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改良热硼酸法提取青香蕉果肉总RNA的条件优化 被引量:2
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作者 杨昭 何春兰 +4 位作者 李芬芳 陈娇 李奕星 陈文学 袁德保 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第15期49-53,共5页
针对青香蕉果肉组织富含多糖、多酚类物质的特点,采用改良热硼酸法提取青香蕉果肉组织中的总RNA,探讨提取缓冲液pH值、离子浓度、CaCl_2浓度、处理温度、处理时间、LiCl沉淀时间对总RNA提取质量的影响,并用异丙醇简化LiCl沉淀总RNA过程... 针对青香蕉果肉组织富含多糖、多酚类物质的特点,采用改良热硼酸法提取青香蕉果肉组织中的总RNA,探讨提取缓冲液pH值、离子浓度、CaCl_2浓度、处理温度、处理时间、LiCl沉淀时间对总RNA提取质量的影响,并用异丙醇简化LiCl沉淀总RNA过程。结果表明,获得了1种快速提取青香蕉果肉组织中总RNA的方法,经逆转录PCR(RT-PCR)验证,该方法适用于黄香蕉果肉、黄香蕉果皮、香蕉花、青香蕉果肉、青香蕉果皮中总RNA的提取。 展开更多
关键词 热硼酸法 青香蕉 异丙醇沉淀 总RNA
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香蕉3个Tau类谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及序列分析 被引量:15
2
作者 王卓 徐碧玉 +4 位作者 贾彩红 张建斌 刘菊华 苗红霞 金志强 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第9期1676-1681,共6页
为了获得香蕉抗逆相关基因,通过随机克隆测序和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)的方法从香蕉根系cDNA文库中获得3个谷胱甘肽硫转移酶基因,命名为MaGSTU1、MaGSTU2和MaGSTU3(GenBank登录号分别为:KC261934、KC261935和KC261936)... 为了获得香蕉抗逆相关基因,通过随机克隆测序和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)的方法从香蕉根系cDNA文库中获得3个谷胱甘肽硫转移酶基因,命名为MaGSTU1、MaGSTU2和MaGSTU3(GenBank登录号分别为:KC261934、KC261935和KC261936)。经5′RACE获得3个GST基因全长,分别包含1个627、675和699 bp的最大开放阅读框(Open Reading Frame,ORF),分别编码208、224和232个氨基酸的蛋白质。蛋白质序列同源比对发现其含有完整的GST_N_Tau和GST_C_Tau结构域。系统发育树显示所有Tau类GST基因聚成一大支,充分说明本研究克隆的3个基因为Tau类GST基因。这些结果为进一步分析该类基因的功能和今后香蕉抗逆分子育种提供了基础资料。 展开更多
关键词 香蕉 谷胱甘肽硫转移酶 基因克隆 序列分析
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乙烯和1-MCP处理对香蕉采后果皮色素含量及褪绿变黄的调控 被引量:14
3
作者 刘伟鑫 苗红霞 +4 位作者 金志强 刘菊华 贾彩红 孙佩光 徐碧玉 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1051-1055,共5页
【目的】为了揭示香蕉采后果皮色素代谢及褪绿变黄的生理机制,【方法】以‘巴西’蕉(MusaacuminateL.AAAgroup‘Brazilian’)果皮为试材,通过自然后熟、乙烯、1-MCP3种不同处理,分析果皮褪绿变黄与各种色素含量变化的相关关系。... 【目的】为了揭示香蕉采后果皮色素代谢及褪绿变黄的生理机制,【方法】以‘巴西’蕉(MusaacuminateL.AAAgroup‘Brazilian’)果皮为试材,通过自然后熟、乙烯、1-MCP3种不同处理,分析果皮褪绿变黄与各种色素含量变化的相关关系。【结果】在自然后熟过程中,叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量均呈下降趋势,类胡萝卜素含量逐渐上升;乙烯处理后0~12d,总叶绿素含量由32μg·g-1下降到2μg·g-1,同时类胡萝卜素迅速合成;1-MCP处理延缓了果皮叶绿素含量降解和类胡萝h素含量积累。相关性分析表明,在自然后熟和乙烯处理后,类胡萝卜素含量变化与叶绿素卜含量变化分别达到显著、极显著负相关;而1-MCP处理后类胡萝h素含量变化与叶绿素卜相关性不显著。【结论】香蕉采后果皮褪绿变黄过程可能主要涉及到叶绿素卜含量的下降和类胡萝卜素含量的上升。 展开更多
关键词 香蕉 果皮 色素代谢 褪绿 相关性
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25个油茶优良无性系的遗传分析与分子鉴别 被引量:11
4
作者 孙佩光 奚如春 +3 位作者 李俊成 欧阳昆唏 钟燕梅 陈晓阳 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期83-88,共6页
【目的】为油茶种质资源的合理利用奠定理论基础,为油茶优良品种资源保护提供技术支持.【方法】采用SRAP分子标记对来源于江西省的25个油茶优良无性系进行遗传分析与分子鉴别.【结果和结论】11对SRAP引物组合共扩增出347个位点,其... 【目的】为油茶种质资源的合理利用奠定理论基础,为油茶优良品种资源保护提供技术支持.【方法】采用SRAP分子标记对来源于江西省的25个油茶优良无性系进行遗传分析与分子鉴别.【结果和结论】11对SRAP引物组合共扩增出347个位点,其中多态性位点332个,多态性位点占比为95.68%.聚类分析结果表明,25个油茶优良无性系的遗传距离介于0.2556~0.7384,平均遗传距离为0.5999,表明这些油茶无性系的地理来源相近.在遗传距离为0.5280处,可以将25个油茶优良无性系分为5组.利用筛选出的引物构建了25个油茶优良无性系的DNA指纹图谱,每一对引物构建的指纹图谱均可以用于25个优良无性系的分子鉴别. 展开更多
关键词 油茶 优良无性系 SRAP 遗传分析 分子鉴别
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海南山竹果实不同部位多酚提取物抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究 被引量:13
5
作者 谭琳 周兆禧 +2 位作者 王甲水 马伏宁 康由发 《广东农业科学》 CAS 2018年第1期102-107,共6页
了解海南山竹果皮和果肉的多酚含量及其抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,为引导消费、开发利用奠定基础。以采自海南五指山的山竹果实为材料,用95%的乙醇提取山竹果皮和果肉多酚,采用福林-酚法测定总酚含量。... 了解海南山竹果皮和果肉的多酚含量及其抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,为引导消费、开发利用奠定基础。以采自海南五指山的山竹果实为材料,用95%的乙醇提取山竹果皮和果肉多酚,采用福林-酚法测定总酚含量。对获得的山竹果皮和果肉多酚提取物进行羟自由基(·OH)、DPPH自由基、ABTS自由基清除率以及乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性测定。结果表明,山竹果皮多酚含量很高,达21.36mg/g(干重),对·OH、DPPH自由基和ABTS+·均具有良好的清除活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为37.39、41.34、41.37μg/mL;山竹果皮多酚对乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶也具有很强的抑制活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为29.46、7μg/mL;山竹果肉多酚含量较低,为0.388mg/g(干重),清除DPPH自由基、ABTS+·和·OH活性较弱,但表现出浓度依赖效应。山竹果肉多酚对α-葡萄糖苷酶具有中等程度的抑制活性(IC50为2.24mg/mL),对乙酰胆碱酯酶抑制活性较弱。山竹果皮多酚具有良好的抗氧化性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性;山竹果肉多酚具有中等程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,一定的抗氧化性和乙酰胆碱酯酶抑制活性。 展开更多
关键词 山竹 果实多酚 抗氧化活性 自由基清除活性 乙酰胆碱酯酶抑制活性 α-葡萄糖苷酶抑制活性
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不同种植模式对香蕉根区土壤养分及可培养微生物数量的影响 被引量:13
6
作者 王丽霞 井涛 +4 位作者 殷晓敏 苏璐 王必尊 李敬阳 何应对 《中国南方果树》 北大核心 2020年第4期80-86,89,共8页
在增施有机肥的基础上,研究香蕉间作假花生、韭菜、行间稻草覆盖处理等不同种植模式对香蕉根区土壤养分及可培养微生物数量的影响。结果表明,不同种植模式对香蕉根区土壤养分和可培养微生物数量的影响差异显著(p<0.05)。其中,间作和... 在增施有机肥的基础上,研究香蕉间作假花生、韭菜、行间稻草覆盖处理等不同种植模式对香蕉根区土壤养分及可培养微生物数量的影响。结果表明,不同种植模式对香蕉根区土壤养分和可培养微生物数量的影响差异显著(p<0.05)。其中,间作和稻草覆盖处理的香蕉根区土壤有机质、pH值、全氮、速效磷、速效钾含量显著高于单作模式,最大增加比例分别为44.18%、12.59%、58.42%、19.15%和101.52%,速效钾的涨幅最大;间作韭菜、假花生和覆盖稻草处理显著提高了香蕉根区土壤可培养细菌和放线菌数量,降低了尖孢镰刀菌数量;但覆盖稻草处理可能增加香蕉枯萎病发生的风险。因此,相对于单一香蕉的栽培模式,蕉园间作假花生和韭菜有利于改善蕉园土壤理化状况及根区微域环境。 展开更多
关键词 香蕉 间作 稻草覆盖 土壤养分 土壤微生物
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外源抗坏血酸对香蕉常温后熟期果实品质的影响 被引量:11
7
作者 陈娇 李芬芳 +1 位作者 李奕星 袁德保 《中国南方果树》 北大核心 2020年第1期56-60,共5页
为探究外源抗坏血酸对香蕉果实常温后熟期品质变化的影响,本研究以"巴西"香蕉为材料,用0.5%(质量体积百分比W/V)的抗坏血酸浸泡处理,以清水为对照,0.03 mm厚聚乙烯打孔薄膜袋包装后,于常温(25±2)℃、相对湿度85%~95%的... 为探究外源抗坏血酸对香蕉果实常温后熟期品质变化的影响,本研究以"巴西"香蕉为材料,用0.5%(质量体积百分比W/V)的抗坏血酸浸泡处理,以清水为对照,0.03 mm厚聚乙烯打孔薄膜袋包装后,于常温(25±2)℃、相对湿度85%~95%的环境中贮藏。研究结果表明,抗坏血酸处理有效抑制了香蕉果实常温后熟期呼吸和乙烯释放速率,保持果实的硬度和色度,抑制可溶性固形物和维生素C含量的减少,同时有效抑制电导率的上升和丙二醛的积累。可见,抗坏血酸能够有效延缓香蕉的衰老进程,保持香蕉果实品质,抑制采后香蕉果实膜脂过氧化的发生,从而延长香蕉果实贮藏期。 展开更多
关键词 香蕉 抗坏血酸 后熟 衰老 品质
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不同乙烯利浓度及贮藏温度对“南天黄”香蕉果实后熟品质的影响 被引量:10
8
作者 李芬芳 李奕星 +2 位作者 袁德保 洪克前 陈娇 《中国南方果树》 北大核心 2022年第2期72-77,83,共7页
为明确“南天黄”香蕉果实的催熟浓度、温度等条件,为生产上催熟提供技术参考。以“南天黄”香蕉果实为试材,比较1、0.8、0.5 g/L乙烯利处理后,14、18、22℃贮藏对果实后熟进程、果皮色度、果肉硬度和可溶性固形物含量等变化的影响。结... 为明确“南天黄”香蕉果实的催熟浓度、温度等条件,为生产上催熟提供技术参考。以“南天黄”香蕉果实为试材,比较1、0.8、0.5 g/L乙烯利处理后,14、18、22℃贮藏对果实后熟进程、果皮色度、果肉硬度和可溶性固形物含量等变化的影响。结果表明,随着乙烯利浓度及贮藏温度提高,香蕉果实色差H值和硬度下降速度及可溶性糖含量增加速度加快,后熟进程加快。贮藏温度对果实后熟品质的影响明显,14、18和22℃贮藏的香蕉,分别在10、5和3 d达到可供上市的成熟度。另外,1 g/L乙烯利处理的香蕉18℃贮藏7 d后再转入14℃贮藏能较好地保持果实品质13 d。建议根据“南天黄”果实上市的实际情况设置不同的催熟条件。 展开更多
关键词 香蕉 “南天黄” 催熟 乙烯利 后熟 可溶性固形物
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香蕉多酚氧化酶基因编码序列的电子克隆和生物信息学分析 被引量:5
9
作者 谭琳 陈娇 +5 位作者 李奕星 李芬芳 郑晓燕 郑丽丽 臧小平 袁德保 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期112-116,共5页
用电子克隆方法获得香蕉多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)基因编码序列。采用生物信息学方法,对此序列编码的蛋白质从氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、高级结构及功能域等方面进行了预测和分析。结果表明:香蕉PPO... 用电子克隆方法获得香蕉多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)基因编码序列。采用生物信息学方法,对此序列编码的蛋白质从氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、高级结构及功能域等方面进行了预测和分析。结果表明:香蕉PPO基因编码序列全长1 602 bp,包含1 602 bp开放阅读框(open reading frame,ORF),含有PPO功能域和酪氨酸酶功能域,在序列组成、高级结构及活性位点等方面,与小麦等其他植物的PPO基因具有高度的相似性。 展开更多
关键词 香蕉 多酚氧化酶基因编码序列 电子克隆 生物信息学
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青香蕉多酚氧化酶的提取工艺研究 被引量:4
10
作者 杨昭 王军 +5 位作者 仇厚援 谭琳 李芬芳 李奕星 袁德保 陈文学 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期92-96,100,共6页
基于青香蕉组织致密性及多酚氧化酶(PPO)存在形式与成熟香蕉差别较大的特点,以PPO比活力为考察指标,研究缓冲液种类、离子强度、pH值、液料比、聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)、吐温-80(Tween 80)、浸提时间、提取次数对PPO提取效果的影响。获... 基于青香蕉组织致密性及多酚氧化酶(PPO)存在形式与成熟香蕉差别较大的特点,以PPO比活力为考察指标,研究缓冲液种类、离子强度、pH值、液料比、聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)、吐温-80(Tween 80)、浸提时间、提取次数对PPO提取效果的影响。获得最佳提取工艺条件:0.05 mol/L、pH 6.0的磷酸缓冲液,内含5%的PVPP和1%的Tween 80,液料比1.5∶1(V/W),10 000 r/min匀浆机打浆20 s,4℃以10 000 r/min离心30 min,残渣重复提取1次,上清液即为粗酶液,酶比活力为1 574.06 U/mg。 展开更多
关键词 青香蕉 多酚氧化酶 提取 比酶活 正交试验
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贵州香蕉发展现状及分析 被引量:8
11
作者 王甲水 徐碧玉 +3 位作者 李敬阳 刘菊华 卢加举 金志强 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期44-45,48,共3页
贵州黔西南等地区地处我国南亚热带地区,近年来热带果树香蕉已成为该低热河谷地区农民的重要经济来源之一,并形成了黔西南、桂西北山地香蕉特色产业带。概述了国内香蕉产业现状,分析了贵州香蕉生产情况、种植特点和经营模式等,并结合我... 贵州黔西南等地区地处我国南亚热带地区,近年来热带果树香蕉已成为该低热河谷地区农民的重要经济来源之一,并形成了黔西南、桂西北山地香蕉特色产业带。概述了国内香蕉产业现状,分析了贵州香蕉生产情况、种植特点和经营模式等,并结合我国当前香蕉产业发展状况,对贵州香蕉生产的科学、可持续发展提出建议。 展开更多
关键词 贵州 香蕉 产业现状
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香蕉多酚氧化酶的纯化、酶学性质及活性抑制的研究进展 被引量:4
12
作者 袁德保 杨昭 +5 位作者 李芬芳 谭琳 李奕星 陈娇 郑晓燕 郑丽丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第19期330-335,共6页
多酚氧化酶(PPO)是引起香蕉酶促褐变的关键酶。在香蕉采后及加工过程中,PPO与香蕉的品质有重要关系。本文综述香蕉PPO的分离纯化、酶学性质以及活性抑制等方面的研究进展,以期为香蕉加工科研工作提供一定的借鉴。
关键词 香蕉多酚氧化酶 纯化 特性 活性抑制
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香蕉水通道蛋白SIP2-1基因的克隆和表达分析 被引量:3
13
作者 许奕 侯晓婉 +3 位作者 徐碧玉 金志强 胡伟 宋顺 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期81-86,共6页
从香蕉中克隆了一个水通道蛋白(AQP)基因MaSIP2-1。序列分析表明,该基因存在一个完整的开放阅读框(ORF)717 bp,编码239个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,MaSIP2-1所编码的蛋白与其他植物中AQP编码的蛋白具有较高的一致性。其中与... 从香蕉中克隆了一个水通道蛋白(AQP)基因MaSIP2-1。序列分析表明,该基因存在一个完整的开放阅读框(ORF)717 bp,编码239个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,MaSIP2-1所编码的蛋白与其他植物中AQP编码的蛋白具有较高的一致性。其中与马来西亚野生香蕉、油棕、麻风树、野茶树的AQP编码的氨基酸序列的同源性较高,分别为98%、74%、65%和63%。器官特异性分析表明,Ma SIP2-1在香蕉的根、茎、叶片、花和果实中均有所表达,其中在茎中表达量较高。通过对其在干旱、高盐、低温、涝害胁迫下的表达结果分析显示,该基因响应干旱、高盐、涝害3种胁迫。 展开更多
关键词 水通道蛋白 SIP 香蕉 生物信息学 胁迫 荧光定量PCR
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香蕉多酚氧化酶成熟蛋白的原核表达 被引量:3
14
作者 陈娇 孙长君 +8 位作者 杨昭 王朝政 李奕星 李芬芳 袁德保 谭琳 仇厚援 陈文学 金志强 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第12期2198-2203,共6页
笔者所在课题组从巴西香蕉中分离到1个PPO基因全长,并进行了原核表达,但结果未表达出目的蛋白。鉴于上述情况,笔者对香蕉PPO全蛋白进行转移肽分析,结果发现其N端含有转移肽,长度为47个氨基酸。切除转移肽并进行香蕉PPO成熟蛋白原核表达,... 笔者所在课题组从巴西香蕉中分离到1个PPO基因全长,并进行了原核表达,但结果未表达出目的蛋白。鉴于上述情况,笔者对香蕉PPO全蛋白进行转移肽分析,结果发现其N端含有转移肽,长度为47个氨基酸。切除转移肽并进行香蕉PPO成熟蛋白原核表达,SDS-PAGE电泳检测结果表明,在62 ku处有一条特异的蛋白条带,与预测大小相符;并且进行质谱分析,结果确定重组表达蛋白为香蕉PPO,初步说明转移肽对香蕉PPO体外表达的影响,为进一步研究香蕉PPO功能及在香蕉褐变生理和调控机制中的作用提供理论基础。 展开更多
关键词 香蕉 多酚氧化酶 转移肽 成熟蛋白 原核表达
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香蕉PPO基因的克隆及原核表达 被引量:3
15
作者 陈娇 袁德保 +7 位作者 谭琳 杨昭 李奕星 王朝政 李芬芳 仇厚援 陈文学 金志强 《贵州农业科学》 CAS 2015年第7期14-18,共5页
为进一步在蛋白水平上研究香蕉PPO功能及获得抗酶促褐变的香蕉新品种,通过PCR从巴西蕉中扩增出多酚氧化酶基因(PPO)全长序列,并进行进化树分析与SDS-PAGE电泳检测。结果显示:多酚氧化酶基因全长1 767bp,编码588个氨基酸,GenBank登录号为... 为进一步在蛋白水平上研究香蕉PPO功能及获得抗酶促褐变的香蕉新品种,通过PCR从巴西蕉中扩增出多酚氧化酶基因(PPO)全长序列,并进行进化树分析与SDS-PAGE电泳检测。结果显示:多酚氧化酶基因全长1 767bp,编码588个氨基酸,GenBank登录号为KF900300.1。与其他物种PPO基因的氨基酸序列有很高的结构相似性,并同时具有保守结构域CuA和CuB,香蕉PPO蛋白与菠萝亲缘关系最近。另外,成功构建原核表达载体pQE80L-MaPPO1,并转化E.coli M15,但未表达出目的蛋白,推测可能与MaPPO1中存在导肽有关。 展开更多
关键词 香蕉 多酚氧化酶 克隆 原核表达
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香蕉MYB转录因子基因的电子克隆及生物信息学分析 被引量:4
16
作者 谭琳 康由发 +3 位作者 郑晓燕 黄丽娜 陈娇 马蔚红 《广东农业科学》 CAS 2015年第4期123-128,F0003,共7页
采用电子克隆方法获得香蕉MYB基因。通过生物信息学方法,对此序列编码的蛋白质从氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、结构域及其空间结构等方面进行了预测和分析。结果表明:香蕉MYB基因编码序列全长1 266 bp,包含1 266 bp的开放阅读... 采用电子克隆方法获得香蕉MYB基因。通过生物信息学方法,对此序列编码的蛋白质从氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、结构域及其空间结构等方面进行了预测和分析。结果表明:香蕉MYB基因编码序列全长1 266 bp,包含1 266 bp的开放阅读框,编码413个氨基酸,含有1个保守的MYB功能域、1个SANT保守结构域。在序列组成、理化性质、结构域及空间构象等方面,与小麦等其他植物的MYB转录因子具有高度的相似性。 展开更多
关键词 香蕉 MYB基因 电子克隆 生物信息学
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香蕉泛素结合酶基因的克隆及其功能初步分析 被引量:2
17
作者 李羽佳 金志强 +5 位作者 刘菊华 贾彩红 张建斌 王甲水 许奕 徐碧玉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期1098-1102,共5页
根据香蕉根系均一化全长cDNA文库筛选出一个香蕉泛素结合酶基因的片段通过RACE技术克隆该基因,命名为mauce2。生物信息学分析表明,该基因全长为929 bp,有一个完整的ORF编码148个氨基酸,蛋白分子量为16 505.1 ku,理论等电点为8.41,是一... 根据香蕉根系均一化全长cDNA文库筛选出一个香蕉泛素结合酶基因的片段通过RACE技术克隆该基因,命名为mauce2。生物信息学分析表明,该基因全长为929 bp,有一个完整的ORF编码148个氨基酸,蛋白分子量为16 505.1 ku,理论等电点为8.41,是一个碱性氨基酸。与江南卷柏、大豆、苹果、拟南芥的同源性为97.97%、97.30%、96.62%、95.95%。器官特异性表达分析表明,该基因在各器官中均有表达,在花中表达量最高,根次之,叶中表达量最低。 展开更多
关键词 香蕉 泛素结合酶基因 克隆 实时定量PCR 组织特异性表达分析
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香蕉MaAQP1启动子诱饵载体及干旱胁迫酵母单杂交cDNA文库的构建 被引量:2
18
作者 许奕 李羽佳 +4 位作者 魏卿 王安邦 王笑一 宋顺 李敬阳 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1078-1085,共8页
【目的】香蕉MaAQP1能够提高植物的耐旱性,研究香蕉MaAQP1的相关特性可为了解其干旱胁迫响应机制奠定基础。【方法】通过克隆MaAQP1的启动子,将启动子构建到pHIS2诱饵质粒上,转化酵母菌构建诱饵表达载体,同时构建干旱胁迫的香蕉(Musa ac... 【目的】香蕉MaAQP1能够提高植物的耐旱性,研究香蕉MaAQP1的相关特性可为了解其干旱胁迫响应机制奠定基础。【方法】通过克隆MaAQP1的启动子,将启动子构建到pHIS2诱饵质粒上,转化酵母菌构建诱饵表达载体,同时构建干旱胁迫的香蕉(Musa acuminat L. AAA group cv. Brazilian)cDNA文库。【结果】克隆获得1 362 bp的启动子序列,通过分析其顺式作用元件,结果显示启动子序列中共有72个顺式作用元件,包括了TATA-box和CAAT-box核心元件,ABA响应元件、MYB元件、MYC元件、ERE元件、MeJA响应元件、光响应元件以及分生组织响应元件等;成功构建了MaAQP1诱饵载体和干旱胁迫条件下的cDNA文库,文库库容为1.25×107 CFU,插入片段平均在1 200 bp左右。【结论】本研究克隆获得了香蕉MaAQP1启动子并构建了干旱胁迫酵母单杂交cDNA文库,为下一步运用酵母单杂交筛选MaAQP1互作的转录因子、解析MaAQP1响应干旱胁迫的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 香蕉 干旱 MaAQP1 诱饵载体 CDNA文库
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香蕉MaERF-1基因的克隆、序列分析及表达载体构建 被引量:2
19
作者 宋顺 金志强 +4 位作者 徐碧玉 黄东梅 胡伟 李凯 许奕 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期76-82,共7页
从香蕉中克隆了1个乙烯响应因子(ERF)Ma ERF-1。序列分析表明,该基因存在1个完整的开放阅读框(ORF)729 bp,编码243个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,Ma ERF-1所编码的蛋白与其他植物中ERF编码的蛋白具有较高的一致性。其中与马来... 从香蕉中克隆了1个乙烯响应因子(ERF)Ma ERF-1。序列分析表明,该基因存在1个完整的开放阅读框(ORF)729 bp,编码243个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,Ma ERF-1所编码的蛋白与其他植物中ERF编码的蛋白具有较高的一致性。其中与马来西亚野生香蕉同源性最高达98%,与油棕、菠萝、海枣、葡萄、荷花、烟草的Ma ERF编码的氨基酸序列的同源性分别为65%、60%、59%、54%、53%、51%。Ma ERF-1编码的蛋白质分子量为26 139.03 u,理论等电点p I为7.81,其亲水性氨基酸均匀分布在整个肽链中,多于疏水性氨基酸。通过PCR和酶切反应鉴定成功构建该基因的表达载体。 展开更多
关键词 乙烯响应因子 ERF 香蕉 生物信息学 表达载体
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香蕉肉桂醇脱氢酶基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 王卓 徐碧玉 +5 位作者 贾彩红 李健平 刘菊华 张建斌 苗红霞 金志强 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1305-1310,共6页
肉桂醇脱氢酶(CAD)在木质素合成过程中起关键作用。通过RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从香蕉根系cDNA均一化全长文库中获得一个肉桂醇脱氢酶基因,命名为MaCAD1(GenBank登录号为KF582533)。MaCAD1是香蕉MYB基因编码框全长c... 肉桂醇脱氢酶(CAD)在木质素合成过程中起关键作用。通过RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从香蕉根系cDNA均一化全长文库中获得一个肉桂醇脱氢酶基因,命名为MaCAD1(GenBank登录号为KF582533)。MaCAD1是香蕉MYB基因编码框全长cDNA,包含一个1 077bp的最大开放阅读框(ORF),编码358个氨基酸。蛋白质序列同源比对发现,其含有完整的醇脱氧酶的典型保守结构域,属于典型的CAD蛋白。系统进化树比对分析表明,MaCAD1与水稻OsCAD6(CAD39907)的亲缘关系较近。组织特异性研究表明MaCAD1基因组成型表达于香蕉各个组织。在耐病和感病品种中,MaCAD1均上调表达,但在耐病品种中MaCAD1在所有时间点相对于对照增加的倍数均高于感病品种,表明MaCAD1基因在香蕉的抗病性中起着重要作用,MaCAD1可以作为一个新的响应枯萎病侵染的标记基因。 展开更多
关键词 香蕉 肉桂醇脱氢酶 基因克隆 表达分析
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