析。通过荧光定量PCR技术,分析MebZIP11基因在木薯不同组织和块根发育不同阶段中的表达模式,并评估其在多种逆境条件下的响应机制。【结果】MebZIP11基因位于木薯的第5号染色体,编码区全长1221 bp,具有典型的bZIP结构特征。序列比对显示,MebZIP11与麻风树和橡胶树的A类bZIP转录因子的序列同源性分别为80.00%和85.41%,确认其属于A类bZIP亚族。亚细胞定位试验显示,MebZIP11位于细胞核内。MebZIP11基因在储藏根的表达量最高。MebZIP11基因的表达量在甘露醇、NaCl和脱落酸处理下均显著升高,在H_(2)O_(2)和低温处理下其表达量均下降。通过原核表达系统获得了MebZIP11蛋白。【结论】木薯中的MebZIP11基因属于A类bZIP家族。MebZIP11基因在不同逆境和激素处理下表现出不同的响应程度。 展开更多
关键词 木薯 非生物胁迫 碱性亮氨酸拉链 逆境响应 原核表达
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木薯MePP2CAa基因克隆、表达及蛋白互作分析
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作者 曾坚 李丽珍 +6 位作者 沈梓欣 林墁 刘博婷 吴春来 李冰 胡伟 曾力旺 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期141-148,共8页
为探究2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在木薯响应非生物胁迫过程中的作用,利用木薯Arg7叶片cDNA扩增MePP2CAa基因,分析该基因序列、启动子活性、不同逆境和激素处理下的表达模式以及与ABA受体PYLs之间的互作关系。序列分... 为探究2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在木薯响应非生物胁迫过程中的作用,利用木薯Arg7叶片cDNA扩增MePP2CAa基因,分析该基因序列、启动子活性、不同逆境和激素处理下的表达模式以及与ABA受体PYLs之间的互作关系。序列分析结果显示,MePP2CAa基因全长1311 bp,编码436个氨基酸,具有PP2C家族的结构域特征,与橡胶树和麻风树的PP2C序列同源性最高,分别为78.95%和74.09%,在C端保守;qRT-PCR分析结果显示,MePP2CAa基因在木薯储藏根中的表达显著高于茎、叶中的表达量;不同逆境和激素处理结果显示,甘露醇、NaCl、ABA、MeJA、低温和SA处理可以显著诱导MePP2CAa基因的表达;MePP2CAa基因启动子序列分析显示,启动子包含ABA应答元件(abscisic acid responsive element,ABRE)、MeJA响应元件、干旱诱导元件等;酵母双杂交结果显示MePP2CAa能够与MePYL1互作。以上结果表明,MePP2CAa基因可能响应木薯的非生物胁迫。 展开更多
关键词 木薯 脱落酸 2C型蛋白磷酸酶 非生物胁迫
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