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木薯茎尖小滴玻璃化法超低温保存技术优化 被引量：1
1
作者 苗秀清 王敏瑞 +4 位作者 李志英 李季 王小冰 符运柳 徐立 《植物遗传资源学报》 北大核心 2025年第6期1191-1201,共11页
木薯(Manihot esculenta Crantz)作为重要的粮食与经济作物,其种质资源保存意义重大。目前小滴玻璃化法是操作最为简便、应用最广的茎尖超低温保存手段,但并未对木薯茎尖小滴玻璃化法进行系统优化。为此本研究首先对木薯茎尖小滴玻璃化... 木薯(Manihot esculenta Crantz)作为重要的粮食与经济作物,其种质资源保存意义重大。目前小滴玻璃化法是操作最为简便、应用最广的茎尖超低温保存手段,但并未对木薯茎尖小滴玻璃化法进行系统优化。为此本研究首先对木薯茎尖小滴玻璃化法超低温保存过程中的关键步骤进行优化,结果发现,在加载液处理前增加4 h蔗糖预培养搭配PVS2植物玻璃化溶液冰上冷冻保护50~60 min,能显著提升冷冻保存效果,但15个木薯品种的适用性测试结果不理想。因此本研究随后对茎尖超低温保存后的再生培养基进行优化,发现再生培养基中去除奈乙酸(NAA)和添加较低浓度的6-苄氨基嘌呤(6-BA)可避免冷冻后茎尖形成愈伤组织从而提高再生率,最终得到优化再生培养基RMB2:0.09μmol/L 6-苄氨基嘌呤+0.23μmol/L赤霉素+4.4 g/L MS培养基+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。木薯COL777、SC8002经冷冻保存后在RMB2上培养再生率分别为86%和69%。RMB2的7个木薯品种的测试发现,有4个木薯品种经冷冻保存后茎尖再生率达到30%以上。综合来说,80%的木薯品种经优化后超低温保存技术冷冻保存后获得30%以上的再生率,这一结果也使小滴玻璃化法具有更加广泛的品种适用性。本研究构建的小滴玻璃化法超低温保存体系简便高效,可有力推动木薯种质资源超低温保存工作的开展,更好地保护木薯种质资源。 展开更多
关键词 木薯 小滴玻璃化 超低温保存 冷冻保护剂 预培养 植物生长调节剂
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